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1本标准规定了红醋栗无性繁殖技术,包括相关术语和定义、分株繁殖、扦插繁殖、压条繁殖、组织培养以及苗木出圃、育苗档案等技术内容。本标准适用于辽宁省红醋栗无性繁殖育苗的生产作业。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB6000主要造林树种苗木质量分级GB/T8321农药合理使用准则LY/T1882林木组织培养育苗技术规程3术语与定义下列术语和定义适用于本文件。3.1无性繁殖是指没有精子或卵子直接参与的繁殖过程,是由树木母体的一群细胞、部分组织或器官,通过体细胞有丝分裂,分化发育成各种组织和器官,形成完整植株的繁殖方法。3.2分株繁殖是将母树的萌蘖枝、丛生枝、匍匐枝等从母株上分离,栽植为独立新植株的方法。3.3扦插繁殖是将母体植株上切离下来的芽、叶、根、茎、变态茎等营养体插在栽培基质中,使之重新形成新的、完整植株的繁殖方法。3.4压条繁殖是使连在母株上的枝条形成不定根,然后再切离母株成为一个新生个体的繁殖方法。3.5植物组织培养2是指通过无菌操作将植物体的一部分接种到培养基上,并在人工控制的条件下使其发育成完整植株的过程。4红醋栗无性繁殖技术4.1分株繁殖技术4.1.1繁殖时期分株繁殖时期为春季芽萌动之前或秋季落叶后。4.1.2繁殖材料材料为4a生以上红醋栗树。4.1.3繁殖方法a)将准备分株的红醋栗树挖出,把要分离的植株从母体分离,分离的植株应带有须根,保留3个~4个结果枝。b)分株后,浸根24h后进行栽植,栽植株行距为1m×2m。如需远距离运输,则分株苗根系需蘸泥浆。c)秋季分株的苗,不立即进行栽植,则需要进行假植。即在上冻前挖好储藏沟,沟宽1.2m,深40cm,长度视苗木数量而定。采用沙藏层积法,完成后灌透水。4.1.4抚育管理a)灌水:春季分株的苗木,栽植后要及时灌水,7d~10d再灌水1次,15d~20d再灌水1次,5月中旬和6月中旬各灌1次水,霜降前浇1次封冻水。秋季分株的苗木,栽植后立即灌水,霜降前浇上冻水,翌年4月初第1次灌水;5月中旬第2次灌水;6月中旬第3次灌水;第4次封冻水,在土壤封冻前进行。b)中耕除草:松土深度10cm~15cm,在一个生长季中,除草3次~4次。c)施肥:一般1a中进行2次追肥。第1次在5月中旬左右,追施以氮、磷为主的化肥,每株丛施50g~100g;第2次在6月中旬至下旬,以磷、钾化肥为主,每株丛施50g~100g;追肥采用沟施或结合中耕进行,施肥后进行灌水。4.2扦插繁殖技术4.2.1硬枝扦插插条选择a)选条:通过优树选择,建立采穗圃,从中选择优质插条。b)采条时间:春季萌芽前(3月~4月)或秋季入冬前(10月~11月)。插条贮存a)沟藏贮存:冬剪采集的插条,宜采用沟藏法贮存。贮存沟选择排水良好的背阴处,宽1.0m~1.5m、深1.2m,长度根据插条数量确定。贮藏插条时,先在沟底铺一层湿沙,将插条成捆平放在沟底,一层插条一层湿沙,沙子的湿度以手握成团为宜,最上层插条距地面20cm~30cm,最后覆土略高于地面3cm~5cm。b)短期贮存:春季采集的插条可用湿沙覆盖贮存。