土壤脲酶（Solid-UreaseS-UE）测定试剂盒说明书_第1页
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第第页土壤脲酶（Solid—Urease，S—UE）测定试剂盒说明书土壤脲酶（SolidUrease，SUE）测定试剂盒说明书微量法100管/48样注意：正式测定前务必取23个预期差别较大的样本做猜测定测定意义：SUE能够水解尿素，产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素情形。测定原理：利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3N。需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。试剂的构成和配制：试剂一：甲苯2mL×1瓶，4℃保管；（自备）试剂二：粉剂×1瓶，临用前加入9mL蒸馏水，充分溶解待用，4℃保管；用不完的试剂4℃保管；试剂三：液体22mL×1瓶，4℃保管；试剂四A液：液体×1支，4℃保管；试剂四B液：液体×1瓶，4℃保管；临用前将A液倒入B液中混合，待用；用不完的试剂4℃保管一周；试剂五：液体2mL×1瓶，4℃保管；样品处理：新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30～50目筛。测定步骤：1、培育测定管对比管风干土样（g）0.050.05试剂一（μL）2020振荡混匀，室温放置15min试剂二（μL）90蒸馏水（μL）90试剂三（μL）190190混匀，放入37℃水浴培育24h后，10000g25℃离心10min，取上清液。2、将培育结束的上清液稀释10倍（取0.1mL上清液，加入0.9mL蒸馏水）。3、测氨量（在微量石英比色皿或96孔板中加入下列试剂）测定管对比管稀释后的上清液（μL）8080试剂四（μL）1515试剂五（μL）1515充分混匀，室温放置20min蒸馏水（μL）9090混匀，于578nm处，蒸馏水调零，读吸光值A，计算ΔA=A测定管A对比管。每个测定管设一个对比管。脲酶活力计算：a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准条件下测定的回归方程为y=0.0915x+0.0373；x为标准品浓度（μg/mL），y为吸光值A。单位的定义：每天每g土样中产生1μgNH3N定义为一个酶活力单位。脲酶活力（μg/d/g土样）＝（ΔA0.0373）÷0.0915×10×V反总÷W÷T=656×（ΔA0.0373）10：稀释倍数；T：反应时间，1d；V反总：反应体系总体积：0.3mL；W：样本质量，0.05g。b.用96孔板测定的计算公式如下标准条件下测定的回归方程为y=0.04575x+0.0373；x为标准品浓度（μg/mL），y为吸光值A。单位的定义：每天每g土样中产生1μgNH3N定义为一个酶活力单位。脲酶活力（μg/d/g土样）＝（ΔA0.0373）÷0.04575×10×V反总÷W÷T=1312×

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