灰树花菌种生产技术规程（征求意见稿）编制说明

《灰树花菌种生产技术规程》(征求意见稿)陕西省地方标准编制说明根据陕西省市场监督管理局《关于下达2024年第二批地方标准制修订计划灰树花又名千佛菌、栗子蘑、莲花菌、云蕈、舞茸等，于上世纪80我国驯化栽培成功，目前已发展出工厂化栽培、大棚袋栽、覆土仿野生栽培等多种模式，近年来在我国各项农业优惠政策的扶持下已形成一定生产规模。我省灰树花栽培已有十多年历史，种植规模也逐年提升，2023年栽培量约260万袋，产量占全国总产量的10%。菌种是食用菌品质高产的基础，是产业可持续健康发展的关键。目前，我省灰树花菌种生产中存在菌种来源不明确、技术水平低、管理不规范等问题，从而导致了菌种性能退化、生产周期长、污染率高等，直接影响了栽培产量和质量，甚至出现减产、绝产等事故。因此，有必要根据我省灰树花菌种生产中存在的实际情况，制定《灰树花菌种生产技术规个环节进行规范，科学指导菌种生产过程，以提升菌种生产者技术水平，提高我省灰树花菌种生产质量，保障栽培成功率、产品产量和质量，增强我省灰树花产品国际国内市场竞争力，促进企业增产农民增收。通过《灰树花菌种生产技术规程》的制定，可引导菇农规范菌种生产，促进产业良性发展，形成我省在本标准编制过程中，我们遵循了“科学性、实用性、统一性、规范性以及（1）本标准严格遵守GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化（3）标准的内容与现行有关法律、法规和有关上级强制性标准相一致，不2（4）力求结合本项目实际情况，在指标上力求科学、先进、可行，为大量本标准重点围绕灰树花生产活动中有关菌种生产的质量和安全，立足于我省灰树花产业发展现状，同时充分关注行业发展趋势，以相关科研成果为依据，积极借鉴国内先进标准，对灰树花菌种生产技使本标准能够在灰树花菌种生产技术的选择和使用中起到规范作用，引导我省灰树花栽培行业水平提高一个层次，从而有利于我省灰树花栽培行业的长远发展。本标准在制定过程中，参考了以下相关标准——本标准依据《标准化工作导则第一部分：标准化文件的结构和起草规本标准由陕西省市场监督管理局组织制定。起草单位为陕西省微生物研究所、陕西理工大学、陕西省园艺技术工作站、渭南市农业科学研究院、汉中市农业技术推广与培训中心、宝鸡市农业科学研究院、汉中康田生物科技有限公表1标准主要起草人及职责分工工作单位承担的工作研究员陕西省微生物研究所项目负责人，负责项目整体实施和标准编制张文隽副研究员陕西省微生物研究所标准编制解修超副教授陕西理工大学校验雷丽农艺师陕西省园艺技术工作站材料整理简红忠高级农艺师汉中市农业技术推广与培训中心校验王璞农艺师渭南市农业科学研究院材料收集马婧嘉助理研究员陕西省微生物研究所标准编制李雅茹研实员陕西省微生物研究所标准编制韩根锁高级农艺师宝鸡市农业科学研究院校验吴建海技术总监汉中康田生物科技有限公司材料收集技术人员管理人员技术人员管理人员起草标准成果收集意见征询《灰树花菌种生产技术起草标准成果收集意见征询《灰树花菌种生产技术规程》实施方案标准检验前验证技术成果技术规程类讨论验证生产单位或基地验证第三方材料证明检测验证第三方检测报告项目组实施方案标准检验前验证技术成果技术规程类讨论验证生产单位或基地验证第三方材料证明检测验证第三方检测报告项目组评审与发布标准文本修改标准评审专家评审与发布标准文本修改标准评审专家省技监局标准发布省技监局标准发布42022年8月1日，陕西省微生物研究所、陕西理工大学、陕西省园艺技术工作站、渭南市农业科学研究院、汉中市农业技术推广与培训中心、宝鸡市农业科学研究院、汉中康田生物科技有限公司等单位就本标准的编制事宜进行了协商，成立了《灰树花菌种生产技术规程》编制项目组。