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医学生物学试验医学微生物教研室

年6月医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座第1页试验八

脓汁标本中金黄色葡萄球菌判定医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座第2页试验内容

脓汁标本中金黄色葡萄球菌判定

医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座第3页目标熟悉临床标本中常见化脓性细菌分离判定程序；掌握细菌分离培养基本技术。医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座第4页试验器材标本：脓拭子、感染分泌物或模拟脓汁标本菌种：金黄色葡萄球菌培养物、表皮葡萄球菌培养基：血琼脂平板、甘露醇发酵管其它：血浆、生理盐水、革兰染液、玻片、滴管培养箱、酒精灯、接种环等医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座第5页检验标准在脓汁标本中，以化脓性球菌最为常见，本实验主要检测金黄色葡萄球菌用药前采集标本无菌操作医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座第6页标本检测程序脓汁、脓性分泌物（未知菌液/固体培养物）涂片革兰染色镜检血琼脂平板接种直接菌落观察血浆凝固酶试验甘露醇发酵诊疗汇报医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座第7页检验方法和结果汇报直接显微镜检验：取标本直接涂片，均匀涂成菌膜，自然干燥，固定后革兰染色，油镜观察。注：若染色后未发觉细菌，可汇报“直接镜检未发觉细菌”

革兰染色镜检

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形态排列染色性

金黄色葡萄球菌医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座第8页医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座第9页检验方法和结果汇报细菌分离培养：取脓液或创伤分泌物接种于血琼脂平板上（接种后4℃保留），划线分离，37℃培养18~24h后，观察菌落特征，取单个菌落进行革兰染色镜检。注：第2天观察统计结果；如培养48~72h后依然无菌生长，则汇报“无细菌生长”。

血平板培养结果观察

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菌落特点溶血性菌落颜色金黄色葡萄球菌医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座第10页检验方法和结果汇报血浆凝固酶试验（玻片法）：用灭菌接种环取标本和白葡菌（阴性对照）培养物少许，分别与玻片左右二侧生理盐水制成均匀菌悬于玻片玻片左右二侧菌悬液中各加血浆一滴并轻轻摇匀1~3分钟内观察结果，出现颗粒状凝集为血浆凝固酶试验阳性，不然为阴性结果汇报：

标本+血浆白葡菌+血浆阳性（+）/阴性（─）医学微生物学实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定专家讲座第11页检验方法和结果汇报甘露醇发酵试验：无菌操作取标本和白葡菌（阴性对照）培养物分别接种于甘露醇发酵管，其上覆盖无菌液体石蜡油，37℃培养18~24小时，观察结果。金葡菌发酵甘露醇产酸，使培养基变混充，颜色由紫色变黄色，是为甘露醇发酵试验阳性，而白葡菌相反。注：第2天观察统计结果

标本+甘露醇白葡菌+甘露醇阳性（+）/阴性（─）医学微生

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