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文档简介

ICS65.020.01

B04

中华人民共和国国家标准

GB/TXXXXX—201X

植物品种鉴定MNP标记法

Protocolforidentificationofplantvarieties——MNPmarkermethod

(征求意见稿)

201X-XX-XX发布201X-XX-XX实施

国家市场监督管理总局

中国国家标准化管理委员会发布

1

1

植物品种鉴定MNP标记法

1范围

本标准规定了植物品种鉴定多核苷酸多态性(MNP)标记法的原理、试剂或材料、仪

器设备、测定步骤、结果分析。

本标准适用于水稻、玉米、大豆、棉花、花生、谷子、西瓜、甜瓜、黄瓜、艾草、番茄、

辣椒、白菜、龙眼、荔枝、猕猴桃的原始品种鉴定、实质性派生品种鉴定和品种真实性鉴定。

其他植物品种鉴定可参考此标准。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本

适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改版)适用于本文件。

GB/T3543.2农作物种子检验规程扦样

GB/T6882分析实验室用水规格和试验方法

NY/T2594植物品种鉴定DNA分子标记法

3术语与定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

多核苷酸多态性multiplenucleotidepolymorphism,MNP

在基因组水平上由多个核苷酸引起的序列多态性。

3.2

实质性派生品种essentialderivedvariety,EDV

由原始品种派生或者由原始品种的实质性派生品种再次派生,且保留了原始品种的基因

型或基因型组合产生的基本特性,但与原始品种存在明显差别的品种。

3.3

变异度degreeofvariance

异型株(非典型植物)占总观测植株的百分率。

3.4

平均覆盖倍数averagecoverage

比对到标记位点上的测序片段数目与标记位点数目的比值。

3.5

检出的标记位点detectedmarkers

至少有一个等位基因型有20条及以上测序片段支持的标记位点。

2

4原理

利用多重PCR和二代高通量测序扩增并检测样品基因组上的MNP标记位点,分析测

序数据,获得标记位点的分型结果和鉴定结论。

5试剂或材料

除非另有规定,仅使用分析纯试剂。

5.1水:GB/T6682一级。

5.2多重PCR扩增与文库构建试剂盒。

5.3高通量测序试剂盒。

5.4MNP标记引物:见附录A。

6仪器设备

6.1样品粉碎仪或研磨机。

6.2恒温孵育器或水浴锅。

6.3涡旋振荡器。

6.4PCR扩增仪。

6.5离心机。

6.6电泳仪。

6.7凝胶成像仪。

6.8超微量分光光度计,最小样品进样量为1μL。

6.9实时定量PCR仪。

6.10微量移液器,2μL、10μL、20μL、100μL、200μL和1000μL。

6.11高通量测序仪。

7测定步骤

7.1操作要求

样品准备、DNA提取、多重PCR扩增与文库构建、高通量测序在规定的区域按单一方

向进行操作且保持实验室通风良好。不同区域的仪器设备应专用。

7.2取样

7.2.1样品应为从变异度不高于5%的植物品种群体中抽取的个体样本混合物。

7.2.2从植物品种群体中抽取的个体的数量宜满足NY/T2594要求。

7.2.3样品中个体的类型宜为幼嫩且新鲜的叶、根、茎、胚等器官或组织,也可为种子。

