酶联免疫吸附实验_第1页
酶联免疫吸附实验_第2页
酶联免疫吸附实验_第3页
酶联免疫吸附实验_第4页
酶联免疫吸附实验_第5页
已阅读5页，还剩3页未读， 继续免费阅读

付费下载

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

实验一酶联免疫吸附实验

(enzymelinkedimmunosorbent

assay,ELISA)1一、实验目的

1.掌握酶联免疫吸附试验的基本方法及原理

2.掌握酶联免疫吸附试验结果的观察与判断

3.了解ELISA在微生物检测中的应用二、实验原理抗原或抗体结合到固相载体的表面仍保持其活性抗原或抗体与酶交联成酶标抗原或抗体后，仍保持其免疫活性和酶活性标本中的抗原或抗体、标记抗原或抗体能按一定的次序与固相载体表面的抗原或抗体反应，并通过底物与酶的反应来反映标本中的抗原或抗体的量2

三、实验材料

1.器材

1）酶联免疫检测仪

2）12联孔聚苯乙烯条

3）37℃温箱

4）微量加液器及移液器头2.试剂

1）包被液

2）pH7.4磷酸盐缓冲液3）洗涤液3

三、实验材料

2.试剂

4）封闭液：5）酶标抗体稀释液6）底物液7）终止液8）未知抗原

9）HRP羊抗兔血清：4四、实验步骤

1、稀释未知抗原：用pH9.60.05M碳酸缓冲液将抗原稀释至

2、包被未知抗原：在聚苯乙烯板的反应孔中，各加入不同稀释倍数的抗原0.1ml，以不加抗原的两孔为对照，置于4℃冰箱过夜或37℃2小时

5四、实验步骤

3、洗涤：快速甩动12联孔条，倒出孔内包被液，之后在每小孔加入

洗涤缓冲液，室温静置放3min，甩出洗涤缓冲液，重复三次。最后把反应板倒置在吸水纸上，使孔中洗涤液流尽

4、封闭：每小孔加封闭液

5、洗涤：同上

6、加酶标抗体：各孔中加入新配制酶标记抗体6四、实验步骤

7、洗涤：同上

8、加底物显色：各反应孔中加底物溶液

9、终止反应：待有颜色反映时，于各反应孔加入终止液

10、比色：在酶标仪上，于450nm读取A或

OD值

7五、

人人文库> 全部分类> 应用文书 > 作业报告

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论