医疗保健产品灭菌 生物指示物 第5部分：蒸汽甲醛灭菌用生物指示物

ICS11.080.01

CCSC47

中华人民共和国国家标准

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

代替GB/T18281.5-2015

`

医疗保健产品灭菌生物指示物第5部分：

低温蒸汽甲醛灭菌用生物指示物

Sterilizationofhealthcareproducts—Biologicalindicators—Part5:Biological

indicatorsforlow-temperaturesteamandformaldehydesterilizationprocesses

(ISO11138-5:2017,IDT)

（征求意见稿）

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

引言

GB/T18281《医疗保健产品灭菌生物指示物》是有关生物指示物的通用性和专用性标准。GB/T18281

旨在提供生物指示物的要求、选择和使用指南以及缩短培养时间的方法，拟由八个部分构成：

——第1部分：通则。目的在于提供生物指示物的通用要求。

——第2部分：环氧乙烷灭菌用生物指示物。目的在于提供环氧乙烷灭菌用生物指示物的专用要

求。

——第3部分：湿热灭菌用生物指示物。目的在于提供湿热灭菌用生物指示物的专用要求。

——第4部分：干热灭菌用生物指示物。目的在于提供干热灭菌用生物指示物的专用要求。

——第5部分：低温蒸汽甲醛灭菌用生物指示物。目的在于提供低温蒸汽甲醛灭菌用生物指示物

的专用要求。

——第6部分：过氧化氢灭菌过程用生物指示物。目的在于提供过氧化氢灭菌用生物指示物的专

用要求。

——第7部分：选择、使用和结果判断指南。目的在于提供生物指示物的正确选择和使用的指南。

——第8部分：缩短生物指示物培养时间的确认方法。目的在于提供缩短生物指示物培养时间的

确认方法。

GB18281.1规定了生物指标物在生产、标签、测试方法和性能方面的通用要求，这些指示物包含

拟用于灭菌过程确认和常规监测的染菌载体和菌悬液。本文件规定了用于低温蒸汽甲醛灭菌过程中的生

物指示物的专用要求。

附录B给出了低温蒸汽甲醛用生物指示物的液相测试方法原理。

GB18281标准系列由来自生产商、用户和监管机构的专家们共同参与制定，代表了目前的“最先

进的技术。该系列标准并非是提倡在不建议使用的情况下使用生物指示物，而是为生物指示物的生产与

使用提供规范化要求。

ISO25424提供了用于低温蒸汽甲醛灭菌过程的确认与常规监测的通用要求。

注：我国已公布了涵盖灭菌或生物指示物要求的标准。

对生物指示物的选择、使用和结果判读指南见ISO14161。

II

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

医疗保健产品灭菌生物指示物第5部分：低温蒸汽甲醛灭菌用生

物指示物

1范围

本文件规定了用于使用低温蒸汽甲醛作为灭菌剂的灭菌过程效果评价的试验微生物、菌悬液、染菌

载体、生物指示物和测试方法的要求。

注1：低温蒸汽甲醛灭菌过程的确认和常规控制的要求见ISO14937。

注2：工作场所的安全要求见我国国家或地方法规。

本文件适用于低温蒸汽甲醛灭菌用生物指示物。

本文件不适用于其他灭菌用生物指示物。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

ISO11138-1:2017医疗保健产品灭菌生物指示物第1部分：通则（Sterilizationofhealthcare

products-Biologicalindicators-Part1:Generalrequirements）

注：GB/T18281.1-20××医疗保健产品灭菌生物指示物第1部分：通则（ISO11138-1:2017，IDT）。

3术语和定义

ISO11138-1界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1

低温蒸汽甲醛灭菌low-temperaturesteamandformaldehydesterilization

通过动力排气，使预先包装的物品处在负压状态下暴露于蒸汽，在低于100℃温度下，注入甲醛

气体使灭菌剂在维持时间内保持稳定状态的过程。

4通用要求

ISO11138-1的要求适用。

5试验微生物

5.1试验微生物应是嗜热脂肪地芽孢杆菌或其它证明符合本文件要求的等效性能的微生物菌株。

注1：嗜热脂肪芽孢杆菌已重新分类为嗜热脂肪地芽孢杆菌。

注2：目前被认为适用的嗜热脂肪地芽孢杆菌，如NCIB8224，DSM6790，ATCC7593，ATCC10149和ATCC12980。

5.2如使用嗜热脂肪地芽孢杆菌以外的试验微生物，应确定试验微生物的抗力适用性。

1

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

6菌悬液

ISO11138-1的要求适用。

7载体和初级包装

7.1用于低温蒸汽甲醛灭菌过程生物指示物的载体与初级包装的材料适用性应证明符合ISO11138-1：

2017中5.2和附录B的要求。

注：由于纤维素表面对甲醛的化学吸附作用，滤纸类不宜作载体。

7.2确定符合性的暴露条件应如下：

a)最低暴露温度：制造商标称的最高暴露温度的5℃以上；

b)最高暴露温度：由制造商标称；如果制造商未标称，最高暴露温度应≥100℃；

c)暴露时间：≥160min。

注：尽管在低温蒸汽甲醛灭菌过程的实际限制范围内，暴露条件还需代表对载体的现实挑战。

8染菌载体和生物指示物

ISO11138-1的要求适用。

9菌数和抗力

9.1抗力特性应按ISO11138-1：2017的6.4要求标称。

9.2生物指示物上每单位活菌数的增量应以≤0.1×10n的整数倍标称（如：每毫升菌悬液、每个染

菌载体或每个生物指示物）。

9.3染菌载体和生物指示物的活菌数应≥1.0×105。

9.4抗力应用60℃时的D值表示，单位为分钟。每一批次的生物指示物或者染菌载体的D值应

以60℃下分钟数进行标称，保留一位小数。

9.5按照附录A进行测试时，以嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢制成的菌悬液、染菌载体或生物指示物的

