结缔组织病相关自身抗体的解读

自身(zìshēn)免疫性疾病相关抗体的解读赵久良北京协和医院风湿(fēnɡshī)免疫科共四十五页弥漫性结缔组织(jiédì-zǔzhī)病的特点自身免疫应答反应强度与病情密切相关组织器官病理性损伤和相应的功能障碍产生高滴度的

自身抗体或与自身组织起反应的T细胞共四十五页自身(zìshēn)抗体临床意义与病情活动相关抗ds-DNA抗体cANCAACL诊断特异性抗Sm抗体抗CCP抗体抗SSA/SSB预测(yùcè)预后临床亚型抗Jo-1抗Scl-70抗rRNP器官特异性CNS：抗rRNP抗体肺脏：抗Scl-70kDa

抗Jo-1抗体临床上具有多种常用自身抗体共四十五页自身(zìshēn)抗体检测的价值诊断提供治疗依据筛选已患病自己不知道预警抗体阳性，无临床表现抗体阳性与特定的临床事件共四十五页常用(chánɡyònɡ)实验室检查方法共四十五页共四十五页共四十五页间接(jiànjiē)免疫荧光法共四十五页

间接(jiànjiē)免疫荧光下不同核型共四十五页ANA染色(rǎnsè)模型分析（25种）均质型H：抗DNP，dsDNA，组蛋白，核小体斑点型S：ENA核仁型N：SSc相关抗体，RNA多聚酶I，PM-SCl,u3nRNP核模型M：抗核包膜蛋白抗体（gp210，板层素），部分dsDNA着丝点型：ACA阳性(yángxìng)胞浆型：分裂间期细胞细胞浆颜色阳性，线粒体型，核糖体型，Jo-1型，细颗粒型混合型共四十五页抗dsDNA抗体(kàngtǐ)临床意义致病作用(zuòyòng)在SLE患者的肾脏病变处发现了抗DNA抗体在具有抗dsDNA抗体的人中，85%会在约5年内发展成为SLESLE中阳性率60-90%对于未治疗SLE患者，Sp90%，Se70%抗体水平与疾病活动度相关活动期阳性率80-100%，非活动期<30%共四十五页抗ENA抗体(kàngtǐ)共四十五页抗ENA抗体(kàngtǐ)可提取性核抗原，为核中一类(yīlèi)蛋白质，均不含有DNA、组蛋白可以被盐水提取ENA抗原可以从多种组织中获得，无种属间差异，但有明显的组织不均一性共四十五页共四十五页免疫(miǎnyì)对流电泳CIEAbAgO|OOOOOOOO|OO|O阳极(yángjí)+-阴极

共四十五页免疫(miǎnyì)双扩散(ID)已知Ab1:16已知Ab

Ag1:1待测血清1:41:64

U1-RNP

Sm

SSASSB共四十五页双扩散法解读(jiědú)免疫双扩散(ID)检测(jiǎncè)结果判断上图为抗Sm、U1-RNP抗体阳性滴度均为1:4下图为抗SSA、SSB抗体阳性抗SSA抗体滴度1:64抗SSB抗体滴度1:16共四十五页免疫(miǎnyì)印迹法(WB法)共四十五页与抗ENA抗体特异性结合多肽(duōtài)抗原表位抗Sm 28/29、13.5KD抗U1RNP73、32、17.5KD抗SSA 52、60KD抗SSB 45、47、48KD抗rRNP 38、16.5、15KD抗Jo-1 55KD抗ScL-7086、70KD共四十五页免疫印迹(yìnjì)法解读共四十五页抗ENA及其临床意义抗RNP CTD、MCTD、SLE抗Sm SLE30%抗SSA(Ro) pSS75%、SLE25%抗SSB(La) pSS40%、SLE10%抗rRNP SLE抗Scl-70 SSc20~30%抗Jo-1 PM30%共四十五页抗ENA抗体(kàngtǐ)临床意义标记(biāojì)抗体抗Sm系统性红斑狼疮（SLE）抗Scl-70 系统性硬化症抗SSA/SSB 干燥综合征病情活动度相关细胞浆抗原 JO-1预测疾病预后和临床亚型抗Jo-1 皮肌炎合并肺间质病变抗rRNP 狼疮脑病共四十五页特殊(tèshū)问题共四十五页ANA18项除外性诊断对于临床不考虑CTD患者增加项目抗CENP-B抗体：ACA共包括4型，以B型为主抗核小体抗体：多见于活动性SLE，尤其是狼疮肾炎(shènyán)，可能是SLE的特异性抗体，Se58-71%，Sp97-99%初步筛查临床考虑CTD，但具体分型未明共四十五页共四十五页类风湿关节炎相关(xiāngguān)抗体谱类风湿因子灵敏度高，特异度差（63%）抗环瓜氨酸多肽抗体(kàngtǐ)CCPELISA，79%，阳性预测值84%抗角蛋白抗体（AKA）：IF抗核周因子抗体（APF）：IFMCV共四十五页类风湿关节炎