插穗的剪截3先将同一插条的基部芽欠饱满及梢部木质化程度不足的部分剪除,再剪取直径0.5cm~1.5cm、长度10cm~15cm的插条作为插穗。剪穗要在室内或庇荫背风处进行,上端平剪,剪口距离芽1.0cm~1.5cm,下端斜剪,剪口呈马耳形。剪好的插穗按粗细分级,每捆100根~150根,下端对整齐。整地和土壤处理主要是翻耕、耙地、平整、镇压,清除草根、石块等,做到深耕细整、地平土碎。然后用0.2%高锰酸钾消毒。垄做好后浇灌大水,自然晾干。扦插a)扦插时间:春季气温稳定通过12℃时,可实施扦插。b)生根处理:采用木本植物速蘸发根剂(专利号.10g溶入1L水中,配制成生根剂原液,速蘸10s处理。c)扦插方式:垄插,每垄2行,行距20cm~30cm,株距10cm~20cm,深度3cm~5cm,扦插后踏实。抚育管理a)扦插后,要及时浇1次透水。30d为生根期,要保证土壤湿度达到田间持水量的80%。b)插穗发芽长出新枝至成活,除继续做好土壤的水分管理外,当幼苗长至10cm时,应及时摘除侧芽,每穗留一个直立、健壮的新枝,同时对叶面喷施0.2%~0.3%的磷酸二氢钾溶液,每7d喷施1次,连喷2次~3次。适时进行松土、除草、灌水,速生期(6月中旬~7月中旬)追施氮磷复合肥1次,用量60g·m-2。4.2.2嫩枝扦插苗床准备a)苗床长度随地形设计、宽1.0m~1.2m,在圃地上起高床,设置好排水沟,床面铺一层10cm厚的鲜细河沙。b)消毒:扦插前1d~2d用0.2%~0.3%高锰酸钾水溶液喷淋床面,喷药量3g·m-2,24h后用清水充分淋洗,淋洗3h~4h后扦插。插穗制作在阴天全天或晴天早晚时,剪取半木质化枝条。剪取插穗应避免阳光直射,剪口要平滑,上口平剪,下口马耳形,除去下部叶片,保留上部2个~3个叶片,穗长10cm~15cm。按每捆100根~150根,立放在阴凉处喷水或水池里,上端覆盖湿麻袋遮阴,下端浸水保湿。生根处理a)生根方法:采用木本植物速蘸发根剂(专利号:ZL200510045674.4)10g溶入1L水中,配制成生根剂原液,速蘸10s处理。b)处理部位:插穗基部。c)蘸药深度:2cm~3cm。扦插a)扦插前将插床喷透水。b)扦插时间:在傍晚或早晨进行。c)扦插密度:株行距为5cm×5cm或4cm×5cm。d)扦插深度:2cm~3cm。e)插后立即喷水。抚育管理4a)水分管理:少量多次喷水,使插穗叶片表面有一层水膜。待大部分插穗生根后(约15d),逐渐减少喷雾。井水水温较低,不利于插穗生根,可通过修建晒水池实现对水温的自然调节。b)后期管理:扦插后可喷施营养液(0.3%尿素+0.2%磷酸二氢钾混合液),用量0.25kg·m-2,每7d喷施1次,连喷2次~3次;扦插后30d,追施氮磷复合肥1次,用肥量60g·m-2,施肥后立即喷水,适时松土、除草、灌水。越冬管理在上冻前挖好储藏沟,沟宽1.2m,深40cm,长度视苗木数量而定。采用沙藏层积法进行防寒,完成后灌透水。归圃育苗选择地势平坦、背风向阳、排水良好、土层深厚50cm以上、土质肥沃、有灌溉条件的沙壤土或壤土为苗圃地。深翻20cm~25cm,经整平耙细后,进行栽植。行距15cm~20cm,株距8cm~10cm,栽植后灌水。后期适时进行除草、松土。6月上旬和7月上旬,分别追施1次磷酸二铵,施肥量为0.03kg·m-2。4.3压条繁殖技术4.3.1繁殖时期在早春芽萌动前进行。