3

7.2.4应注意从植物品种群体抽样的代表性。农作物种子扦样应符合GB/T3543.2要求。

7.3DNA提取

提取与纯化的DNA溶液在260nm与230nm处的吸光度值的比值大于2.0;在260nm与280

nm处的吸光度值的比值介于1.7与1.9之间;DNA电泳主带明显,无明显降解和RNA残留。

7.4多重PCR扩增与文库构建

按多重PCR扩增与文库构建试剂盒的说明书进行DNA质控、多重PCR扩增、文库构建与

纯化。其中,多重PCR的扩增循环数不高于20个。

7.5高通量测序

按高通量测序试剂盒和高通量测序仪的操作说明进行高通量测序。

高通量测序的平均覆盖倍数设置为700倍以上,测序长度大于标记引物在参考基因组上

的扩增长度。

7.6测序数据质量控制

利用品种鉴定软件将样品的测序数据比对到参考基因组的标记位点上,统计第一次检

测的标记位点的平均覆盖倍数C1。

当C1<500时,判定样品的测序数据量不足,从7.5或之前的步骤开始重新实验至第一

次检测的标记位点的平均覆盖倍数C1≥500。

当C1≥500时,进一步计算检出的标记位点的比例,其中,和T分别为样品的

�1

检出的标记位点的数目和检测的标记位点的数目。�1=��1

当R1≥95%时,判定测序数据合格。

当R1<95%时,判定文库构建可能失败,从7.3或之前的步骤开始重新实验至第二次检

测的标记位点的平均覆盖倍数C2≥500。

当C2≥500时,进一步计算第一次和第二次共同的检出的标记位点的比例,

2�12

其中,为第一次和第二次共同检出的标记位点的数目,和为第一次和第�二2=次�分1+别�2检

出的标记位点的数目。

�12�1�2

当R2≥95%时,判定测序数据合格。

8结果分析

8.1结果计算

遗传相似度按式(1)计算

……………(1)

n𝑖

�𝑖

式�中�=:×100%

——待测品种与对照品种的遗传相似度(%);

——待测品种与对照品种中均检出的但基因型无差异的标记位点的数目;

𝐺

——待测品种与对照品种中均检出的标记位点的数目。

�ij

8.2结果判定

�ij

8.2.1原始品种的鉴定

当对照品种为在待测品种植物新品种权申请日前的已知品种时,判定待测品种是否为

4

原始品种。

当待测品种与所有对照品种间的遗传相似度均小于a时,判定待测品种为原始品种。

其中,a为待测品种所在植物的实质性派生品𝐺种的判定阈值。

8.2.2实质性派生品种的鉴定

当对照品种为原始品种时,判定待测品种是否为对照品种的实质性派生品种。

当<时,判定待测品种不是对照品种的实质性派生品种;

当�G�S≥�a时,判定待测品种是对照品种的实质性派生品种。

其中,a为待测品种所在植物的实质性派生品种的判定阈值。

8.2.3品种真实性鉴定

8.2.3.1水稻、玉米、大豆、棉花、花生、谷子、西瓜、甜瓜、黄瓜、番茄、辣椒、白菜、猕

猴桃

当时,判定待测品种与对照品种为“不同品种”;

当时,判定待测品种与对照品种为“近似品种”;

GS<96%

当时,判定待测品种与对照品种为“极近似品种或相同品种”。

96%≤GS<99%

8.2.3.2G艾S草≥、99龙%眼、荔枝

当时,判定待测品种与对照品种为“不同品种”;

当,判定待测品种与对照品种为“近似品种”;

GS<91%

当时,判定待测品种与对照品种为“极近似品种或相同品种”。

91%≤GS<99%

8.2.3.3G对S“≥近99似%品种”或“极近似品种或相同品种”的样品,可按相关国家标准或行业标

准进一步进行田间种植鉴定。

5

附录A

(规范性附录)

