分光光度计测量误差有哪些及工作原理

第第页分光光度计测量误差有哪些及工作原理分光光度计测量误差有哪些分光光度计是利用物质对光的选择性吸取进行物质的定性或定量分析的仪器，在各行各业得到了广泛应用，紧要用于物质纯度检查、定量分析、物质结构辨别等。可测量结果总会显现可接受或不可接受的误差，误差来源于测量过程的各个方面，紧要来源于仪器本身性能和测量条件的选择两个方面。

一、仪器本身性能带来的误差

1.1复色光对比耳定律的偏离

比耳定律成立的前提条件是人射光是单色光，但是精度再高的仪器，即使是双单色器的分光光度计，也只能获得近乎单色的光，无法获得纯单色光，它仍旧含有狭窄光通带，具有复色光的性质。而复色光会导致比耳定律的正或负偏离。固定狭缝的紫外分光光度计光谱带宽一般为1nm或2nm，可调狭缝的可以做到0.Inm；可见分光光度计带宽6nm、snm，甚至十几纳米。光谱带宽应当是越小越好，但是随着光谱辨别率的提高，仪器的灵敏度降低，所以选择仪器时要综合考虑各种条件的影响。当溶液浓度较小且单色光较纯时，可貌似认为符合比耳定律。

1.2杂散光的影响

杂散光是指进人检测器的处于待测波长光谱带宽范围外的其他波长组分，它是光谱测量中误差的紧要来源。产生原因有:分光光度计的色散元件、反射镜、透镜及单色器内壁灰尘等。在分光光度计工作波段边缘波优点，由于单色器透光率、光源辐射强度、检测器灵敏度都较低，杂散光的影响更为显著。杂散光限制仪器的分析上限可引起严重的测量误差，实际工作中，在定量分析时，一般在吸取峰或其相近处测量样品吸光度，假如在分析波优点含有杂散光，这时样品的透光率较小，而杂散光大部分透过，使测量吸光度低于真实吸光度。

1.3仪器噪声对测t的影响

仪器噪声也是仪器的一个紧要指标，它表征仪器做稀溶液的本领。是叠加在待测量的分析信号中的不需要的信号，扫描100%T和0%T线，可察看到分光光度计的确定噪声水平，假如仪器噪声较大，会掩盖较小的测量信号，一般用噪音的二倍来表示仪器的灵敏度。

1.4波长和吸光度精准度

样品的每一个值都是在确定的波长下测得的，假如波长误差很大，测出的值确定不准。吸光度精准度也是用户对仪器的直接要求，更应引起充分的重视。国家计量检定规程规定双光束紫外可见分光光度计透射比精准度为A级士0.6%，B级土1.0%。

二、测量条件的选择

2.1参比溶液和溶荆的选择

分光光度计的测量实际上是以通过参比池的光强度作为人射光强度来测定试样的吸光度，先调整仪器使透过参比池溶液的吸光度为零，然后让同一束光通过样品，使得吸光度比较真实地反映待测物质的浓度，所以参比溶液的选择特别紧要。假如仅有待测物质与显色剂的反应产物有吸取，可用纯溶剂或蒸馏水作参比溶液。假如显色剂有颜色，并在测定波长下有吸取，则用显色剂溶液作参比溶液，所加人显色剂及其它试剂的量，与试样中的加入量应一致。假如样品中其它组分本身的颜色对测定有干扰，而所用显色剂没颜色，则用不加显色剂的样品溶液作参比液。

正确选择合适的溶剂，对提高分析的精准度起紧要作用。为减小溶剂中杂质的影响，应选择高纯度的溶剂；溶剂应不与待测物质发生化学反应；待测物在溶剂中要有确定的溶解度；在测定的波长范围内，溶剂本身没有吸取，注意常用溶剂的最短可用波长；当用挥发性大的溶剂时，测量过程中吸取池应加盖。

2.2测试波长的选择

当用分光光度计对溶液进行测定时，首先需要选择合适的测量波长。选择的依据是该被测溶液的吸取曲线。在一般情况下，我们总是选择最大吸取波长作为测量波长，这样可以提高灵敏度。而在有些情况下最大吸取峰很尖锐、吸取过大或相近有干扰存在，就不能选最大吸