GB∕T 29636-2023 疑似毒品中甲基苯丙胺检验（正式版）

疑似毒品中甲基苯丙胺检验2023-08-06发布国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件代替GB/T29636—2013《疑似毒品中甲基苯丙胺的气相色谱、高效液相色谱和气相色谱-质谱检验方法》,与GB/T29636—2013相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：——更改了“范围”(见第1章，2013年版的第1章);——增加了液相色谱-质谱方法原理(见第4章);——更改了气相色谱及气相色谱-质谱使用试剂(见5.1.1,2013年版的5.1.1);——增加了液相色谱-质谱分析用试剂、仪器及材料(见第5章);——更改了气相色谱-质谱及气相色谱的样品制备(见6.1、6.2,2013年版的6.1、7.1、7.2);——增加了液相色谱-质谱分析方法(见7.1);——更改了液相色谱分析方法(见7.2,2013年版的7.3);——更改了“结果评价”(见第8章，2013年版的第8章)。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由全国刑事技术标准化技术委员会(SAC/TC179)归口。本文件起草单位：公安部鉴定中心、上海市公安局、山东省公安厅物证鉴定研究中心。王蔚昕。本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：——2013年首次发布为GB/T29636—2013;——本次为第一次修订。1疑似毒品中甲基苯丙胺检验本文件规定了甲基苯丙胺的气相色谱-质谱(GC-MS)、液相色谱-质谱(LC-MS)定性检验方法和气相色谱(GC)、液相色谱(LC)定量检验方法的原理、试剂、仪器和材料、检验分析步骤及结果评价。本文件适用于疑似毒品中甲基苯丙胺的定性分析和定量分析。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T27418测量不确定度评定与表示GA/T122毒物分析名词术语3术语和定义GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。4原理对疑似毒品中的甲基苯丙胺进行提取。采用气相色谱-质谱法检测，以保留时间、质谱特征离子和离子丰度比作为定性判断依据；采用液相色谱-质谱法检测，以保留时间、质谱特征离子对和离子对丰度比作为定性判断依据；采用气相色谱法检测，以色谱峰面积(或峰面积比值)作为定量依据，用外标单点法或内标标准曲线法进行定量分析；采用液相色谱法检测，以色谱峰面积作为定量依据，用外标单点法或外标标准曲线法进行定量分析。5试剂、仪器和材料5.1试剂除非另有说明，在分析中使用的试剂均为分析纯。5.1.1.3提取溶剂：乙腈十水=15+1(体积比)。2a)标准物质储备液：甲基苯丙胺标准物质储备液、正癸烷标准物质储备液。b)标准工作溶液按实验需求分为以下五类。——定性用标准工作溶液：移取甲基苯丙胺标准物质储备液适量，用甲醇稀释，配制成0.1mg/mL的甲基苯丙胺标准工作溶液。0℃~4℃冷藏保存，有效期6个月。也可根据实际情况配制实验中所用其他浓度的定性用标准工作溶液。——定性质控标准工作溶液：移取甲基苯丙胺标准物质储备液适量，用甲醇稀释，配制成0.005mg/mL的甲基苯丙胺标准工作溶液。0℃~4℃冷藏保存，有效期1个月。 外标单点法定量用标准工作溶液：移取甲基苯丙胺标准物质储备液适量，用甲醇稀释，配制成0.1mg/mL的甲基苯丙胺标准工作溶液。0℃~4℃冷藏保存，有效期6个月。——内标标准曲线法定量用内标储备液：移取正癸烷标准物质储备液适量，放入容量瓶中，加入甲醇，振摇至正癸烷溶解，超声5min,用甲醇定容至刻度，配制成10.0mg/mL内标标准曲线法定量用内标储备液。