4.3.2繁殖材料选择红醋栗1a~2a生枝条。4.3.3繁殖方法a)枝条处理:生根部位剥开5mm×5mm的枝皮,环割皮层,深达木质部。b)生根剂处理:用棉签蘸生根剂(木本植物速蘸发根剂,专利号:ZL200510045674.4,2.5g溶入1L水中)涂抹在处理口上。c)弯曲枝条埋入挖好的沟中,沟深15cm~20cm,近母株一侧为斜面,以使枝条与土壤密切接触,相对的外侧为垂直面,以引导新梢垂直向上生长,顶端露出地面,用弯成“U”形的铁丝(12#铁线)反扣将其固定、覆土。d)新生植株生长健壮后,再与母株割离。4.3.4抚育管理a)中耕除草:松土深度10cm~15cm,在一个生长季中,除草3次~4次。b)施肥:一般1a中进行2次追肥。第1次在5月中旬左右,追施以氮、磷为主的化肥,每株施50g~100g;第2次在6月中旬至下旬,以磷、钾化肥为主,每株施50g~100g;追肥采用沟施或结合中耕进行,施肥后进行灌水。c)灌水:4月初第1次灌水,有利于树木的生长发育;5月中旬第2次灌水,有利于新梢生长;6月中旬第3次灌水,对促进根系迅速生长有明显的作用;第4次封冻水,在土壤封冻前进行,防止因生理干旱造成树木的干枯和死亡。4.4组织培养技术4.4.1取材时期4月初,在芽尚未萌动前。4.4.2外植体采集5在晴天或露水干后剪取母株当年生长健壮木质化或半木质化枝条作为外植体。4.4.3外植体修剪去除枝条上叶片,剪成具1个~2个饱满健壮腋芽的4cm~5cm小段。4.4.4外植体清洗修剪好的茎段按木质化程度放置于不同的烧杯中,加入洗洁精进行表面冲洗,洗好后冲洗掉泡沫,放在水龙头下冲洗。冲洗1h~2h后,置于超净工作台(已开机、灭菌20min以上)备用。4.4.5外植体消毒灭菌用75%酒精浸泡30s,无菌水冲洗2次~3次,然后按材料的木质化程度,分别用0.1%升汞浸泡6min~8min,最后用无菌水冲洗5次~6次后放入超净工作台中备用。4.4.6不定芽诱导外植体接种将冲洗干净、沥干水分的外植体按无菌操作的要求,切成长约1cm,具1个~2个腋芽的茎段,插入配方为MS+6-BA0.6mg·L-1+IBA0.04mg·L-1+AC1.0g·L-1+白糖35mg·L-1+琼脂8mg·L-1固体培养基中进行培养,每瓶接种一个芽。培养条件培养室温度控制在23±2℃,光照度为1500lX-2000lX,光照时间为14h~16h/d。4.4.7继代培养丛生芽接种当初代诱导的不定芽长到1.5cm或以上时,将萌发的幼芽从基部切下,去掉茎尖,切成高1.5cm左右接种到配方为MS+6-BA0.6mg·L-1+IBA0.04mg·L-1+AC1.0g·L-1继代培养基中进行不定芽的增殖培养。培养条件培养条件同。4.4.8生根培养生根苗接种将生长健壮的不定芽切成1.5cm单芽接种在1/2MS+IBA0.4+白糖30mgL-1的生根培养基中。待每株苗生根2条~4条时,即可进行组培苗移栽炼苗。培养条件培养室温度25℃~28℃,光照强度为3000lx~4000lx,每天光照14h~16h。4.4.9组培苗移栽炼苗炼苗a)炼苗时期:5月中旬。b)闭瓶锻炼:将瓶装试管苗移至日光温室或大棚,温度控制在35℃以下,按照循序渐进原则利用遮阳网控制棚内光照强度由50%逐渐增加至全光照,逐渐增加自然光照,在清早、傍晚和阴雨天光线较弱的时进行全光照。