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文档简介
蜂胶是由蜜蜂,特别是工蜂,从植物的树胶、树脂中采集,并与上颚腺、蜡腺等分泌物混合形成的具有黏性的固体胶状物。现代研究结果表明,蜂胶含有维生素、酚类、蓓烯类、黄酮类化合物等多种营养保健成分。在蜂胶的众多活性物质中,黄酮类物质是最为关键的成分之一,它具有抗菌、杀毒、消炎止痛、降血脂、促进机体组织再生和增强机体免疫能力等功效。近年来,蜂胶产品在市场上受到了广泛的关注和认可,其种类也日益丰富,主要以胶囊形式呈现。蜂胶中主要活性成分为黄酮类化合物,已成为研究热点,且市售的蜂胶胶囊类产品均以总黄酮含量作为评价指标。黄酮类化合物的测定有多种方法,如液相色谱法﹑分光光度法等,液相色谱法可以测定单一的黄酮成分,分光光度比色法可以测定黄酮成分的总量。紫外分光光度法被广泛应用于测定蜂胶制品中的总黄酮含量,因为它具有操作简便、准确度高且易于实施的特点,因此深受广大研究者的青睐。实验方法:根据《蜂胶中总黄酮含量的测定方法分光光度比色法》(GB/T20574—2006利用分光光度比色法对蜂胶软胶囊中的总黄酮进行定量分析。试剂芦丁标准品(含量95.5%,上海安谱璀世标准技术服务有限公司,批号2251131无水乙醇、硝酸铝、95%乙醇、醋酸钾(分析纯,南京化学试剂有限公司)仪器UV-1800紫外可见分光光度计(上海美析仪器有限公司超声波清洗仪;高速台式离心机;BT25S十万分之一电子天平、BSA224S-CW电子天平。试样的制备称取蜂胶软胶囊内容物0.5g(精确至1mg)于烧杯中,加入95%乙醇约30mL,室温下超声提取20min,将溶液转移至50mL的容量瓶中,加入95%乙醇至刻度线,混合均匀后进行过滤,弃去初滤液,收集滤液待测。准确吸取1.0mL待测溶液于50mL容量瓶中,分别加入1.0mL硝酸铝溶液和1.0mL醋酸钾溶液,加95%乙醇至刻度,摇匀,静置10min,3000r·min-1离心3min,取上清液待测。空白实验精密吸取1.0mL待测溶液于50mL容量瓶中,加95%乙醇至刻度,摇匀。用1cm比色皿,在415nm以空白试液作参比,测定样品吸光度。标准溶液制备称取10.50mg芦丁标准品(含量95.5%)于50mL容量瓶中,用无水乙醇溶解,并定容至刻度,摇匀,溶液浓度为0.2g·L-1。吸取标准溶液0mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL和6.00mL(相当于芦丁含量0mg、0.2mg、0.4mg、0.6mg、0.8mg、1.0mg和1.2mg分别置于50mL容量瓶中,向容量瓶中加入1.0mL硝酸铝溶液和1.0mL醋酸钾溶液,用95%乙醇定容至刻度,摇匀,静置10min后测定。结果计算总黄酮计算公式为式中
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