0℃~4℃冷藏保存，有效期12个月。——内标标准曲线法定量用标准工作溶液：配制方法参见附录A,移取相应体积的甲基苯丙胺标准物质储备液、10.0mg/mL内标标准曲线法定量用内标储备液、甲醇至进样瓶中，配制成甲基苯丙胺浓度为0.01mg/mL～0.5mg/mL的标准工作溶液，至少配制5个浓度。除非另有说明，在分析中使用的试剂均为色谱纯。5.1.2.7提取溶剂：乙腈+水=15+1(体积比)。5.1.2.90.1%(体积分数)甲酸水溶液。5.1.2.10缓冲溶液：以配制1000mL为例：量取1.9mL浓磷酸及2.5mL三乙胺，用去离子水定容至a)标准物质储备液：甲基苯丙胺标准物质储备液。b)标准工作溶液按实验需求分为以下四类。——定性用标准工作溶液：移取甲基苯丙胺标准物质储备液适量，用甲醇稀释，配制成10ng/mL的甲基苯丙胺标准工作溶液。0℃~4℃冷藏保存，有效期1个月。也可根据实际情况配制实验中所用其他浓度的定性用标准工作溶液。——定性质控标准工作溶液：移取甲基苯丙胺标准物质储备液适量，用甲醇稀释，配制成1ng/mL的甲基苯丙胺标准工作溶液。0℃~4℃冷藏保存，随用随配。——外标单点法定量用标准工作溶液：移取甲基苯丙胺标准物质储备液适量，用甲醇稀释，配制成0.1mg/mL的甲基苯丙胺标准工作溶液。0℃~4℃冷藏保存，有效期6个月。 外标标准曲线法定量用标准工作溶液；移取甲基苯丙胺标准物质储备液适量，用甲醇配制成甲基苯丙胺浓度为0.002mg/mL～0.2mg/mL的标准工作溶液，至少配制5个浓度。35.2仪器和材料5.2.1GC、GC-MS分析用仪器和材料GC、GC-MS分析用仪器和材料包括：a)气相色谱仪：配有火焰离子化检测器(FID);b)气相色谱-质谱仪：配有电子轰击源(EI);c)离心机；d)电子天平：定性检验实际分度值d小于或等于0.1mg,定量检验实际分度值d小于或等于e)涡旋振荡器；f)移液器或移液管；h)具盖离心管；5.2.2LC、LC-MS分析用仪器和材料LC、LC-MS分析用仪器和材料包括：a)液相色谱仪：配有二极管阵列(DAD)或紫外检测器(UV);b)液相色谱-质谱仪：配有电喷雾离子源，具备MRM检测模式；c)离心机；d)超声波清洗器；e)涡旋振荡器；f)电子天平：定性检验实际分度值d小于或等于0.1mg,定量检验实际分度值d小于或等于g)移液器或移液管；h)容量瓶；i)具盖离心管；6.1GC-MS定性分析固体样品经均质化后，根据实际需求，称取10mg～100mg于具盖离心管中，加入10mL甲醇，密封并振荡10min,以不低于4000r/min离心5min,取上清液作为样品溶液，供GC-MS分析。当样品溶液需要稀释时，加入甲醇进行稀释，稀释液作为样品溶液，供GC-MS分析。液体样品经均质化后，根据实际需求，称取10mg～100mg于具盖离心管中，加入5mL提取溶剂和5mL乙腈，再加入25μLPSA、150mg无水硫酸钠，密封并振荡10min,以不低于4000r/min离心5min,上清液过滤膜后作为样品溶液，供GC-MS分析。当样品溶液需要稀释时，加入乙腈进行稀4GB/T29636—20236.1.2仪器检测6.1.2.1GC-MS参考条件以下为参考条件(可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整):石英玻璃毛细柱(5%苯基+95%聚二甲基硅氧烷，30m×0.25mm×b)色谱柱温程：初始温度60℃,以15℃/min升温至300℃,保持15min;c)进样口温度：280℃;d)传输线温度：250℃;e)离子源温度：230℃;f)分流比：20:1;g)载气：高纯氦气(He);h)柱流速(恒流):1.0mL/min;k)倍增器电压：参考调谐状况；分别吸取样品空白(甲醇)、样品溶液、标准溶液空白(甲醇)和定性用标准工作溶液，按6.1.2.1条件进样分析。