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阶段质量检测(二)微生物的培养与应用(B卷能力素养提升)(满分:100分时间:40分钟)一、选择题(每小题4分,共48分)1.从土壤中分离能分解尿素的细菌,可以利用选择培养基,其成分中一定有()①尿素②有机氮化物③无机盐④有机碳化物⑤水⑥无机碳化物A.①③④⑤ B.②③④⑤C.①③⑤⑥ D.②③⑤⑥解析:选A分离能分解尿素的细菌,培养基中一定有尿素且是唯一氮源。另外,水、无机盐和碳源、能源也是细菌生长所必不可少的。有机碳在这里既是碳源又是能源,因为分解尿素的细菌是异养微生物,不能利用无机碳化物。一定没有有机氮化物,因为其他异养型微生物可利用有机氮化物作氮源而能和分解尿素的细菌共同生长,起不到选择培养的作用。2.稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是()A.操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B.需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面C.不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D.操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理解析:选C稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的浓度梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,在适宜条件下培养。只有在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物才被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。3.“筛选”是生物学中培育生物新类型常用的手段,下列有关技术过程中不可能筛选成功的有()A.在无氮培养基上筛选圆褐固氮菌B.在不含精氨酸的培养液中筛选能合成精氨酸的杂交细胞C.用含青霉素的培养基筛选酵母菌和霉菌D.用不含碳源的培养基筛选根瘤菌解析:选D圆褐固氮菌可以固定氮气,所以可以在无氮培养基上生长;青霉素可抑制细菌细胞壁的形成,而对酵母菌和霉菌无抑制作用;根瘤菌是异养生物,在不含碳源的培养基上不能生长。4.大肠杆菌能够在哪种培养基上生长繁殖()A.无氮培养基B.分解尿素的细菌的选择培养基C.纤维素分解菌的选择培养基D.牛肉膏蛋白胨培养基解析:选D大肠杆菌在含碳源、氮源、水、无机盐的培养基上才能生长,A中没有氮元素,B、C中的氮元素和碳元素不能被大肠杆菌利用。5.在平板划线操作中,错误的是()A.将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红B.将烧红的接种环在火焰旁边冷却C.接种环在平板上划线位置是随机的D.在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰解析:选C接种环灼烧及接种前后试管口要通过火焰,其目的是为了防止杂菌污染,将接种环先冷却再接种可以避免高温杀死菌种,因此都是正确的。在平板上划线时,要划3~5条平行线,而不是随机划线。6.含氨苄青霉素的LB培养基在基因工程中有很重要的应用。该培养基能杀死一切不抗氨苄青霉素的细菌,只有对氨苄青霉素具有抗性的细菌才能正常生长繁殖。由其作用可知该培养基是一种()A.固体培养基B.合成培养基C.天然培养基D.选择培养基解析:选D该培养基由于含有氨苄青霉素,能杀死一切不抗氨苄青霉素的细菌,只有对氨苄青霉素具有抗性的细菌才能正常生长繁殖。因此氨苄青霉素起到了选择作用。7.下列有关分解纤维素微生物的分离的叙述,不正确的是()A.纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵B.对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后,无需再进行其他实验C.纤维素酶的测定方法,一般是对所产生的葡萄糖进行定量地测定D.纤维素酶是一种复合酶解析:选B初步筛选只是分离纯化的第一步,为确定得到的是纤维素分解菌,还需进行发酵产生纤维素酶的实验;纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种;纤维素酶的测定方法,一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定。8.尿素是尿素分解菌的氮源,因此在配制培养基时()A.葡萄糖在培养基中含量越多越好B.尿素在培养基中含量越少越好C.尿素分解菌有固氮能力,故培养基中尿素为无机氮D.尿素分解菌无固氮能力,故培养基中的尿素为化合态氮解析:选D尿素分解菌为异养型微生物,培养基中含葡萄糖是必要的,但不是越多越好,葡萄糖的含量过多会使细菌失水过多而不能生长。尿素分解菌没有固氮能力,不能利用游离态的氮,只能利用化合态的氮。尿素在培养基中含量过多或过少都不利于细菌的正常生长。尿素为小分子有机物。9.除了高温加热以外,其他灭菌方法还有()A.紫外线照射 D.真空包装C.用保鲜膜密闭 D.添加防腐剂解析:选A灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物(包括芽孢和孢子)。本题中真空包装、添加防腐剂、用保鲜膜密闭都起到了抑菌作用,紫外线照射使细菌的蛋白质变性,核酸受破坏,是灭菌方法。10.下列关于统计菌落数目方法的叙述,不正确的是()A.采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的活菌数B.当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落C.为了保证结果准确,一般采用密度较大的平板进行计数D.在某一浓度下涂布三个平板,若三个平板统计的菌落数差别不大,则应以它们的平均值作为统计结果解析:选C当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。一般选择菌落数在30~300的平板计数,密度过大会使计数结果偏小,影响结果的准确性。涂布3个平板,作为重复组,取其平均值计数能增强实验的说服力和准确性。11.在培养微生物的培养基中加入某些物质能分离出所需的微生物。下列前项是在培养基中加入的物质,后项是能分离出的微生物,正确的是()A.氢氧化钠;酵母菌B.盐酸;放线菌C.适量的青霉素;霉菌D.适量的伊红和美蓝;大肠杆菌解析:选C氢氧化钠、盐酸为强碱、强酸,酵母菌和放线菌都不能生存;加入伊红和美蓝的培养基是鉴定大肠杆菌,但不能分离出大肠杆菌;适量的青霉素对原核生物有抑制作用,对真核生物的生命活动并不影响,霉菌为真核生物,因此可利用加入青霉素的培养基分离霉菌。12.如图表示四种微生物培养物(①~④)在添加利福平前后的细胞内RNA含量。由此可以判断古细菌和酵母菌可能是()A.①② D.①④C.②③ D.③④解析:选B利福平只能抑制细菌RNA的合成,从而使RNA和蛋白质的合成停止。古细菌的复制、转录和翻译接近真核生物;利福平也对酵母菌等真核生物无效,所以加利福平前后,古细菌和酵母菌中的RNA变化不大。二、非选择题(共52分)13.(16分)无菌操作是微生物接种技术的关键。传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中,均要无菌操作。