多关节炎 -关节变形 -偶见脏器累及(肺纤维化,胸膜炎,心包炎,巩膜炎,类风湿结节(jiéjié),血管炎) -30-50%RA患者在发病第一年可见关节损坏 -40%RA患者5年内病情发展导致丧失劳动力 -根据病情的严重程度，寿命缩短3到14年共四十五页类风湿的关节损害(sǔnhài)——致畸的根源在疾病发生(fāshēng)2年内即可发生不可逆的关节损坏，致残率高1966~1971atMiddlesexHospital,London,UK.94例病程<1年早期RA入组90%的关节破坏（60/67）发生在两年内，比骨关节炎（osteoarthritis）的危害更大T.Sokka,T.Pincus:Ahistoricalperspectiveconcerningpopulation-basedandclinicalstudiesofearlyarthritisandearlyrheumatoidarthritis.ClinExpRheumatol2003;21(Suppl.31):S5-S14.28共四十五页常规诊断方法(fāngfǎ)不能实现早期诊断29现行的美国风湿病学会（ACR）1987年的诊断标准主要依靠临床表现、X线以及类风湿因子（RF）

检测。符合此标准时病人常已出现骨关节破坏，加之RF缺乏特异性，不利于早期诊断、早期干预治疗，因此临床需要(xūyào)能用于RA早期诊断的实验室指标。艾脉兴，曾小峰，ChinJRheumatol,June2002,Vol6,No.3共四十五页抗CCP与类风湿因子(yīnzǐ)（RF）的区别现行临床上熟悉的实验室诊断指标是类风湿因子，由于RF受某些抗原(kàngyuán)、抗体物质的干扰，常出现假阳性，特异性不高。自1964年以来陆续证实抗核周因子抗体（APF）、抗角蛋白抗体（AKA）、抗丝集蛋白抗体（AFA）以及抗Sa抗体对RA具有高度特异性，可在疾病早期出现。进一步研究发现，上述抗体在化学结构上具有相关性，他们识别表位的主要抗原决定簇都含有瓜氨酸，被称为瓜氨酸相关自身免疫系统，并认为此系统可能在RA的发病及发展中起作用。共四十五页抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体(kàngtǐ)2000年,荷兰(hélán)学者Schellekons等首次合成由21个氨基酸残基组成、含瓜氨酸的环肽(CCP)为抗原,用ELISA方法检测RA病人血清的抗CCP抗体并取得令人满意的结果共四十五页“环状”瓜氨酸多肽抗体(kàngtǐ)比“线性”瓜氨酸多肽抗体(kàngtǐ)对类风湿检测更灵敏瓜氨酸多肽对类风湿关节炎的敏感性线性49%环状68%CCP=CyclicCitrullinatedPeptide（环瓜氨酸肽）Schellekensetal.,2000抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体(kàngtǐ)共四十五页抗CCP抗体(kàngtǐ)与类风湿关节炎共四十五页抗CCP与RF联检纳入(nàrù)新RA分类标准34关节受累情况受累关节数得分（0-5分）中大关节1个0