根据实际需求，再分别吸取标准溶液空白(甲醇)和定性质控标准工作溶液，按6.1.2.1条件进行分析。6.2GC定量分析6.2.1GC外标单点法6.2.1.1含量预分析采用外标单点法定量用标准工作溶液作为定量参照。按照公式(1)计算样品中目标组分的预分析含量。 (1)式中：o——样品中甲基苯丙胺的含量(质量分数);C₀——外标单点法定量用标准工作溶液中甲基苯丙胺的质量浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL);A——样品溶液中甲基苯丙胺的色谱峰面积；V₁——样品溶液初次定容体积，单位为毫升(mL);V₂——从初次定容样品溶液V₁中移取的体积，单位为毫升(mL);V₃——将V₂稀释时加入甲醇或乙腈的体积，单位为毫升(mL);A₀——外标单点法定量用标准工作溶液中甲基苯丙胺的色谱峰面积；m——样品的称量质量，单位为毫克(mg)。5GB/T29636—20236.2.1.2准确定量6.2.1.2.1称量质量的计算根据预分析中甲基苯丙胺含量测定结果，选择合适的初次定容体积、稀释倍数(样品提取操作参数选择参见附录A),并按照公式(2)计算出样品称量质量(m),使样品溶液中目标物的浓度在所用标准工作溶液浓度的(100±30)%范围内。式中：m——准确定量时样品的称量质量，单位为毫克(mg);…C₀——外标单点法定量用标准工作溶液中甲基苯丙胺的质量浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL);V——初次定容体积，单位为毫升(mL);D——稀释倍数；o——样品中甲基苯丙胺的预分析含量(质量分数)。固体样品，根据6.2.1.2.1计算结果，平行称取样品2份于具盖离心管中(当需要对定量结果进行不确定度评定时，至少平行称取6份)。根据预分析含量范围，加入相应初次定容体积的甲醇，密封并振荡10min,以不低于4000r/min离心5min,取上清液作为样品溶液，供GC分析。当样品溶液需要稀释时，按照稀释倍数加入甲醇进行稀释定容，稀释液作为样品溶液，供GC分析。液体样品，根据6.2.1.2.1计算结果，平行称取样品2份于具盖离心管中(当需要对定量结果进行不确定度评定时，至少平行称取6份)。根据预分析含量范围，分别加入相同体积的提取溶剂和乙腈(总体积与附录A的初次定容体积相当),按照25μL/100mg液体样品的比例加入PSA,150mg/100mg液体样品的比例加入无水硫酸钠，密封并振荡10min,以不低于4000r/min离心5min,上清液过滤膜后作为样品溶液，供GC分析。当样品溶液需要稀释时，按照稀释倍数加入乙腈进行稀释定容，稀释液作为样品溶液，供GC分析。6.2.1.2.3仪器检测以下为参考条件(可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整):a)色谱柱：DB-5石英玻璃毛细柱(5%苯基+95%聚二甲基硅氧烷，30m×或其他等效柱；b)色谱柱温程：初始温度80℃,以10℃/min升温至200℃,以40℃/min升温至280℃保持c)进样口温度：280℃;d)检测器温度：300℃;e)载气：高纯氮气(N₂);f)分流比：20:1;g)柱流速(恒流):1.0mL/min;i)燃烧气流速：按仪器默认值；6k)助燃气流速：按仪器默认值。分别吸取样品空白(甲醇)、样品溶液、标准溶液空白(甲醇)和外标单点法定量用标准工作溶液，按6.2.1.2.3.1条件进样分析。当称取2份样品时，每份样品进样2针～3针。按照公式(1)计算样品中甲基苯丙胺的含量。