回答下列相关问题:(1)消毒和灭菌是两个不同的概念,灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力,消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理()①皮肤②饮用水③牛奶④注射器⑤培养皿⑥接种环⑦培养基⑧果汁⑨酱油⑩手术刀A.①②③⑧⑨ B.④⑤⑥⑦⑩C.①②③④⑤⑥⑧ D.以上全部(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行____________,接种前要进行____________,在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在无菌条件下进行。(3)在微生物的实验室培养中,获得纯净培养物的关键是_____________________________________________________________________________________________________________________。如图是利用________法进行大肠杆菌接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的,操作上应注意:①每次划线前要______________________________________;②冷却后从上一区划线末端开始划;③首尾区______________________。(4)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对固体培养基应采用的检测方法是__________________________________________________________,观察培养基上是否有菌落产生。(5)利用培养基不仅可以分离培养大肠杆菌,也可以进行植物组织培养。与大肠杆菌培养明显不同的是,用于组织培养的培养基中还需要加入__________________________。(6)有位同学在家制作泡菜时,为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素,结果发酵失败,原因可能是___________________________________________________________。解析:(1)皮肤、饮用水、牛奶、果汁、酱油应消毒处理,注射器、培养皿、接种环、培养基、手术刀应灭菌处理。(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH,接种前要进行高压蒸汽灭菌,在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在无菌条件下进行。(3)在微生物的实验室培养中,获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线进行时应每次划线前要灼烧接种环,冷却后从上一区划线末端开始划,首尾区不连接。(4)接种前检测培养基是否被污染的方法为将未接种(接种等量无菌水)的培养基在适宜的温度下放置适当时间,观察培养基上是否有菌落产生。(5)与大肠杆菌培养明显不同的是,用于组织培养的培养基中还需要加入植物激素(或生长素和细胞分裂素)。(6)制作泡菜利用的是乳酸菌的乳酸发酵,但乳酸菌对青霉素敏感,会导致死亡。答案:(1)A(2)调整pH高压蒸汽灭菌(3)防止外来杂菌的入侵平板划线灼烧接种环不连接(不重叠)(4)将未接种(接种等量无菌水)的培养基在适宜的温度下放置适当时间(5)植物激素(或生长素和细胞分裂素)(6)青霉素杀死了乳酸菌14.(20分)某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题:(1)培养基中含有蛋白胨、淀粉,分别为细菌培养提供了氮源和________。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是________和________。(2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是_________________________________。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于________中培养,培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。(4)培养20h后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有_______种细菌。一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越________。(5)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐____________细菌,这种培养基(按功能分)被称为____________。(6)从以下哪些微生物中可以提取到能够分解玉米秸秆的酶?________。(多选)A.酿制果醋的醋酸菌B.生长在腐木上的霉菌C.制作酸奶的乳酸菌D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌E.反刍动物瘤胃中生存的某些微生物答案:(1)碳源无机盐水(2)高压蒸汽灭菌(3)恒温培养箱无菌水(4)多高(5)盐(或NaCl)选择培养基(6)B、E15.(16分)利用微生物分解淀粉生产糖浆具有广阔的应用前景。某研究所为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌,进行了如下实验。请进一步完善实验内容并回答相关问题:(1)实验步骤:①配制以____________为碳源的固体培养基,为了使培养基凝固成固体,应该向培养基中加入的物质是________。②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上,在恒温培养箱中培养一段时间后,培养基上会出现________。③将接种针用_______法灭菌后,从②中培养基上挑取一定量细菌,接种至________(填“固体”“半固体”或“液体”)培养基,在恒温摇床上培养24h,使细菌大量繁殖。④取与①培养基中相同的成分及配比,并加入少量碘液,使制作的培养基呈蓝紫色,灭菌并调节pH,用______________法将③过程所获得大量繁殖的细菌接种到该培养基上。⑤培养一段时间后,观察菌落周围培养基的颜色变化及其范围的大小,周围出现__________的菌落即为初选菌落,经进一步分离、纯化后即可达到实验目的。(2)上述实验步骤中,倒平板和接种的操作都应在超净台上的__________________附近进行。(3)上述实验步骤中,从用途看,①所用培养基属于____________培养基,④和⑤所用培养基属于________培养基。解析:(1)①欲筛选出能高效分解淀粉的菌株,培养基中应只有淀粉一种碳源,而无其他碳源。②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上,在恒温培养箱中培养一段时间后,培养基上会出现菌落。③为了避免杂菌的污染,接种过程中要进行无菌操作,如对接种针进行灼烧处理。从②中的培养基上挑取一定量细菌,接种至液体培养基进行有氧发酵。④用稀释涂布平板法将③过程所获得大量繁殖的细菌接种到该培养基上。⑤培养一段时间后,淀粉分解菌菌落周围会出现透明圈。(2)整个实验操作应是无菌的,倒平板和接种的操作都应在超净台上的酒精灯火焰附近进行。(3)从用途看,①所用培养基属于选择培养基,④和⑤所用培养基属于鉴别培养基。答案:(1)①淀粉琼脂②菌落③灼烧液体④稀释涂

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