MNP标记引物

A.1水稻MNP标记引物。

表A.1水稻MNP标记引物

位点

染色体正向引物反向引物

编号

CATCGGAGTTTGTGAAAATAGAGAGTATCAATTTTGAGCATGTAG

1chr1

GAATAACCCTAGACT

AATATGTTCTCTCTGTTTCACAAGGGATCATGAGGTCGATCATGT

2chr1

TCTTGGATG

AAAAACTCCAATCTTGTCAAAGTGTTCTCCTGGTCTTTACTAACC

3chr1

CGATG

TTTTCCCGGTTTTATTTTTCTATA

4chr1TTCATGCTAACCACGTGCACTA

GGGACA

CCAGTGTGAGAGGCGAAAATAC

5chr1GGCTTTCTCCCATGCTTATACCT

C

TATAAGTTGAGGTGTTGTTGAGTACTAAACGGAATCTTTTTAATAG

6chr1

GCACTCACCA

TTCTTATGGCATCACGATTTAGAACAACTGAATGAGACTTATGCT

7chr1

GGTAACACCAAG

ACTCCAGTAAAAGCATCAAAACTGACCATGACAGAGGTGAATAA

8chr1

CTGGAG

ATGAGGTTAATAATCTGGACATGGAGGTAGTAGTAAGCAATCCC

9chr1

GGCAAATTG

GTACGTTTATGTGCCATTTGTTTAAAATTTCAGGCCTCTTCCCTTT

10chr1

GGTT

GTGGTTTCGTTGATCACCAAAGT

11chr1GCGCTTGAGACAGTGGAGATTC

G

GCTAGGTTTTCGACGGTGAGGTT

12chr1AATTGCCATTGCTCTTCGCTT

A

GCCTTCAAGGGAGGGAAAGCTAGTACTGATTTTCATAGAGCACAC

13chr1

CTTTTGTG

CATGCAAGGATAAAGTGAGGCAAGATACAGTGCATGCATCAGCT

14chr1

GTAT

TACTACTGTTGAGGCATCCTATCGCTAAGGAGTTGGAATCAATGG

15chr1

ATTATGACT

GAGGGAGAGGGAGAAGAGAAA

16chr1ATAGCGAGATTGGAGAGGGAAC

AAG

TCATGATCACTTGGCAACAATAGAACATGAATGTGCATGCGAAG

17chr1

GCTA

6

TGTTGGCCTACATCATGATGCTACATGTCGAACTTGAACCCCAAT

18chr1

TAG

CAGTGTGCTATAACGTATGCACGGGATAGCCTACAAGCAGTACC

19chr1

AGTAT

20chr1CGCCTCCTCCTACACCTACTGTTCGTCGTCGTAGAGGAGATCGAA

GATGTATGGTCAAACGTATCTCACAAACTGTGTGCAGTCGCAATA

21chr1

GAAAAG

GCCAGACACGTCAGAGATTCAA

22chr1CCGTGGAACTGGGACAACAATT

C

CGACCGACAAATTAATCTATCC

23chr1TCACTGTCTTGTGGTTGCAGTTT

ACGA

CGATCGATGAGCACTTGCAAAGTGGAGTTGGAGAGACGTATATA

24chr1

TTGAGAAGTA

TCAGGTATGCACCCATTACGAAGCAAGCATATCACATTTGGAAC

25chr1

GAAT

CGCTTCTCTTAGGATCAATTAGA

26chr1TCAGACACGCTGCATCAATGTA

TAGAGGT

TTTCAAGGTATCATGGTACTACGGGCTAAAGGTCAACTGTGATGT

27chr1

ATGTAGTGTAG

28chr1GGGACTTTGGGAGTTTTGGGATCATCCTGGTTCTCTCGACCAA

29chr1GCTTGCTGAGCTGTTGTTTCATGCGTTCCAGGAGCACTAAGATG

AATCCATTAGCTGGGCTCTAGGTTCTCGTAGTTTGTACAGGCGGAA

30chr1

TT

TGCAATATATAGTTGCACTCACT

31chr1TCGAGGAAGGAGGGAGGAGTT