D60值应≥6.0min。采用其它微生物时，应满足该D值要求。

9.6本文件和ISO11138标准系列中其它部分中规定的抗力特性应使用与参考灭菌过程相关的特定

关键变量来测定。

9.7D值按ISO11138-1:2017中附录C和附录D的方法确定。

9.8D值的确定和存活—杀灭反应特性依据附录A中的过程参数。

9.9存活—杀灭区间宜用ISO11138-1:2017中附录E的公式来计算。

注：此信息对使用者在比较同一制造商不同批次产品时是有价值的。

示例：使用ISO11138-1:2017附录E的公式结合本文件规定的最少菌数与最小D值，存活-杀灭反应特性为

-在60℃时：存活时间≥18min，杀灭时间≤54min。

2

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

附录A

（规范性）

测定低温蒸汽甲醛灭菌过程中抗力的方法

A.1通则

本方法是一种基于染菌载体浸没到甲醛水溶液的定性测试。本方法的测试结果比使用气相腔式方法

的结果有更好的重现性。

A.2染菌载体的暴露条件

A.2.1测试系统中包含装有10mL甲醛水溶液的试管，并使试管放在一个自动控温的水浴装置中。测

试系统应能在1min至150min时间段内（精确至±10s）保持特定的暴露条件。

A.2.2甲醛水溶液的浓度应用化学分析方法确定。

A.2.3方法应进行确认。

A.3步骤

A.3.1测试时采用无菌操作以避免偶发污染。

A.3.2将染菌载体完全浸没于装有预热至60℃±0.5℃、浓度为1mol/L±0.01mol/L的甲醛水溶

液测试试管中。

A.3.3确认染菌载体完全浸没于甲醛水溶液中而不是漂浮于表面。

A.3.4在设定的暴露时间结束时，取出甲醛溶液中的染菌载体。

A.3.5去除载体上的多余液体，将其在室温下浸入装有已过滤后的2%Na2SO3溶液的试管中至少1

0min，以中和载体上残留的甲醛。盖上试管。应注意尽量不要搅动甲醛与中和剂溶液，以防止微生物

被冲下。

注：组氨酸和半胱氨酸是有效的中和剂。

A.3.6应规定生长培养基，确保该培养基可回收测试微生物。

注：本测试中大豆酪蛋白消化培养基适用。

A.3.7将载体转移至装有10mL生长培养基（A.3.6）的试管中。盖上试管。

A.3.8将试管在90℃下放置60min用于孢子的热激活。

A.3.9最后对载体进行培养（见ISO11138-1:2017，第7章）。

A.4抗力确定

抗力特性应按ISO11138-1:2017中附录C、D和E的方法进行确定。

3

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

附录B

（资料性）

低温蒸汽甲醛用生物指示物的液相测试方法原理

B.1通则

为了能够以可重复的方法检测指示物，应使用特定的测试设备（抗力仪）和测试方法。在低温蒸汽

甲醛灭菌过程中，抗力仪中的甲醛气体浓度极难达到稳定，因为当一定量的甲醛注入容器中后，部分甲

醛会溶于出现的少量的水珠（冷凝物）中。依照温度的不同，甲醛在水中的浓度高于其在气体状态下浓

度的1000倍至10000倍。

因此，本文件采用甲醛溶液浸泡的测试方法，该方法下甲醛浓度清晰界定，方法重现性较好。

B.2低温蒸汽甲醛灭菌过程

即使在连续的蒸汽条件下和稳定的甲醛气体浓度中，灭菌过程仍高度依赖于灭菌腔体的设计和装载

物的特性。甲醛灭菌过程可以简单地划分为两个步骤：

a)与蒸汽灭菌过程类似，装载物表面会产生水珠冷凝物膜；

注：冷凝过程会极快发生。

b)由于甲醛在气液平衡状态下的浓度变化极大（1:1000到1:10000），因此达到平衡所需要的

