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文档简介
注意:不要打开培养皿!!!实验三病原性球菌病原生物学教研室涂增实验目的:了解病原性球菌的分离鉴定程序掌握常见病原性球菌(三种葡萄球菌、三型链球菌)的形态染色特征、菌落特征及致病性鉴定熟悉血浆凝固酶实验原理、方法及结果判定实验内容:病原性球菌(录像)革兰染色观察乙型链球菌的形态特征三种葡萄球菌、三型链球菌的菌落特征观察细菌致病性鉴定----凝固酶试验1、病原性球菌(录像)
2、病原性球菌的分离鉴定程序临床症状脓液、痰、咽分泌物血液、脑脊液、穿刺液涂片,革兰染色,镜检根据形态、染色性、排列进行初步诊断分离、培养根据菌落特征进行进一步诊断增菌生化反应最终鉴定致病性鉴定、药敏试验由脑脊液标本中发现中性粒细胞内外有G-双球菌,可初步诊断为脑膜炎球菌由泌尿、生殖系统来源的标本中分离出的G-双球菌,可初步诊断为淋球菌3、病原性球菌革兰染色观察菌种:链球菌步骤:制片(涂片、干燥、固定)
涂片:液体培养基,沉淀生长,取管底1-2环染色(初染、媒染、脱色、复染)观察(染色性、形态、排列)4.常见病原性球菌的菌落观察
菌种:葡萄球菌、链球菌葡萄球菌菌落主要特性金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌色素金黄色白色柠檬色溶血环β-溶血无无其它中等大小,圆形,光滑,湿润菌落.链球菌菌落主要特性甲型溶血性链球菌乙型溶血型链球菌
丙型链球菌色素无无无溶血环
-溶血(草绿色,半透明溶血环)
-溶血(宽大,透明溶血环)无其它圆型,光滑,湿润,细小菌落.注意:不要打开平板金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌乙型溶血性链球菌丙型链球菌甲型溶血性链球菌5.凝固酶试验(玻片法)原理:血浆凝固酶主要由致病性的金黄色葡萄球菌产生的,能使含有肝素或枸橼酸钠等抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的物质。它是鉴定葡萄球菌有无致病性的重要指标。游离凝固酶结合凝固酶方法:(1)讲台取一张玻片;(2)划分3个位置;(3)挑取3-5环兔血浆到1、2位置,3-5环生理盐水到3位置;(4)无菌操作,挑取1环细菌(菌种如右图
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