CCTCA

CCCACAAACCCTAGGAATTTTGT

32chr1CCCAAACTCCACCTCCTCTGAGT

TT

ACAGGAAATATGTGTTCAATGATTAGCAAAATAGTAAGGACACT

33chr1

TTGCACTGGTCA

GACTTTTGATCTCTTCAGGCATT

34chr1CGTAAGCCCGTAACAACCGTAA

CA

CACTACTGCGGTTCTAAAGGATGAACGAATTAGGTATATTATTGT

35chr1

ATTCGGGCCTT

ACACGGGGATGATAAGGTTTAACCACATCCTCTCAAACAATCACA

36chr1

TCTAA

GGGACATGTTCTACCTCATGATC

37chr1CAGTGGGAAGCCACATAAACCA

ATG

AACTCAACCCTTTGATGCAATCTTGATTAAAATAGGAATTCAAAT

38chr1

GTGGTGCA

TGGATTAGCTTGATTTGAACAAA

39chr1CGACGGCTGATCTTGAGGATTT

TGC

AACGAAAATGTGCATCTGTTTAGCTAAAATGAGGAATGAGGCCA

40chr1

GTTTCTTAGA

7

CCATTCATATTGGTTCTACATGGTTAAGTTACCTGACGGTCATTTC

41chr1

TACATGATTAAG

AACCCGTCAACATTTAACTTCATACTAAGTTCTAACTGGTAAGCA

42chr1

CCCGA

CTAGTGTTATCAAAGATATACTGAGACTCGGCTACAGTAGGAATA

43chr1

CTGCTTG

GGTTTAAAAGATTTGTCGCGCAACTCCAAACTGTACTGTATAAGC

44chr1

ATTCT

AATTTGGTTGTACTGCGTTCTGC

45chr1CATAATCACGCCGTGAGAGAGA

TA

TGAGGATGAACCCAATACTGAATGAAGAATTTTAATTGGCTTTTG

46chr1

AAAGTC

GGATTCAAGTCATGGCAGATTGCAAAACTCAAGACTGAGCAATT

47chr1

ACG

GGGACTAAACTGGACTTAGGCGATAGCCTATTCGGTTTGATCAAT

48chr1

AATGT

TCTCCACTGTAAGGTGTTCAATGTGTTTTTCCTGTACGTTCTGACA

49chr1

TAAG

CCGTTCCTAGGCAGATCTTTTATTTCTGGTGTTTGGTGTGTGTTTTT

50chr1

CTA

TGCTTCTTCATTTGTTCAATCTTGCAAACATAAGACAGATGAGCGC

51chr1

TTAG

ATACCTGGGATTAAGTGATCAACTAATCCCCTCACCCTGATTATC

52chr1

GCCAC

TGTCAATGTCAGGTCGGGTACATTATTACTGCTGCCTTCTAATCTC

53chr1

ACATAGA

TGGAGCAAATAATCAATTTCAATGTTAGGCTGTAGTAATTCACAT

54chr1

AGTTCAGCGATGTG

ATCCTCAATGACCACTAGTCAA

55chr1TCATGCTCATGCATGTGCACT

GACTC

TGGACCACGATATGTGTAAATC

56chr1TCACCATGTTGGCCAAAACTG

ATG

AGGTGTACAATGGGACGAGATTGATTTTATTTAGGACCACCAACT

57chr1

AAAGGCTATT

TTATTCCTGGTCTCATGTGTTCTTCACTGAGTAGAAGGCAACTACA

58chr1

GAAGAGGTAG

TTCGGTTTATAACATACTAAGTC

59chr1CGTGTAGTCCCTCTCTGAAACG

GTGCAT

GTATACGCTACGTAGAACAAAATCGATTCAAAGTACCCTGCCAA

60chr1

CCGAA

CCAAACAAATCCTATGCCTAAAGTTCGTCATTGCCTTAATTTCTTT

61chr1

CTCGTCCT

GCAGATTTACAATACAGATGGGCCTCTAACTATTGAAAGTGGTCC