时间相对较长。

注：在实际情况下，需要的时间可能在10min至2h之间。

灭菌过程中对微生物杀灭的能力高度取决于甲醛在液态中的浓度，如表面冷凝水。确认达到这种平

衡条件的准确时间非常困难。

4

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

参考文献

[1]ISO14161,Sterilizationofhealthcareproducts-Biologicalindicators-Guidancefortheselection,use

andinterpretationofresults

[2]ISO14937,Sterilizationofhealthcareproducts-Generalrequirementsforcharacterizationofa

sterilizingagentandthedevelopment,validationandroutinecontrolofasterilizationprocessformedical

devices

[3]ISO25424,Sterilizaitonofmedicaldevices-Lowtemperaturesteamandformaldehyde-Requirements

fordevelopment,validationandroutinecontrolofasterilizationprocessformedicaldevices

[4]EN14180,Sterilizersformedicalpurposes-Lowtemperaturesteamandformaldehyde

sterilizer-Requirementsandtesting

[5]GoMANNJ.,KAISERU.,MENZELR.Reactionkineticsofthelow-temperature-steam-formaldehyde

(LTST).SterilizationProcess.ZentrSteril.2000.8(5)pp.290-296

5

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件是GB/T18281《医疗保健产品灭菌生物指示物》的第5部分。GB/T18281已经发布了以下

部分：

——第1部分：通则；

——第2部分：环氧乙烷灭菌用生物指示物；

——第3部分：湿热灭菌用生物指示物；

——第4部分：干热灭菌用生物指示物；

——第5部分：低温蒸汽甲醛灭菌用生物指示物；

——第7部分：选择、使用和结果判断指南；

——第8部分：缩短生物指示物培养时间的确认方法。

本文件代替GB18281.5-2015《医疗保健产品灭菌生物指示物第5部分：低温蒸汽甲醛灭菌用生

物指示物》，与GB18281.5-2015相比，主要技术变化如下：

——更改了规范性引用文件（见第2章）；

——更改了载体和初级包装的暴露时间（见7.2）；

——删除了指示物抗力用FBIO值表示的规定（见2015年版的9.6）。

本文件等同采用国际标准ISO11138-5:2017《医疗保健产品灭菌生物指示物第5部分：低温蒸汽

甲醛灭菌用生物指示物》。

本文件做了下列编辑性修改：

——删除了国际标准的前言，以适应我国的国情；

——更改了引言中的注，以适应我国的国情；

——更改了范围中的注2，以适应我国的国情。

本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本文件由全国消毒技术与设备标准化技术委员会（SAC/TC200）归口。

