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第第页影响分光光度计测量误差的紧要原因及操作规程影响分光光度计测量误差的紧要原因
分光光度计是利用物质对光的选择性吸取进行物质的定性或定量分析的仪器,在各行各业得到了广泛应用,紧要用于物质纯度检查、定量分析、物质结构辨别等。可测量结果总会显现可接受或不可接受的误差,误差来源于测量过程的各个方面,我认为紧要来源于仪器本身性能和测量条件的选择两个方面。
一、仪器本身性能带来的误差
1.杂散光的影响
杂散光是指进人检测器的处于待测波长光谱带宽范围外的其他波长组分,它是光谱测量中误差的紧要来源。产生原因有:分光光度计的色散元件、反射镜、透镜及单色器内壁灰尘等。在分光光度计工作波段边缘波优点,由于单色器透光率、光源辐射强度、检测器灵敏度都较低,杂散光的影响更为显著。杂散光限制仪器的分析上限可引起严重的测量误差,实际工作中,在定量分析时,一般在吸取峰或其相近处测量样品吸光度,假如在分析波优点含有杂散光,这时样品的透光率较小,而杂散光大部分透过,使测量吸光度低于真实吸光度。
2.仪器噪声对测量的影响
仪器噪声也是仪器的一个紧要指标,它表征仪器做稀溶液的本领。是叠加在待测量的分析信号中的不需要的信号,扫描100%T和0%T线,可察看到分光光度计的确定噪声水平,假如仪器噪声较大,会掩盖较小的测量信号,一般用噪音的二倍来表示仪器的灵敏度。
3.波长和吸光度精准度
样品的每一个值都是在确定的波长下测得的,假如波长误差很大,测出的值确定不准。吸光度精准度也是用户对仪器的直接要求,更应引起充分的重视。国家计量检定规程规定双光束紫外可见分光光度计透射比精准度为A级士0.6%,B级土1.0%。
二、测量条件的选择
1.吸光度范围的选择
试样在不同吸光度时,浓度的相对误差不同,一般选择A二0.2一0.8之间,浓度相对误差较小,可以通过更改吸取池厚度、检测波长或待测溶液浓度,使吸光度读数在适合范围内。
2.狭缝宽度的选择
狭缝宽度不仅影响光谱的纯度,也影响吸光度值,在定量分析时,为了得到充分的测量信号,应接受较大狭缝。在定性分析时,为了提高辨别率,应接受较小狭缝,以获得精细的光谱结构。
3.吸取池的选择和使用
吸取池的规格应依据被测溶液颜色深浅来确定,一般是被测溶液颜色深时选光程短的,颜色浅时选光程长的,同一试验使用同一规格同一套吸取池。在定量测量之前需要对吸取池作校正和配对工作,吸取池不匹配时,对测量产生误差,吸取池方向不同,透光率亦有差异,使用时应注意方向。比色皿毛玻璃一面的上端有一个箭头,应与光路保持一致。另外,使用时,不要把溶液注得太满,以防在推动比色皿架时溶液溢出皿外。如透光壁外有溶液存在,要擦干再测,否则将产生误差。
分光光度计的正确使用和保养也很紧要,我们应当做到以下几点:坚持标准溶液现用现配,不使用过期溶液,比色皿应保持清洁、干燥,禁止用硬物碰擦透亮表面;防止仪器振动,影响测量稳定性;在开机状态,不测量时,应打开样品池门,延长光电传感器寿命;样品集中测量,避开开机次数,延长光源寿命;一旦停机,则应待灯冷却后再重新启动,并预热15min左右
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