气相色谱质谱联用测定植物油中的非皂化物质

背景介绍随着我国近年来植物油的大力发展，植物油市场极大丰富。但是，掺假、伪劣的植物油甚至地沟油依然流入市场，不仅欺骗消费者，还危害着消费者的健康安全。非皂化物质是植物油的一类特征成分。目前，国内外对植物油非皂化物质气相色谱质谱法的研究主要集中在分别分析角鲨烯、甾醇以及其他萜类物质的成分上，但是分析的植物油种类及数量较少，针对大量市售植物油中能实现分析多种非皂化物质并用于植物油油鉴定和防伪检测的研究还未有报道。本文将专攻植物油非皂化物质的检测分析，探究少有报道的配有HP-5MS色谱柱的气相色谱质谱的检测分析能力，拓展已有的气相色谱质谱检测技术，实现了甾醇及角鲨烯物质的同时分析。文章亮点1.建立了测定植物油中的非皂化成分（角鲨烯及甾醇物质）的气相色谱质谱联用分析方法，其检测限均小于2.00mg/L，加标回收率为90.12%～112.42%。2.详细分析山茶油、大豆油、玉米胚芽油的品质差别，从非皂化物质的水平揭示各种植物油之间的差异，为以非皂化物质探究山茶油的鉴定与防伪检测提供依据。内容简介1

实验部分1.1

主要仪器与试剂1.2

实验方法1.2.1

溶液配制1.2.2

植物油前处理1.2.3

标准样品配制及标准曲线的制作1.2.3.1

标准曲线储备溶液1.2.3.2

标准曲线工作溶液用正己烷稀释上述储备液，使得b-谷甾醇的浓度梯度为8.0、80.0、8.0´102、4.0´103、1.0´104mg/L，其他各物质混合标样溶液的浓度梯度为5.0、50.0、2.5´102、1.0´103、2.5´103mg/L。1.2.4

GC-MS色谱条件1.2.5

精密度与准确度本文用浓度为100mg/L角鲨烯、菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇、羽扇豆醇、环阿屯醇的混合标准溶液，平行检测6次，以相对标准偏差（RSD）值评价仪器的精密度。2

结果与讨论2.1

非皂化物质的衍生GC-MS最初检测条件参考文献[13]中β-谷甾醇检测方法并进行了优化。2.2

色谱条件的优化的研究基于上述研究结果，采用上述GC-MS条件对山茶油实际样品进行处理分析，结果显示在30～35min之间色谱峰重叠严重，样品中被分析物的干扰较为严重且未达到基线分离，无法通过色谱峰进行定性或定量分析。2.3

GC-MS检测分析植物油中常见的6种非皂化物质为确定植物油中常见的6种甾醇及角鲨烯物质在该色谱条件下能达到基线分离，本文采用混标样和上述优化后的色谱条件进行进样分析，测试条件如下：程序升温条件：180℃保持1min；然后以8℃/min升至250℃，保持10min；再以2℃/min升至280℃，保持15min；分流比：1:20。结果如图2所示。2.4

植物油中的非皂化物质的分析检测情况2.4.1

实际样品的分析情况从图3a中可以看出山茶油的各非皂化物质基本达到基线分离，其保留时间在18.672、31.957、33.105、35.084、36.264、36.800min，分别为角鲨烯、菜油甾醇三甲基硅醚、豆甾醇三甲基硅醚、β-谷甾醇三甲基硅醚、羽扇豆醇三甲基硅醚和环阿屯醇三甲基硅醚。2.4.2

回收率方法的回收率采用标准添加法进行测定和计算。本文对抽提的样品再添加75mg/L或300mg/L混标溶液后衍生再进行分析测定，并计算得出相对应的加标回收率，结果见表2。2.4.3

大豆油、玉米油和山茶油中非皂化物质的分析对9种油品的非皂化物质进行峰面积统计计算其在实际油品中的含量，结果见表3。3

结论本文采用气相色谱质谱法检测植物油中的角鲨烯、菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇、羽扇豆醇和环阿屯醇。它们的检测限均低于2.00mg/mL，其保留时间RSD值均<8%，峰面积RSD值均<10%，方法的回收率为90.12%～112.42%，说明该方法精密度较好且准确可靠。此外，本文中通过对比传统固相萃取前处理方法，发现直接皂化抽提衍生可获得更好的回收率。最后，采用所建立的方法实现了山茶油、大豆油及玉米油实际样本分析，同时进一步采用方差分析结果表明，山茶油中的豆甾醇的含量与大豆油（或玉米油）中的存在显著差异，而β-谷甾醇的含量在大豆油与