实验动物生物样本质量控制规范

2实验动物生物样本质量控制规范GB/T39767-2021《人类生物GB/T37864-2019《生物样本库质量和能从病理形态、分子水平和特定指标等方面对4.1样本质量控制应符合GB/T334.2样本及相关数据的质量控制应符合预期用途，并依据该预期用途确定质量控制的最低关键性能指5.1方法的确认应依据GB/T37864-2019中7.9的要求，使用经过确认和/或验证的方法来完成样本及相关数据的质5.2相关影响因素在进行方法确认和/或验证时，应考虑人员、环境、生物样本的前处理过程、获取、保存、销毁、运输等操作应符合GB/T37864-2019的要求。应建立6.2.1应定期随机抽检，系统性评价样本生命周期中的6.2.2.3应记录抽样质检程序的改动，并体现在质检报6.2.2.5如抽样导致样本耗尽时，抽样质控可6.3.1.1组织样本质量评估是指从组织学形态、分子水平和特定指标等方面对样本进行评价，并判断6.3.1.3分子水平评价是通过检测样本的核酸（浓度、纯度、完整性）、蛋白质（46.3.5其他样本质量评估，如粪便、唾液、乳汁、阴道内液、羊水等，应依据各自预期用途，建5A.1DNA样本的浓度测定A.1.1分光光度法A.1.2荧光染料检测法一般用标准品溶液的浓度(ng/mL)对应的荧光强度作回归曲线,将样本溶液的绝对定量分析：起始浓度(Log)与Ct值呈线性关系,通过已相对定量分析(2-ΔΔCt法):即通过计算测试样本目的基因相对于对照样本采用微滴发生器将含有核酸分子反应体系形成成千上万纳升级的微滴,其中每个微滴或A.2.1分光光度法A.2.2琼脂糖凝胶电泳法若电泳条带最前面如果有较小的条带,说明存在RNA污染,应在提取过程中加入适当浓度的RNA酶进A.3.1凝胶电泳法6A.3.2毛细管凝胶电泳法毛细管凝胶电泳分析方法可提供DNA片段峰分布分析如下:A.4RNA样本的浓度测定A.4.1分光光度法A.4.2荧光染料检测法一般用标准品溶液的浓度(ng/mL)对应的荧光强度作直线回归,将样本溶液的程,计算出样本的核酸含量。对于微量和低浓度样本,宜采用荧光染料检测法,此方法受其A.5RNA样本的纯度测定A.5.1分光光度法A.5.2琼脂糖凝胶电泳法电泳后点样孔较亮甚至点样孔与目标带之间有明显拖尾现象在4kb-5kb甚至更高分子量处出现条带,说明有明显A.6RNA样本的完整性测定A.6.1凝胶电泳法显示28S(2kb左右):18S(1kb左自动化凝胶电泳可以提供RNA完整值参数,用于评价从高度完整的RNA(RIN值为10)到严重降解的RNA(RINA.6.2毛细管凝集电泳法依据RIS值可对RNA的完整性进行评分，RIS值越高,代表RNA的7B.1蛋白质样本的浓度测定B.1.1蛋白凯氏定氮法B.1.2双缩脲法本方法应用于微量蛋白质含量的测定。蛋白质在碱性溶液中可形成铜-蛋白质的复合物，此考马斯亮蓝显色法基于蛋白质与考马斯亮蓝染料结合的原理，通过测定染料与蛋白质结B.1.5二辛可宁酸法(又名BCA法)B.1.6紫外分光度检测法B.2蛋白质样本的完整性测定B.2.1SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法聚丙稀酰胺凝胶电泳时,不同的蛋白质按照其分子量大小进行分布,电泳迁移率仅取决于量。由于不连续的PH梯度作用样品被压缩成一条狭窄区带,采用染观察结果。通过该方法测定蛋