62chr1

GTGCT

8

AGATTGATCTGGACAAAATGGCGCTATTTACGCCAAGTTTAGTTC

63chr1

TAATTAGTCAAAA

TTTTTGAAGATACACGAGCCATATTAGCAGTGACTAAACATTTTTC

64chr1

GAACACA

ACTAAACAAGCCCACAGTCGTACAATGAGTACGATGGTGTAATT

65chr1

ATGAGATTCA

TGAAAAGTGCACACTTCCACATAGGCTCCACTTCATGTTGTTTAA

66chr1

GATC

TGCAAAACGAAGAAAATTCTCT

67chr1AGCTTCGTGCTCCAGCTCAT

CAC

GCATCCATACATCAAGAAACCGAAAAAGACCAGTCAAATGATGC

68chr1

AATCAA

TGTTAAAATGAAGGGACAATGGTCCCAAAATACGTAAAATAAGC

69chr1

ACGGAAA

ACAGTTTATGCGTCCTTGCACAT

70chr1CCCACACAACTACGACTGTGTT

A

CAGCCTCTCCATCCACTCTCTCT

71chr1CCACGAGCTCCATATCCAGTTG

AC

72chr1GCAAGCAATCAAACACCTGCATCGTTTGGAGGTGCCATTTCCT

TATATATTGGGCTTTGCTCGGTGGGCCTATCTGTTGATCCTACGAT

73chr1

ATAG

CAAGTATTTCTGGTATGTATCTGCAACAACCATGCATGCAATGGA

74chr1

GACAAGAT

AATCCTTCTTTATCTCCTCCTCGT

75chr1ACGCCATCCATCCGATCAT

GTA

GTCTTAAATTAGGCAGCCGTAC

76chr1CTGGTGTTTAGTGTGGCTTCAAG

GAT

GGATCCCTTAACTTACAATACCG

77chr1GTCGCTCGTTTGCACTTGAG

GTT

CTTAATTTCATCCTTGGGCTTATGCACATACACATCACTGTACAC

78chr1

ACTCAGAGT

GACAAGGTGGCCTATAAATAAGCCTCTCACAAACCATGGTATGCA

79chr1

CAGAT

TCTAGCTCGGCGAATTAAGAAT

80chr1GGCTCCTATTTGCCGCTGATTA

ACAAG

GCATAAGGGAAGCCTTCATCTTTAAATCAGCATAGAAAACTGGCC

81chr1

ACAAA

82chr1GTCAGGTGCACCATCCTCACTGGAAGAACCTGCGAACGTC

AGAAATTCAGGAAGATGGCATTCTACGGTAGTTGCAATGTCCTAA

83chr1

TGGAA

GGATGGAGAGAGCATGATGAAA

84chr1GCAGATTTGCTGCTGCTACAGTT

AA

85chr1CGTCTTTTCGTTGTCGTATTGAGGCTAGGCACAATAATTCCCTCG

9

GAT

GATTATTCGGTCACTTGTTAAGGGTTTTTCTTCTACTGCCACATAA

86chr1

GAGTGCATC

TCTACTCAGGACTTTTACCATTTATACCATCGGACGTCCTATTTGT

87chr1

GTTAG

GAATGGGTAAATTGGAATCATGGACATTACGACGAGTAATGAAC

88chr1

CCAAGGTAAA

ATGATACGAGTAAATATTATTA

89chr1GACAACAGAAATTGCCGGTGT

GGCCGTGTTTT

GAGGGAGTAGTATGGTTGTTTTGCTCTTGCTAGGAGTACGTGTGAT

90chr1

TGTTAGGTC

CCATATGGCCATCTATAGTCACTTCCCATCAAGAAAGGGTACAAT

91chr1

TTGCAT

GCAAGTTGTCCAGGGCAAAATATGGAAGTGAAGGAAAAACAGGA

92chr1

TATAGATA

TTCCAGTTTCTCCCTTTTTAAACTTGAAGTGTGTTGTTTCTGTGTGA

93chr1

CAAACTA

