杉木组培苗生产技术规程

1杉木组培苗生产技术规程本文件规定了杉木[Cunninghamialanceolata]组培苗生产的母株选择、组织培养、苗期管理、苗木出圃和管理技术档案。本文件适用于杉木种苗的组培生产。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4385农药安全使用标准GB/T6001育苗技术规程LY/T1000容器育苗技术LY/T1770桉树无性系组培快繁技术规程DB45/T470-2007杉木速生丰产林栽培技术规程DB45/T974-2014杉木容器育苗技术规程3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4母株选择4.1母株林分要求8年～16年生子代测定林、种子园混系或优良种源人工林，郁闭度60%以上；林缘木、林窗木、孤立木等不作为候选母株；林分树木长势良好，有较强的抗性。4.2生长量指标树高年生长≥1.8m；胸径年生长≥3.2cm。4.3性质指标树干通直圆满，不开叉，不并兜；树皮较薄，无扭曲，无树瘤；树干完整、冠幅较窄、长势旺盛；树木健康、无病虫害、无风折和雪压之害。5组织培养5.1培养基配制杉木各培养阶段使用的培养基，按LY/T1770的方法配制。5.2外植体5.2.1采集2每年5月～11月份母株树桩萌芽期间，于晴天中午从母株树桩上选取生长健壮、半木质化，叶片轮生，无偏向，无病虫害的萌条为外植体。每份外植体材料应记录母株号、树龄、地点、环境概况、时间、采集人等，建立信息档案。5.2.2保存外植体宜即采即用。超过1h，应用干净湿润毛巾包扎保湿或置于10℃~15℃的冰壶内储藏，保藏期不宜超过2d。5.3外植体灭菌5.3.1预处理去除针叶，剪成3cm～4cm长茎段，用洗洁精漂洗5min～10min，用玻璃棒不断搅拌有助于茎段漂洗干净，然后置于流水下冲洗1h，最后用滤纸吸干水分。5.3.2灭菌在超净工作台上，采用75%的酒精浸泡30s，无菌水冲洗3次，转入0.1%升汞溶液中浸泡，并不断搅拌，使灭菌液与茎段表面充分接触，浸泡11min～15min后取出，无菌水冲洗5次。5.4诱导培养已灭菌的茎段用无菌滤纸吸干水分，将形态学下端直插或斜插接种于诱导培养基（参见附录A的A.1）上。置于室温为（24±2）℃,光照强度为1500Lx～2000Lx的实验室培养，每天光照8h～12h。5.5继代培养将带3个～5个小芽的芽丛，转接到继代培养基（见附录A的A.2）中进行增殖培养，每500mL的三角瓶接种5丛～7丛。培养温度（24±2）℃,光照强度为3000Lx～5000Lx，光照时间8h～12h。继代培养周期35h～40d。继代苗要求叶色墨绿或灰绿；茎叶无玻璃化、白化、褐化；茎叶切口无烫伤；无污染才可进一步继代培养。5.6生根培养经过多次继代增殖获得大量继代苗后，剪取3～5cm高继代小芽作为生根培养的材料。将小芽接种于生根培养基上（见附录A的A.3）。每250mL的广口瓶接种20株，将组培苗置于温度23±2℃、光照强度2200～2700LX，光照时间为8h～12h，培养20d～30d。5.7炼苗组培苗在生根培养基中培养20d～30d，根长0.5cm～1.0cm时，将生根苗从实验室转移到温室大棚中进行炼苗20d～30d以增加苗木的木质化程度，提高移栽成活率。炼苗场地应配有黑色遮光网，当太阳直接照射时拉上网，以防瓶子苗灼伤。5.8生根苗移栽技术5.8.1圃地要求符合GB/T6001和LY/T1000的规定，且圃地要求背风、日照较短，以阴坡、半阴坡为好。如果在山地育苗，圃地应位于中下坡，坡度≤15度。5.8.2移栽基质选取病原菌少，透气性好，保水能力较强的轻型基质，基质配方为树皮∶木糠∶椰糠∶黄泥=2∶3∶4∶1或1∶3∶5∶1，pH4.5～6.5。苗木移栽前24h～48h用0.3%高锰酸钾溶液对基质进行消毒，移栽前用清水把高锰酸钾溶液冲洗掉。5.8.3容器规格3容器为底部直径×高为5cm×10cm的无纺布杯。5.8.4生根苗移植方法将瓶中生根苗倒出盛有清水的容器中，在清水中漂洗干净培养基，要求把苗木根部的培养物洗净，用手要轻，不能把苗根拔断或损伤。洗好的苗木轻轻放入托盘内，按每个育苗容器一株植入基质中，移栽后及时浇灌定根水。6苗期管理6.1移栽管理小苗移栽前15d，盖好薄膜，遇上高温，特别是中午和阳光直接照射时，要及时拉上遮荫网。15d后去除薄膜，观察基质变干时及时补充水分。移栽后的第1个月到第5个月，每10d要用50%甲基托布津可湿性粉剂700倍～1000倍液溶液或80%代森锰锌可湿性粉剂500倍～800倍液消毒一次，第二个月开始用0.1%～0.2%的复合肥（N:P2O5:K2O=15:15:15）溶液喷施，每15d施肥1次，待苗高20cm停止施肥。5个月后的管理按DB45/974执行。6.2主要病虫害及防治杉木组培苗主要病害有杉苗猝倒病、杉木炭疽病、杉木叶枯病、杉木赤枯病等。防治方法;选择空气流通，排水良好的位置设置苗圃，避免选用粘土和地下水位过高的地方作杉木苗圃地。杉木病害防治可选用1%波尔多液、50%多菌灵800倍～1000倍液、50%托布津700倍～1000倍液或50%退菌特800倍～1000倍液等抗病农药。杉木组培苗主要虫害为杉梢小卷叶蛾，防治方法：人工及时剪除被害梢烧毁或使用吡虫啉等广谱杀虫剂800倍～1000倍液。7苗木出圃7.1分级一年出圃苗分为二级。Ⅰ级苗：苗高≥25cm,地径≥0.25cm，充分木质化，叶色紫红或灰绿；Ⅱ级苗：苗高20cm～25cm,地径0.20cm～0.25cm，充分木质化，叶色紫红或灰绿。7.2包装与运输按照LY/T1000要求执行。7.3包装标识苗木包装应用标签、标注名称、质量指标、生产日期、种苗生产经营许可证编号、检验证书编号、生产单位及地址。8管理技术档案详细记录生产管理技术，病虫害防治等各环节所采取的措施。4（资料性）培养基配方A.1诱导培养基配方MS+BA0.5mg/L～1.0mg/L+白糖3%+琼脂4.5g/L，pH5.8。A.2继代培养基配方改良MS[ZnSO4·7H2O的浓度改为10.6mg/L]+BA0.5mg/L+NAA0.0