本文件起草单位：

本文件主要起草人：

本文件所替代文件的历次版本发布情况为：

——2015年首次发布为GB/T18281.5-2015；

——本次为第一次修订。

I

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

医疗保健产品灭菌生物指示物第5部分：低温蒸汽甲醛灭菌用生

物指示物

1范围

本文件规定了用于使用低温蒸汽甲醛作为灭菌剂的灭菌过程效果评价的试验微生物、菌悬液、染菌

载体、生物指示物和测试方法的要求。

注1：低温蒸汽甲醛灭菌过程的确认和常规控制的要求见ISO14937。

注2：工作场所的安全要求见我国国家或地方法规。

本文件适用于低温蒸汽甲醛灭菌用生物指示物。

本文件不适用于其他灭菌用生物指示物。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

ISO11138-1:2017医疗保健产品灭菌生物指示物第1部分：通则（Sterilizationofhealthcare

products-Biologicalindicators-Part1:Generalrequirements）

注：GB/T18281.1-20××医疗保健产品灭菌生物指示物第1部分：通则（ISO11138-1:2017，IDT）。

3术语和定义

ISO11138-1界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1

低温蒸汽甲醛灭菌low-temperaturesteamandformaldehydesterilization

通过动力排气，使预先包装的物品处在负压状态下暴露于蒸汽，在低于100℃温度下，注入甲醛

气体使灭菌剂在维持时间内保持稳定状态的过程。

4通用要求

ISO11138-1的要求适用。

5试验微生物

5.1试验微生物应是嗜热脂肪地芽孢杆菌或其它证明符合本文件要求的等效性能的微生物菌株。

注1：嗜热脂肪芽孢杆菌已重新分类为嗜热脂肪地芽孢杆菌。

注2：目前被认为适用的嗜热脂肪地芽孢杆菌，如NCIB8224，DSM6790，ATCC7593，ATCC10149和ATCC12980。

5.2如使用嗜热脂肪地芽孢杆菌以外的试验微生物，应确定试验微生物的抗力适用性。

1

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

6菌悬液

ISO11138-1的要求适用。

7载体和初级包装

7.1用于低温蒸汽甲醛灭菌过程生物指示物的载体与初级包装的材料适用性应证明符合ISO11138-1：

2017中5.2和附录B的要求。

注：由于纤维素表面对甲醛的化学吸附作用，滤纸类不宜作载体。

7.2确定符合性的暴露条件应如下：

a)最低暴露温度：制造商标称的最高暴露温度的5℃以上；

b)最高暴露温度：由制造商标称；如果制造商未标称，最高暴露温度应≥100℃；

c)暴露时间：≥160min。

注：尽管在低温蒸汽甲醛灭菌过程的实际限制范围内，暴露条件还需代表对载体的现实挑战。

8染菌载体和生物指示物

ISO11138-1的要求适用。

9菌数和抗力

9.1抗力特性应按ISO11138-1：2017的6.4要求标称。

9.2生物指示物上每单位活菌数的增量应以≤0.1×10n的整数倍标称（如：每毫升菌悬液、每个染

菌载体或每个生物指示物）。

9.3染菌载体和生物指示物的活菌数应≥1.0×105。

9.4抗力应用60℃时的D值表示，单位为分钟。每一批次的生物指示物或者染菌载体的D值应

以60℃下分钟数进行标称，保留一位小数。

9.5按照附录A进行测试时，以嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢制成的菌悬液、染菌载体或生物指示物的

D60值应≥6.0min。采用其它微生物时，应满足该D值要求。

9.6本文件和ISO11138标准系列中其它部分中规定的抗力特性应使用与参考灭菌过程相关的特定

关键变量来测定。

9.7D值按ISO11138-1:2017中附录C和附录D的方法确定。

9.8D值的确定和存活—杀灭反应特性依据附录A中的过程参数。

9.9存活—杀灭区间宜用ISO11138-1:2017中附录E的公式来计算。

注：此信息对使用者在比较同一制造商不同批次产品时是有价值的。

示例：使用ISO11138-1:2017附录E的公式结合本文件规定的最少菌数与最小D值，存活-杀灭反应特性为

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