标准起草项目组组建后，按照起草部署会议的计划，在总结本标准制定起草组前期科学研究成果的基础上，广泛查阅相关国家标准、其他相关省市地方标准和具有权威采信价值的文献资料，同时密切联系以汉中康田生物科技有限公司为主的灰树花菌种生产实践，多次赴宝鸡、渭南、汉中等栽培区进行灰树花菌种生产调查研究，2023年4月21日项目组召开了工作会议的步骤、分工和实施方案，对工作组成员分工、工作进度和要求作了具体安排。2023年6月13日，项目组对标准起草情况及存在问题进行了讨论。2023年10月20日，项目组召开标准通稿会，审阅了标准初稿，会议确定了标准的制定原则，对标准格式、表达方式、主要内容等按照GB/T1.1《标准化工作导2024年5月26日，项目组组织召开了征求意见会议，邀请有关科研院所、农技推广单位、菌种生产企业和省标准化研究院等单位相关人员，对项目项目组从2022年开始对陕西省灰树花主产区的菌种生产情况进行了调查研究，2022-2023年分别在宝鸡、渭南、汉中建立了3个菌种生产站、6个试验示范点，对规范灰树花菌种生产培养基配方、培养温度等进行了试验研究，试验5（3）马铃薯200g（浸出汁麸皮100g（浸出汁葡萄糖20g，磷酸二（5）马铃薯200g（用浸出汁蔗糖15g，蛋白胨15g，琼脂20g，水（6）木屑25g（浸出汁葡萄糖10g，酵母膏2g，蛋白胨1g，琼脂选用18mm×180mm的玻璃试管，培养基灌入量为五分之一，试管口用硅胶塞封口，高压灭菌表2不同母种培养基灰树花菌丝生长情况编号菌丝生长速度（mm/d）菌丝生长势菌丝颜色配方13.63浓密配方23.65浓密配方33.71浓密配方43.68浓密配方52.95较浓密配方63.27较浓密6量以灭菌后达到总容积的1/2为好，松紧适度。将菌种瓶口和外壁擦拭干净后，用无棉塑料盖封口，牛皮纸包扎瓶口。高压灭菌后接表3不同原种（栽培种）培养基灰树花菌丝生长情况编号菌丝生长速度（mm/d）菌丝生长势菌丝颜色配方1浓密配方22.98浓密配方33.10浓密配方43.04浓密配方53.08浓密配方62.21较浓密配方72.65较浓密表4不同培养温度灰树花菌种生长时间菌种类别培养温度(℃)菌丝生长速度（mm/d）生长时间菌丝生长势母种23±13.01浓密25±13.80浓密27±13.65较浓密原种23±12.6340浓密25±135浓密27±13.0236较浓密栽培种23±12.5442浓密25±13.1036浓密27±13.0937较浓密从表4可以看出，灰树花母种、原种、栽培种在温度25℃±1℃条件下，菌按照《灰树花菌种生产技术规程》对灰树花配方、质量要求等进行规范，可以使灰树花菌种的优证，从根本上提高灰树花生产的产量和质量，增加7表5非标准菌种和标准菌种的销售价格对比菌种类别非标准菌种（元）标准菌种（元）增幅（%）母种203050原种825栽培种5620表6不同液体培养基灰树花菌丝生长情况编号生长时间（h）菌丝量（湿重）g/L配方196配方296配方396配方496配方59697表7不同装液量灰树花菌丝生长情况菌种类别装液量（%）生长时间（h）菌丝量（湿重mg/mL）4055摇瓶5075菌种607048液体菌种50%9660%96870%9692从表7可以看出，摇瓶菌种在装液量60%时，菌