94chr1ATATGCCGCTTGCTTGACTCTGCATGATGCTCAGCATCCCTT

TCTAGAAAACTCAATACGGAGTAAAGGTGTTCTAAATTTTGTTTA

95chr1

ATTGCCAAGAGCTACA

TTCATTAACACGCGCATTACACTTCGTTCGTAACTTAGCTAGGCAA

96chr1

TATA

TGCAACGTAGTCCCACATACCAGCACTTGGAGAACGGTAGTGGT

97chr1

AATT

CCAATTTATACACACACTACGTCAAATTCTAGATGCACTCACAGC

98chr1

TTGGAATTACT

99chr1GGTCACGCCTTCTCCACTTGCGAAGACTCACCACCATGAGT

CGTATTGTTTAGTAGTTTAGAAACAGTATTATATTCGCGTTCCTGG

100chr1

ATGTGCCGGATT

GGATTTGACATTGCCTTGTACTAGCATATCATTTTCAGAGCTTACA

101chr1

ACACTTACAAAGT

TGTTTCCATTAATTAGTAGCCCTTCATTTAGATTTTCGTTAGCAGC

102chr1

CCACC

GTCTTATAACCTGAAACGGAGGGAATTATGACGACTCTCTCCAAG

103chr1

GAAGA

GACTATTCATCTTTCTGAAAAAT

104chr1CGCCACTACCTCGCTTGT

GTTTTCACAA

TTGCGGTGCAATTAAATAAGTG

105chr1CTCCCTCTTTCTGCCTTCCTATG

C

CGACGCTCGGGTTTAAAAATATTCCACATCCAGAAGTTAATCGTC

106chr1

GTATT

107chr1GCTCGGCAACGACTACGTACTTATGTTGCGTGCGAAGACA

108chr1TCATCTAGTCTGAATCCAGTTCCAACTTCTTGTTACTGAGGCTTCT

10

ACTAGATCTA

CACATGGATTCACCTCTGTTATG

109chr1GATCGGTGTAGCCCAGAAAATG

ATTT

110chr1CCAACTCCAACTCCACCCTTTCGGAGTTGGCGGTGACAAAGT

111chr1ACCGAGGGTTTTCTGTTAAGCACTTGACGCATCTTCTTCCCTTCT

CACTCCAAACAGTAGTGAGTAGGGGCCTGTTTATCCTAATTTTGT

112chr1

TGTTTTCTT

GATGGCTAGTGTTTGGTGCAAA

113chr1GCGGACAACTTGTGTAACCCTT

G

GAGGTGCATATGACCCAAATTTTTGTACTCAAGAACTGTCTTCAT

114chr1

GGCTTCG

TTTTTGGGTTAATTTTAGCATCATACCGTGTTAAAATATTGGCAA

115chr1

CCAGAGGTCTAAA

CTGAATCAAATTGATGTCGCTGA

116chr2TTAGGCATGGGATGCAAGGAT

A

CCTAAGAGCGGTACAATAAAAG

117chr2CAAAGAGGGTAAGCTGAGGCTT

GCTATAAA

AGAAGCAATCACCCATAGCTACCCTTTAGGAACACATGAATTGA

118chr2

TTTCCC

CATTGCATGAAATTTAATGTTTATCTGGCACAGCTAACAGAATCA

119chr2

CTGCCAAG

TCCTTCTAGATGAAGGACCTGAGCACGGGTATGGAATCTATACA

120chr2

AGATTTGG

TTTTAGCAGAACCGAGCTGTCATTCCAATGTTGACATCCTCTTGC

121chr2

AT

GGATGTACTTTCAAATTAGGTCG

122chr2GGTCGCCCTCATGGTAGAACTG

AGTGT

CACAATCCAATTTTGCTAGCTAA

123chr2TGTACATGCGGGACGATGAAG

GATG

TTTTTACATGTGGAGCTGCGGAT

124chr2CATCACACCAACCTCAAGTCCT

A

GAGATGTCTCATCATGGAACTCCATCAAGGTTTCCAAGACCCTTA