6.2.2.1内标标准工作曲线绘制采用5.1.1中配制的内标标准曲线法定量用标准工作溶液及标准溶液空白(甲醇溶液)绘制成线性范围为0.01mg/mL～0.5mg/mL的甲基苯丙胺标准工作曲线。固体样品经均质化后，根据实际需求，平行称取样品2份于具盖离心管中，分别加入10mL甲醇，密封并振荡10min,以不低于4000r/min离心5min,取上清液500μL于自动进样瓶中，向同一自动进样瓶中加入10mg/mL正癸烷内标储备液100μL、甲醇400μL,振荡溶解均匀后作为样品溶液，供液体样品经均质化后，根据实际需求，平行称取样品2份于具盖离心管中，分别加入5mL提取溶剂和5mL乙腈，密封并振荡5min,超声5min。按照25μL/100mg液体样品的比例加入PSA,150mg/100mg液体样品的比例加入无水硫酸钠，密封并振荡10min,以不低于4000r/min离心5min,上清液过滤膜后，取500μL于自动进样瓶中，向同一自动进样瓶中加入10mg/mL正癸烷内标根据内标标准工作曲线计算样品中甲基苯丙胺的含量。7LC-MS及LC分析7.1LC-MS定性分析固体样品经均质化后，根据实际需求，称取约10mg于具盖离心管中，加入10mL甲醇，密封并振荡10min,以不低于4000r/min离心5min,取上清液以初始流动相稀释10万倍，稀释液过滤膜后作7液体样品经均质化后，根据实际需求，称取约10mg于具盖离心管中，加入5mL提取溶剂和5mL乙腈，再加入2.5μLPSA,密封并振荡10min,以不低于4000r/min离心5min,取上清液以初始流动相稀释10万倍，稀释液过滤膜后作为样品溶液，供LC-MS分析。若样本中甲基苯丙胺的含量过低，可降低稀释倍数或不进行稀释。以下为参考条件(可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整):b)流动相：A为甲醇，B为0.1%甲酸水溶液；d)梯度洗脱程序：见表1;表1梯度洗脱程序时间/min037f)离子源：电喷雾离子源；g)扫描方式：正离子模式；h)离子源温度：150℃;i)毛细管电压：3000V;j)脱溶剂气流速：800L/h;k)脱溶剂温度：500℃;m)质谱定性特征离子对和去簇电压、碰撞能量条件见表2。表2质谱定性特征离子对和去簇电压、碰撞能量条件目标物定性特征离子对去簇电压/V碰撞能量/eV甲基苯丙胺150.1>91.1150.1>119.18分别吸取样品空白(定性提取溶剂)、样品溶液、标准溶液空白(定性提取溶剂)和定性用标准工作溶液，按7.1.2.1条件进样分析。或根据实际需求，再分别吸取标准溶液空白(定性提取溶剂)和定性质控标准工作溶液，按7.1.2.1条件进行分析。7.2LC定量分析固体样品经均质化后，根据实际需求，称取10mg～100mg于具盖离心管中，加入10mL初始流动相，密封并振荡10min,以不低于4000r/min离心5min,上清液过滤膜后作为样品溶液，供LC分析。液体样品经均质化后，根据实际需求，称取约10mg～100mg于具盖离心管中，加入5mL提取溶剂和5mL初始流动相，再加入25μLPSA,密封并振荡10min,以不低于4000r/min离心5min,上清液过滤膜后作为样品溶液，供LC分析。采用外标单点法定量用标准工作溶液作为定量参照。按照公式(1)计算样品中目标组分的预分析含量。根据预分析中甲基苯丙胺含量测定结果，选择合适的初次定容体积、稀释倍数，并按照公式(2)计算出样品称量质量(m),使样品溶液中目标物的浓度在所用标准工作溶液浓度的(100±30)%范围内。固体样品，根据7.2.1.2.1计算结果，平行称取样品2份于具盖离心管中(当需要对定量结果进行不确定度评定时，至少平行称取6份)。根据预分析含量范围，分别加入相应初次定容体积的初始流动相，密封并振荡10min,以不低于4000r/min离心5min,上清液过滤膜后作为样品溶液，供LC分析。