丝量最高，湿重量为80mg/mL，其次是50%；液体菌种装液量60%时，菌丝量最高，湿重量为表8摇床不同振荡频率灰树花菌丝生长情况菌种类别振荡频率（r/min）生长时间（h）菌丝量（湿重mg/mL）65摇瓶菌种21053表9不同接种量灰树花菌丝生长情况菌种类别接种量（%）生长时间（h）菌丝量（湿重mg/mL）液体菌种5%96979696从表9可以看出，液体菌种接种量10%时，菌丝量最高，湿重量为表10不同通气量灰树花菌丝生长情况菌种类别通气量生长时间菌丝量（湿重mg/mL）菌球形状液体菌种96近球状，大小不均匀96球状、均匀96球状、均匀96球状、均匀9690近球状或丝状，较均匀表11不同培养时间灰树花菌丝生长情况菌种生长时间菌丝量菌丝类别（d/h）（湿重mg/mL）生长情况9458球状、较均匀、较紧密摇瓶579球状、均匀、紧密菌种6球状、均匀、紧密7球状、均匀、紧密872球状、较均匀、较疏松液体菌种4876球状、较均匀、较紧密72球状、均匀、紧密球状、均匀、紧密96球状、均匀、紧密98球状、较均匀、较疏松从表11可以看出，摇瓶菌种培养6d时，菌丝生物量最大，湿重量为86mg/mL，菌球球状、均匀，且质地紧密；其次是培养7d和5d时。液体菌种培养84h时菌丝生物量最大，湿重量为133mg/mL，菌球球状、均匀，且质地紧按照《灰树花菌种生产技术规程》生产灰树花固体菌种和液体，菌种产量和质量得到了大幅提升，扩大了生产规模，提高了经济效益；菌种生产污染率得到了控制，降低了灰树花生产风险，保护了广大同时，项目组根据试验结果，并对国内相关研究成果进行系统整理，积极借鉴国内先进标准，在所获资料和数据的基础上，反复斟酌，编制了《灰树花菌种生产技术规程》草案，草案由专家进行逐条讨论、修改完善形成标准征求场地选择应符合NY/T528；环境空气质量应符合GB3095；水质应符合2.2.1厂房内应设有原材料库、配料室、灭菌室、无菌接种室、恒温培养室、发酵罐培养室、检验室等，按照液体菌种生产工艺流程合理布局，无菌区与有菌2.2.2厂房地面、墙壁和天花板应能防水、防腐蚀、防渗漏、防滑，易清洗，易消毒，地面应有1.0%~1.5%的排水坡度和良好的排水系统。门窗应设置防蚊蝇2.3.2.1高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、恒温回旋式振荡器、恒温培养箱、液体菌种培养器、液体菌种接种器、空气压缩机、空气过滤器、冰箱、显微镜、磅2.3.2.2灭菌室、无菌接种室、恒温培养室、液体菌种培养室、检验室均应具备使用种性清楚，高产、优质、抗逆性强、商品性能良好的品种。菌种生产30d~40d，栽培种培养35d~45d，当菌丝长满瓶（袋即可用于栽培种或栽培恒温25℃±1℃遮光静置培养24h，以振荡频率150r/min~180r/min，继续各级菌种都应留样备查，母种每个批号3支~5支，原种、栽培种5瓶菌液形态：菌液稍粘稠，有大量球状、絮状菌丝体悬浮、分布均匀、不上显微镜下菌丝形态：灰树花菌种液体培养特有的球状和絮状菌丝体大量分摇瓶菌种使用时取样30mL~40mL，发酵罐实消后的空白培养基取样30mL~40mL，放罐前48h从发酵罐中取样30mL~40mL，发酵终止后取样菌种和液体菌种生产过程中的生产人员、生产场地、生产厂房、设施设备、菌种选择、生产技术和质量控制等各个环节，极大程度的提高我省灰树花菌种生产技术的标准化水平，为灰树花栽培奠定可靠的菌种质量保证，从而提高栽培成功率和产质量，增加生