125chr2

GATAC

CAAATTCACTACCAGTACAGAA

126chr2ACATGGCACATCCTCACATCAA

TGTCAATC

CAAAGATTGTTAATGTTGAGTAC

127chr2GGGAGTGAAATGCCCTGAAAA

CTGTGAT

CCCTACATTCATCCATGTATTAA

128chr2CAACACATAAGCTGTGTGCACTT

AACATCC

TCACCACTATCATTTAACCGGACAAATCCCTAATTAAAACCGCGG

129chr2

TTTAC

AAGTTCGTTCGCTTTTGAAATTGGTCTGACTTTCATCTCAAGTTAA

130chr2

AAGACATTCG

11

TGGCACAATTATATTTCCATTGCGACCACCTCATTACACTAATCCC

131chr2

ATTATT

GACCTTGCATATTTACGAAGTGA

132chr2GGCTACTTTCCTTGCTTTGGTCA

TCA

CCACCCTTTTATCGTTGAAGTTTTCCCTTATATTCACGGATAGAGG

133chr2

CAGA

134chr2CCCAAGGCTAAAGCTCGTTGTAGCACTCGACGAGGATAAGGTAG

AAGAGGGCATCATTCTTGTACTCAATCTTTCTAATTTAATGCGGCC

135chr2

TTGT

CATGTCAGCAACACCAGACTTCCACTTACTGGTGCATGTGTCGTT

136chr2

AG

TTTCCATGTTAAGGGATCAAATG

137chr2CCATCCTACTCATTCGAACACCA

ACCA

TTCTATAGCTAAAAAGTTCTTAAACCAGTTCATCCAGTTTATCCGT

138chr2

AATCTGGATA

GTGTAAATGACTCACAGATGGTCAACACGTGACACACACACATA

139chr2

TTGGCATT

GACCTTCTGTTTCTACCAGAAAAGCTCTCTTCCTTCTGTTCAATGG

140chr2

ACACATG

AAGAGGGATCGATCTACCCAGCTGGTGATCAGGTAGTTGTTGTTG

141chr2

TAC

TGGAGGAAGTATCTCATGGGTACCACATCATCAAACAAATATTA

142chr2

TTGACCCTTC

TAAATCAAGCTTTGCAGCAGCT

143chr2CCAATCTCACTTGCACGAGGTT

AAAG

GGATTTTGCCGGAAAACTCTTCTCAATGGAATCCCTAATCTATATG

144chr2

AAAAACACATCT

TGATAATATGCATATGGCATACTCCACTATCGCCAATACACTTCTC

145chr2

GTGGAAAC

CATCATCGTGAAAGGTGTAGTA

146chr2CCCTATTCCGGTCGATCGAT

GCTCT

TGATCAATCAACTTGCTGTATACGGGAAAAATCCAAATAAGAACC

147chr2

CACAAAA

TGGAATTAAGAGGAAAGAGAGG

148chr2TTCCACGCGGATTGCTTTT

AATCAC

GACTTCTGCTTCCTTTTGGATTC

149chr2GACTTGGTGGCCACAACATCTA

G

CAAGTAATCGCTCGACAGCTTC

150chr2TGCATCCGCTGATTGTATCTCC

ATC

ACCACACACAATCTGATCTTTTGATAATTCACTGTGGTGTGTTTTC

151chr2

AGCC

CAAATATATCTCTGGCGCTTGGA

152chr2CCTGCTGTTCTTTCTTCAGTTCGT

A

12

TGACTGACTTATTGCATACTGAA

153chr2CGGTACCAAGCTTTAGAGGGAA

GTTGAG

GCTCATCTGATCCGTATACTCCGGAAAGACCGAAAGAAGAGGAG

154chr2

AGAT

155chr2GGGATCTCAATTGCT

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