当样品溶液需要稀释时，按照稀释倍数加入初始流动相稀释定容，稀释液作为样品溶液，供LC分析。液体样品，根据7.2.1.2.1计算结果，平行称取样品2份于具盖离心管中(当需要对定量结果进行不确定度评定时，至少平行称取6份)。根据预分析含量范围，分别加入相同体积的提取溶剂和初始流动相(总体积与附录A的初次定容体积相当),按照25μL/100mg液体样品的比例加入PSA,密封振荡10min,以不低于4000r/min离心5min,上清液过滤膜后作为样品溶液，供LC分析。当样品溶液需要稀释时，按照稀释倍数加入初始流动相稀释定容，稀释液作为样品溶液，供LC分析。以下为参考条件(可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整):a)色谱柱：Cg色谱柱(150mm×4.6mm,5μm)或其他等效柱；d)梯度洗脱程序：见表3;9表3梯度洗脱程序时间/min020.00g)检测波长：210nm,带宽4nm。分别吸取样品空白、样品溶液、标准溶液空白和外标单点法定量用标准工作溶液，按7.2.1.2.3.1条件进样分析。当称取2份样品时，每份样品进样2针～3针。按照公式(1)计算样品中甲基苯丙胺的含量。7.2.2LC外标标准曲线法7.2.2.1外标标准工作曲线绘制采用5.1.2中配制的LC外标标准曲线法定量用标准工作溶液及标准溶液空白(甲醇溶液)绘制成线性范围为0.002mg/mL～0.2mg/mL的甲基苯丙胺标准工作曲线。固体样品经均质化后，根据实际需求，平行称取样品2份于具盖离心管中，分别加入10mL初始流动相，密封并振荡10min,以不低于4000r/min离心5min,上清液过滤膜后作为样品溶液，供LC分析。液体样品经均质化后，根据实际需求，平行称取样品2份于具盖离心管中，分别加入5mL提取溶和5mL初始流动相，按照25μL/100mg液体样品的比例加入PSA,密封并振荡10min,以不低于4000r/min离心5min,上清液过滤膜后作为样品溶液，供LC分析。根据外标标准工作曲线计算样品中甲基苯丙胺的含量。8结果评价8.1定性结果评价8.1.1GC-MS定性结果评价阳性结果评价：在相同条件下进行测定时，样品溶液中目标物与浓度接近的定性用标准工作溶液中的目标物相比，色谱峰保留时间一致(相对误差在±1%之内)、质谱特征离子(不少于3个)一致，且各离子丰度比的最大允许相对偏差范围不超过表4的规定，样品空白无干扰，则可判断样品中检出目标物。甲基苯丙胺的基本信息及气相色谱-质谱图、特征离子参见附录B。表4离子丰度比的最大允许相对偏差范围离子丰度比>20%～50%>10%～20%最大允许相对偏差阴性结果评价：扣除背景后，GC-MS定性质控标准工作溶液中检出目标物特征离子，标准溶液空白无干扰，10.0mg/mL样品溶液中未出现与GC-MS定性质控标准工作溶液中目标物一致的特征离子，则可判断样品中未检出目标物。8.1.2LC-MS定性结果评价阳性结果评价：在相同条件下进行样品测定时，样品溶液中目标物与浓度接近的定性用标准工作溶液中的目标物相比，色谱峰保留时间一致(相对误差在±2.5%以内)、定性离子对(至少两对)一致，且离子对丰度比的最大允许相对偏差范围不超过表5的规定，样品空白无干扰，则可判断样品中检出目标物。甲基苯丙胺的液相色谱-质谱图参见附录B。表5离子对丰度比的最大允许相对偏差范围离子对丰度比>20%～50%>10%～20%最大允许相对偏差阴性结果评价：扣除背景后，LC-MS定性质控标准工作溶液中检出目标物特征离子对，标准溶液空白无干扰，1.0mg/mL样品溶液中未出现与LC-MS定性质控标准工作溶液中目标物一致的特征离子对，则可判断样品中未检出目标物。8.2定量结果评价8.2.1相对相差检验平行称取2份样品时，测定数据按照公式(3)计算相对相差(RD)。式中：RD——