生物技术综合大实验教学大纲

PAGEPAGE2生物技术综合大实验教学大纲课程编号：233211课程名称：生物技术综合大实验实验学时：96一、本实验课的性质、任务与目的生命科学要为人类造福转化为生产力，必然与技术相结合，才能在生产上发挥巨大作用。于是在20世纪70年代，随着生命科学理论的不断发展，与工程技术相结合，开辟了生物技术（也叫生物工程）新领域。例如，通过基因重组技术，PCR技术、DNA和蛋白质序列分析技术、分子杂交技术、细胞和组织培养技术、细胞融合技术、核移植技术等等，促进了基因工程、蛋白质工程、细胞工程、发酵工程、酶工程、染色体工程、组织工程、胚胎工程等生物工程的诞生与发展，已在工业、农业、医疗卫生和环境保护等方面得到了广泛应用，并取得了突破性进展。本课程以学生动手操作为主，讲授为辅,教给学生细胞生物学实验的基本方法、原理、数据和图象处理、结果分析、仪器使用等，要求学生课前预习，实验过程中认真操作和记录，写好每项实验总结报告。本实验课程的开设结合了我系实验教学教改项目，实验内容的选择充分考虑了我系的实验设备条件和指导老师的业务专长。教学内容选择了工业分离纯化技术、基因工程领域中具有代表性的实验内容。以β-葡萄糖苷酶基因的重组表达为主线，分析和掌握诱导时间和剂量对重组蛋白表达的影响，通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行重组蛋白质表达量的鉴定和分析。学生通过该课程的培训，将具有初步驾驭综合大实验的设计、组织能力和较强的实验操作、结果分析能力，为本科论文和将来的工作打下坚实的素质基础。二、本实验课所依据的课程基本理论生物化学，天然药物化学，仪器分析，细胞生物学，细胞工程，普通生物学，遗传学。三、实验类型与要求序号实验名称实验内容实验学时实验类型实验要求1等电点沉淀法粗提取溶菌酶通过沉淀、离心、透析等方法能到粗酶液。4综合性必修2考马斯亮蓝G-250制作蛋白质标准曲线按Bradfor的测定方法，绘制标准曲线。6综合性必修3层析柱装填及柱效的测定使用G-75进行层析柱装填，平衡12h。4综合性必修4离子交换层析法纯化溶菌酶对粗酶液进行洗脱，对得到的酶液进行活性测定。8综合性必修5SDS法测定溶菌酶分子量、二维电泳简介对层析得到的样品进行上样前处理，进行SDS电泳，对比分子量确定是否为溶菌酶。同时介绍一下二维电泳的基本原理。12综合性必修基因诱导表达诱导外源基因表达及优化。12综合性必修产物检测分析SDS检测表达的重组蛋白。12综合性必修岩藻多糖的分离掌握多糖类物质的提取原则，理解并掌握热水浸提法、酸提法和超声波助提法的原理；掌握岩藻多糖的提取操作技术。6综合性必修岩藻多糖的纯化了解超滤的原理及应用；掌握Minipore超滤器的基本操作技术。8综合性必修岩藻多糖分子量测定理解琼脂糖凝胶电泳测定岩藻多糖分子量的原理；掌握琼脂糖凝胶电泳的操作方法12综合性必修岩藻多糖硫酸根取代度、旋光度理解旋光法测定旋光物质纯度的原理；掌握自动旋光仪的使用方法，掌握旋光法测样品纯度的方法；掌握比浊法测量硫酸根取代度方法。12综合性必修四、每组人数与实验学时数每组6-7人；96学时五、考核方式与评分办法本课程实验设置基本按照本学科研究的基本环节设计，因此整个教学环节实行模拟研究型方式，每次实验学生进行详细观察记载，实验结束后形成完整实验报告，作为实验考核的主要依据；同时，每次实验由指导老师对操作环节进行等级评定。最后的实验成绩按照操作成绩和报告成绩分别占40%和60%进行综合评分。六、本实验课配套教材或实验指导书张惟杰主编,糖复合物生化研究技术,第二版,杭州:浙江大学出版社,2001《生物技术综合大实验》，自编实验指导书，肖厚荣、陈群、阚劲松七、实验报告要求实验报告要用规定的实验报告纸写，实验报告的内容包括：实验名称、学生姓名、班号和实验日期；课程名称；实验目的和