饲料中丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、特丁基对苯二酚、乙氧基喹啉和没食子酸丙酯的测定

1特丁基对苯二酚、乙氧基喹啉和没食子酸本文件描述了饲料中丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)、特丁基对苯二酚(TBHQ)、乙氧基喹啉(EQ)和没食子酸丙酯(PG)的高效液相色谱测定方法以及饲料中BHA、BHT、EQ的气相中BHA、BHT和EQ含量的测定。本文件中BHA、BHT、TBHQ、EQ和PG的检出限、定量限按附录A执行。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T20195动物饲料试样的制备3术语和定义4高效液相色谱法(仲裁法)试样中的BHA、BHT、TBHQ、EQ和P4.2试剂或材料4.2.42%乙酸溶液：准确移取20mL乙酸(4.2.3),加水稀释至1000mL,摇匀。2BHA、BHT、TBHQ、PG纯度均不小于98%,EQ纯度不小于95%,具体信息见附录B。4.2.6混合标准储备溶液：分别称取BHA、BHT、TBHQ、EQ100mg和PG50mg(精确至0.01mg)于mg/mL,BHA、BHT、TBHQ、EQ浓度为0.1mg/mL。4.2.8混合标准系列溶液：准确移取适量混合标准中间溶液(4.2.7)于50mL棕色容量瓶中，用乙腈8.00μg/mL、16.0μg/mL、20.0μg/mL和25.0μg/mL;BHA、BHT、TBHQ、EQ的质量浓度分别为4.3仪器设备4.3.5离心机：转速不低于9000r/min。4.5试验步骤4.5.1试样溶液的制备平行做两份试验。称取试样5g,精确至1mg,置于250mL具塞三角瓶中(如为凝固状，置65℃水4.5.1.2其他类试样平行做两份试验。称取试样5g,精确至1mg,置于250m4.5.2液相色谱参考条件b)流动相：乙腈(4.2.2)+乙酸溶液(4.2.4)=65+35;34.5.3.1标准系列溶液和试样溶液测定4.5.3.2定性4.5.3.3定量4.6试验数据处理m?×1000Wi;=!p1.×V?×n×1000………m?×1000pu;—标准溶液中BHA、BHT、TBHQ、EQ及PGA;——标准溶液中BHA、BHT、TBHQ、EQ及PG的峰面积；4.7精密度45气相色谱法5.2试剂或材料5.2.6标准品：BHA、BHT纯度均不小于98%,EQ纯度不小于95%,具体信息见附录B。5.2.7混合标准系列溶液：分别称取BHABHT和EQ50mg(精确至0.01mg)于50mL棕色容量瓶配成混合标准系列液，使BHA、BHT和EQ的质量浓度分别为5μg/mL、10μg/mL、50μg/mL、5.3.3离心机：转速不低于4000r/m5平行做两份试验。称取试样2g,精确至1mg,于10mL具塞刻度试管中，加入约1g无水硫酸钠5.5.1.2净化5.5.1.2.2淋洗5.5.2气相色谱参考条件d)柱温：150℃保持11min,25℃/min升温至200℃,保持11min;5.5.3测定65.5.3.2定性m?×1000m?×1000p2;×V?×V?×n×1000Wz;='V?×m?×1000p2;×V?×V?×n×1000…………A?;×p?:×V?×n×1000A?;×m?A?;×m?×1000…………A?:——标准溶液中BHA、BHT及EQ的峰面积；7……………………WU2;=A?;×V?×m?×1000p;——标准溶液中BHA、BHT及EQ的质量浓度，单位为微克每毫升(μg/mL);V?——提取溶液的体积，单位为毫升(mL);V?——浓缩液定容的体积，单位为毫升(mL);n——上机测定的试样溶液超出线性范围后，进一步稀释的倍数；V?——提取溶液分取过柱的体积，单位为毫升(mL);测定结果以平行测定的算术平均值表示，保留3位有效数字。5.7精密度在重复性条件下，两次独立测定结果与其算术平均值的绝对差值不大于该算术平均值的7.5%。方法抗氧化剂名称检出限1.91.9定量限8.78.6高效液相色谱法2.01.85.05.08.910.012.5气相色谱法5.05.012.512.58抗氧化剂标准品的中文名称、英文名称、化学分子式和CAS号5种抗氧化剂标准品的中文名称、英文名称、化学分子式和CAS号见表B.1。表B.15种抗氧化剂标准品的中文名称、英文名称、化学分子式和CAS号中文名称英文名称化学分子式CAS号25013-16-5CoHO1948-33-0CHNO91-53-2C1oHOs121-79-9CisH:O128-37-09AA混合标准工作溶液中丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)、特丁基对苯二酚(TBHQ)、乙氧基喹啉(EQ)和没食子酸丙酯(PG)的液相色谱图混合标准工作溶液中BHA、BHT、TBHQ、EQ(50μg/mL)和PG(25μg/mL)的液相色谱图见图C.1。响应/值响应/U0.090-0.080-0.070-0.060-0.050-0.040-0.030-0.020=00.000-124355.0010.0015.0020.0025.0030.0035.00t/min图C.1混合标准工作溶液中BHA、BHT、TBHQ、EQ(50μg/mL)和PG(25μg/mL)的液相色谱图混合标准工作溶液中丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)和乙氧基喹啉(EQ)的混合标准工作溶液中BHA、BHT和EQ(100μg/mL)的气相色谱图见图D.1。245000-40000-35000-应30000-应值/W值/W20000-3150