保留瓶盖培养10d左右。6c)开瓶锻炼:闭瓶锻炼结束后,除去瓶盖继续锻炼2d~5d,培养基表面未出现大量杂菌前进行移栽。移栽驯化a)设施条件:塑料大棚上盖50%透光率的遮阳网控光、降温。b)移栽基质:尾沙:草炭土:熟表土=5:3:2。c)基质处理:基质过筛后混匀,混匀过程中喷洒0.2%代森锰锌和速灭杀丁水溶液消毒,混匀后堆沤覆膜、压严,3d后装杯。d)移栽容器:7cm×11cm营养钵。e)移栽:用自来水把根系上的培养基冲洗干净,用0.1%的多菌灵溶液浸泡组培苗根部3s~5s后栽入已准备好的营养钵中。移栽一个苗床后搭盖高50cm×宽1.2m×长6.0m的塑料小拱棚。后期管理a)0d-10d:白天光照强烈的时间段关闭小拱棚塑料薄膜;傍晚日落前到早晨日出前放风,放风口逐渐加大。b)10d~20d:缓苗期过后,组培苗长出了1片~2片新叶,此时可完全撤掉塑料小拱棚,适时进行浇c)20d~30d:组培苗已经完全适应了棚内环境,此时可逐步撤除遮阳网,开始对叶面喷施0.3%的磷酸二氢钾溶液。d)30d后,施1次磷酸二铵,每棵组培苗施3粒~4粒,每天浇水1次。e)60d后,施1次磷酸二铵,每棵组培苗施5粒~6粒,每2天浇水1次。f)9月中旬:开始撤掉大棚塑料,此后应控制浇水,促进苗木木质化,为安全越冬做准备。g)11月:封冻前进行冬灌,然后就地压3cm~5cm的防寒土越冬。5苗木出圃5.1调查为掌握苗圃苗木的质量、产量底数,应在每年9月~10月份进行苗木调查。调查内容包括:苗木数量、苗木高度、地径、根系及木质化程度,并按等级统计。5.2起苗在秋季落叶后至上冻前,或春季解冻后至树液流动前进行。起苗时应保持苗木有完整的根系,侧根要起全,不伤根。随起苗随分级,并及时进行假植或蘸泥浆包装运输。5.3分级一般根据苗高、地径、根系及病虫害、机械损伤等情况把苗木分为Ⅱ级:Ⅰ级苗为发育良好的标准苗,Ⅱ级苗为基本符合造林要求的标准苗。低于Ⅱ级者为不合格苗木,需在圃地移植继续培育或作为废苗。苗木分级标准见附录A。5.4假植起苗后造林前要对苗木做较短时间的假植。假植时,将苗木根系用湿土埋严。5.5包装和运输7苗木运输时应用芦席或草帘将根部包起,并保持湿润;运输途中不得重压、日晒,注意苗木通气,以防发热。远距离运输时,根部应蘸泥浆,中途注意补水。苗木运达后,必须立即造林或置于阴凉处进行假植。6育苗档案红醋栗无性繁殖育苗的每一步骤和过程都要有详细的档案记载。档案内容见附录B。8(规范性附录)红醋栗无性繁殖苗苗木质量等级表A.1红醋栗无性繁殖苗苗木质量等级/a标/cm/cm/cm苗9(资料性附录)红醋栗无性繁殖育苗档案表B.1红醋栗无性繁殖育苗档案编号:苗圃名称:繁殖苗种类(分株苗;硬枝或嫩枝扦插苗;压条繁成活率:%移栽成活率:%(资料性附录)红醋栗特性C.1红醋栗果实成串着生在结果枝上,果实成熟时呈鲜红色,故名红醋栗。其果实营养丰富,可做果酒、果酱、饮料等,具有很高的开发利用价值。果实中铁元素的含量比黑醋栗高出很多,铁元素的含量是衡量营养价值的重要标志,进一步表明了红醋栗有很高的开发利用价值。红醋栗鲜果含有可溶性固形物12%~16%,糖6%~11%,酸1%~
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