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文档简介
石蜡切片的质量保证主要与三方面有关:标本的处理过程:包括脱水、透明、浸蜡、包埋。切片机和切片刀的质量。实验者的切片技术水平。
切片:
A.切片前的准备工作整修:用单面刀片将蜡块四周修整平行。
修切蜡块的基本原则:近似于正方体或长方体,组织块四周留1~2mm左右的蜡边。a.如果上下两面不平行的话,则切出的蜡带会弯曲。b.蜡边不宜太多则切片所占玻片位置太大,既不经济,也不便于镜检观察。c.组织具体操作:用单面刀依据标本形状在蜡块表面轻轻划出标本四周保留的石蜡范围,周边预留1~2mm左右宽度,然后用单面刀将范围之外的石蜡一刀一刀切去。载物台,持刀架,切片厚度调剂器注意:1、刀架尚未在切片机上固定安装好的时候,请勿插入切片刀!
2、为了安全,在更换刀架以前,要先取下切片刀。B.切片的方法(1)将已固定和修好的石蜡块台木装在切片机的夹物台上。(2)将护刀盖推至打开的位置。(3)摇动推动螺旋,使石蜡块与刀口贴近,但不可超过刀口。
(注意:在转动手轮时,应保证机头在红、绿线之间移动。)(4)调整石蜡块与刀口之间的角度与位置,刀片与石蜡切片约成15-30度。(已调好)(5)调整厚度调节器到所需的切片厚度,一般4~10微米。(6)一切调整好后就可以切片。此时右手摇动转轮,左手持毛笔将蜡带提起,摇转速度以每分钟40-50r/min为宜。(7)切成的蜡带到20-30cm时,右手用另一支毛笔轻轻地将蜡带挑起,平放在蜡带盘上。C.使用切片机时的注意事项1、在搬运切片机时,请勿手握手轮。2、要严格按照操作程序进行切片。3、切片刀刀口锋利,应用时切忌手指触及刀口,并且防止切片刀跌落桌上或地面,以免发生刀伤事故。4、切片时机头不能伸出过长,移动量应保持在红绿线之间,否则会影响切片厚度。5、切片机工作完毕,应将大手轮处于锁紧状态,此时机头在最上端,将护刀盖推至合并位置。6、及时清除废蜡,保持设备清洁。
D.贴片
(1)取一片清洁的载玻片,滴一小滴粘片剂于载玻片靠中央的一侧,用手指涂抹均匀。
(2)滴一滴蒸馏水于已涂粘片剂的载玻片上。
(3)用刀片割一小段蜡带(带有2~3个组织斑点),放在水面上。注意蜡片光面贴于玻片上。
(4)把玻片置于展片台上(温度保持在40-45ºC),直到蜡片受热、伸展、摊平。
(5)展片后把载玻片放在平盘上编好记号,置于
37ºC的温箱烘干、待染。
三、作业
1、石蜡切片法包括哪几大步骤?简述固定、洗涤、脱水、透明的基本原理。
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