2-10个1小关节1-3个2

4-10个3至少1个小关节>10个5血清学

得分（0-3分）RF和抗CCP抗体均阴性（－）0RF或抗CCP抗体低滴度阳性（＋）2RF或抗CCP抗体高滴度阳性（＋＋）3（>正常上限3倍）

滑膜炎病程

得分（0-1分）<6周

0≥6周

1急性时相反应物

得分（0-1分）CRP和ESR均正常

0CRP或ESR升高

1取各项评分最高分加和，总分≥6分可确诊RA中华风湿病学杂志(zázhì)2010年4月第14卷第4期《类风湿关节炎诊断及治疗指南》RA新四项抗CCP抗体类风湿因子C反应蛋白血沉共四十五页抗CCP抗体体检(tǐjiǎn)筛查应用建议检测(jiǎncè)套餐免疫性疾病基础检验项目骨检测项目增加抗CCP抗体联合检测重点群体男性、女性普遍适用（女性、家族有疾病史潜在风险更高）结果比类风湿因子更可靠早于影像学诊断持续阳性提示骨破坏持续加重持续阳性致残率极高（两年内70%）共四十五页抗磷脂(línzhī)抗体谱广义抗磷脂抗体谱包括：抗心磷脂抗体(kàngtǐ)：ACL抗磷脂结合血浆蛋白抗体：β2GP1凝血酶原（PT），蛋白C，蛋白S膜联蛋白Annexin

A2和A5抗磷脂-蛋白复合物抗体磷脂酰肌醇anti-PI，磷脂酰乙醇胺

anti-PE磷脂酰丝氨酸/凝血酶原（anti-PS/PT）波形蛋白/心磷脂复合物：anti-vimentin狼疮抗凝物：功能性抗体，1952年发现，1972年命名共四十五页狼疮(lángchuāng)抗凝物（LAC）一种IgG/IgM型免疫球蛋白，作用(zuòyòng)于凝血酶原复合物，阻断活化的凝血因子V与凝血酶原作用，抑制纤维蛋白的形成，致使凝血时间延长初筛试验：活化部分凝血酶原时间(APTT)白陶土凝血时间(KCT)稀释蛇毒凝血时间(dRVVT)稀释凝血酶原时间(dPT)通过纠正试验确诊：若有LA，缺乏血小板正常血清不能纠正凝血时间，只有加入过量磷脂或血小板溶解物后，延长的APTT可被纠正需排除其他原因，如肝素、Ⅷ因子复合物等共四十五页抗心磷脂(línzhī)抗体（ACL）最先发现的抗磷脂自身抗体之一，和血小板减少有明显(míngxiǎn)相关性ACL阳性者，血小板减少3倍于ACL阴性者习惯性流产与IgG型ACL关系密切，并可能和抗体的滴定度有关检测方法：ELISA目前尚无金标准两种类型：38ACLIg类型与血栓形成常见疾病

2-GP1依赖高滴度IgG型密切相关自身免疫病、APS非

2-GP1依赖低滴度IgM型不引起血栓梅毒、AIDS等感染性疾病共四十五页抗β2GP1抗体(kàngtǐ)抗B2GP1抗体(kàngtǐ)：特异度高（94.5%），灵敏度低24%结构域1=Domain

I与临床价值更相关

共四十五页ANCA–荧光染色(rǎnsè)模型对应抗原(kàngyuán)主要抗原:蛋白酶3(PR3)其它抗原:BPI,AZU等主要抗原:髓过氧化物酶(MPO)

其它抗原:

HLE,LF,CG等相关疾病

肉芽肿伴多血管炎(GPA):敏感性:73%特异性:99%感染等显微镜下多血管炎(MPA):

敏感性:67%特异性:99%IBD,RA,SLE等共四十五页ANCA阳性(yángxìng)患者的疾病谱余洁等，《中华全科医师(quánkēyīshī)杂志》2010；9:26-30CTD患者如RA、SLE和肌炎，偶可表现出ANCA阳性，但大多是非MPO-ANCA,和非PR3-ANCA感染性心