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文档简介
DB41河南省市场监督管理局发布I 1 1 1 2 2 2 2本标准起草单位:河南农业大学、河南省林业科学本标准主要起草人:范国强、翟晓巧、赵振利、陈卓、刘荣宁、李永生、曹喜兵、林海、1泡桐组织培养快繁技术规程于人工控制光照和温度的组织培养室内,使之生长、分化或发育成完整植株的将芽转移到生根培养基中进行生根培养,形成完整植株的过程。取生长健康的泡桐当年生带有腋芽或顶芽的嫩枝,用清水清洗后,先用质量分数为0.度20g/L,琼脂浓度3.0g/L~8.0g/L。培养瓶放置于培养室中,培养温度25℃±2℃,光照强度130μmoL/m2·s,光照时间16h/d。60d2采集生长健康的泡桐当年生种子,先用70%酒精消毒30s,再放入0.1%HgCl2溶液中进行浸泡消毒5min,然后用无菌水冲洗3~5次。最后将种子接种于不附加植物生长调节物质的MS培养基上,培养基中蔗糖浓度20g/L,琼脂浓度5.0g/L。培养瓶放置于培养室中,培养温度、光照强度和光照时间同3.1。50d后可获得3~4对叶片的4.1叶片外植体芽的诱导将获得的无菌叶片沿主脉切成约1.0cm×2.0cm的外植体,接种于附加不同浓度6-BA(8mg/L~培养瓶放置于培养室中,培养温度、光照强度和光照时间同3.1。培养35d后,在叶缘处分4.2茎段外植体芽的诱导(0.2mg/L~0.5mg/L)的MS基本培养基上,培养基中蔗糖浓度20g/L,琼脂浓度5.0g/L。培养瓶放置于培养室中,培养温度、光照强度和光照时间同3.1。培养30d后分化本培养基上,培养基中蔗糖浓度20g/L,琼脂浓度5.0g/L。培养瓶放置于培养室中,培养温度、光照当泡桐幼苗的根在生根培养基上长到约3cm时,逐步去掉组培瓶盖,在温室内锻盛有蛭石或草炭土(经5%的高锰酸钾消毒处理或121℃高温灭菌20min)的营养钵中。用1/2MS营养液浇灌湿润,放到温室中培养,温室温度25℃~28℃,开始2周空气
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