关于“脚丫净”药膏的杀菌作用及毒性检测

关于“脚丫净”药膏的杀菌作用及毒性检测

【摘要】目的：制备治疗脚气的药膏“脚丫净”，并对其杀菌作用和安全性进行检测。方法：中药材经煎煮提取、研磨，按一定比例调制成外用药膏“脚丫净”。检测脚丫净对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的抑制作用，并观察“脚丫净”的皮肤刺激性和经口毒性。结果：脚丫净膏体50%液作用5min对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌率均大于99.9%，70%液作用5min可将白色念珠菌全部杀死，杀菌率达100%；动物实验表明“脚丫净”属于无毒无刺激性产品。结论：“脚丫净”杀菌快，无毒性、无刺激，是一种有效治疗脚气的药剂。【关键词】脚气；制备；杀菌；毒性脚气也叫脚癣，是一种传染性皮肤病，在世界各国发病率均很高，在我国城市中成人发病率可达60%以上[1]。根据临床表现，脚气分为三种类型：角化过度型，水疱型和浸渍糜烂型[2]。其中浸渍糜烂型最为痛苦，且很难根治。脚气因由暑湿之气郁积于内，风毒之气外出攻于表所致。要治好脚气，在杀菌消炎的同时，既要除去脚内的湿气和毒气，化腐生肌，又要修复和保护好新生的肌肤，抑制病菌的重复感染，才能达到治愈的目的。但是目前市售的治脚气药物难以从以上两方面同时起效，治愈率低。“脚丫净”不但能快速消炎镇痛、杀菌抑菌，还具有独特的溶解角质、快速止痒、祛风除湿、化腐生肌等功效，能快速起效，根治脚气。1方法1.1药膏制备冰片0.2%，薄荷0.4%，硫磺0.4%，雄黄4%，大黄3%，乳香3%，白矾3%，麝香6%，阿司匹林1%，二甲基亚砜0.5%，乙醇7.5%，凡士林65%。先将萝卜、大黄煎煮提取浓缩液，冰片用乙醇溶解，麝香、阿司匹林用二甲基亚砜溶解，将乳香和薄荷研磨成液体，白矾、硫磺和雄黄分别研细，将以上组分混匀后加入凡士林，与搅拌器中搅拌均匀。1.2对细菌繁殖体定量载体杀菌作用参照《消毒技术规范》进行检测[3]。培养大肠杆菌8099和金黄色葡萄球菌ATCC6538菌悬液，将1cm×1cm脱脂灭菌的平纹布片染菌液0.02ml制备菌片，干燥后备用。将40%、50%和60%的脚丫净药膏涂于菌片上，20℃作用一定时间后检测杀菌率。1.3对白色念珠菌定量载体的杀菌作用参照《消毒技术规范》进行检测[3]。培养白色念珠菌ATCC6538菌悬液，将1cm×1cm脱脂灭菌的平纹布片染菌液0.02ml制备菌片，干燥后备用。将50%、60%和70%的脚丫净药膏涂于菌片上，20℃作用一定时间后检测杀菌率。1.4小鼠急性经口毒性实验18-22g昆明鼠40只，雌雄各半，随机分组，每组5只。药膏稀释后按2.15、4.64、10.0和21.5g/kg经口灌胃。每天观察和记录各组小鼠的中毒表现和死亡率，观察14天。1.5急性皮肤刺激实验2.0-2.5kg新西兰兔4只，剪掉脊柱两侧被毛，各暴露3cm×3cm的皮肤。采用自身对照法[4]。将药膏涂在右侧皮肤暴露处，用一层油纸覆盖，在覆盖以2.5cm×2.5cm的纱布，用无刺激性胶布和绷带固定。左侧暴露皮肤作为对照。4h后去除受试物，并用温水清洗涂药部位的皮肤。分别在1、24和48h观察并记录涂药部位的皮肤反应，按皮肤刺激反应评分标准进行皮肤反应积分和刺激强度评价。2结果2.1对细菌繁殖体定量载体杀菌实验经检测，菌片含大肠杆菌9.2×105cfu/片，含金黄色葡萄球菌1.2×106cfu/片。脚丫净膏体50%液作用5min对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌率均大于99.9%。50%液作用10min或60%液作用5min可将大肠杆菌全部杀死，杀菌率为100%（见表1）。40%液作用20min或60%液作用5min可将金黄色葡萄球菌全部杀死。2.2对白色念珠菌定量载体的杀菌作用由表3可见，脚丫净50%液作用20min或60%液作用10min或70%液作用2min对白色念珠菌的杀菌率即达到99.9%以上，其60%液作用20min或70%液作用5min可将白色念珠菌全部杀死，杀菌率达100%。2.3小鼠急性经口毒性实验各组供试小鼠经脚丫净灌胃后，观察时间内，低剂量组未出现明显中毒症状，饮食、运动无明显异常。高剂量组小鼠开始运动增多，随后减少，最后出现静卧和拒食现象，最终死亡。经统计，供试脚丫净样品对雌、雄昆明鼠的急性经口毒性LD50均为6.81g/kg，表明样品为无毒物质。小鼠死亡情况见表4。2.4急性皮肤刺激实验去除受试物后，48h内所有动物涂药部位无红斑和水肿现象，表明脚丫净对新西兰兔皮肤无刺激性，属于无刺激性物质。3讨论实验证实脚丫净具有快速、高效的杀菌作用，能将引起脚气的常见菌完全杀死，从而治愈脚气。白色念珠菌是一种常见致病真菌，除引起脚气外还可引起多种疾病，具有难根除、易复发的特点[5]。白色念珠菌引起的浸渍糜烂型脚气常发生在第四、第五脚趾间，导致皮肤糜烂、裂隙和潮红，瘙痒难忍，很难根治。脚丫净不仅对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有很好的抑制效果，而且能快速杀死白色念珠菌，为脚气的治愈提供保证。小鼠急性经口毒性实验和新西兰兔急性皮肤刺激实验表明脚丫净无毒、无刺激，可以放心安全使用。脚丫净中所含冰片、乳香、雄黄、大黄和硫磺具有消炎镇痛、抑菌杀菌作用，白矾和薄荷具有快速止痒作用，而乳香、麝香和白矾等还具有祛风除湿、化腐生肌和修复护肤作用。所以，此药克服了目前治脚气药物杀菌消炎的单项功效，达到了消炎止痛、抑菌杀菌、溶解角质、快速止痒、祛风除湿、排毒化腐，生肌护肤为一体，且无毒副作