GB/T 45101-2024动物炭疽诊断技术

ICS11220

CCSB.41

中华人民共和国国家标准

GB/T45101—2024

动物炭疽诊断技术

Diagnostictechniquesforanimalanthrax

2024-12-31发布2025-07-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T45101—2024

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

缩略语

4……………………1

生物安全措施

5……………1

临床诊断

6…………………2

流行特点

6.1……………2

临床症状

6.2……………2

病理变化

6.3……………2

结果判定

6.4……………3

样品的采集保存运输和处理

7、、…………3

样品的采集

7.1…………………………3

样品的保存与运输

7.2…………………3

样品的处理

7.3…………………………3

实验室诊断

8………………4

染色镜检

8.1……………4

分离与鉴定

8.2…………………………5

噬菌体裂解试验和青霉素抑制试验

8.3γ……………6

8.4PCR…………………6

8.5Real-timePCR………………………8

环状沉淀试验试验

8.6(Ascoli)………………………9

综合判定

9…………………10

附录规范性试剂的配制

A()……………11

草酸铵结晶紫染色液

A.1……………11

革兰氏碘液

A.2………………………11

沙黄复染液

A.3………………………11

碱性美蓝染色液

A.4…………………11

马或羊血琼脂平板

A.55%~7%……………………11

琼脂平板

A.6PLET……………………11

普通营养肉汤

A.7……………………11

普通营养琼脂平板

A.8………………11

Ⅰ

GB/T45101—2024

碳酸氢钠琼脂平板

A.90.7%…………11

电泳缓冲液

A.1050×TAE……………12

琼脂糖凝胶

A.112%…………………12

苯酚生理盐水

A.120.5%………………12

附录资料性核酸检测用引物探针序列信息及扩增结果图

B()、……13

炭疽杆菌引物

B.1PCR………………13

炭疽杆菌扩增产物电泳图

B.2PCR…………………13

引物和探针

B.3Real-timePCR………………………13

炭疽杆菌基因实时荧光扩增曲线图

B.4PAPCR…………………14

炭疽杆菌基因实时荧光扩增曲线图

B.5CAPCR…………………14

附录资料性炭疽杆菌阳性对照重组质粒的目的基因序列

C()PCR………………15

炭疽杆菌保护性抗原基因重组质粒参考序列

C.1(PA)……………15

炭疽杆菌荚膜基因重组质粒参考序列

C.2(CA)……………………15

附录资料性环状沉淀试验结果图

D()…………………16

参考文献

……………………17

Ⅱ

GB/T45101—2024

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由中华人民共和国农业农村部提出

。

本文件由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本文件起草单位中国农业科学院北京畜牧兽医研究所军事科学院军事医学研究院军事兽医研究

:、

所中国兽医药品监察所北京市动物疫病预防控制中心

、、。

本文件主要起草人丁家波秦彤祝令伟蒋卉郭学军张莹辉范学政彭小薇冯宇王林

:、、、、、、、、、、

程汝佳

。

Ⅲ

GB/T45101—2024

引言

炭疽是由炭疽芽孢杆菌Bacillusanthracis引起的一种人兽共患急性热性败血性传

(Anthrax)()、、

染病广泛分布于世界各地该病主要发生于畜间以牛羊马等草食动物最为易感杂食动物次之人

,。,、、,,

主要通过接触患炭疽的动物或污染的动物制品环境感染而患病动物感染炭疽主要分为最急性型急

、。、

性型亚急性型和慢性型的临床类型各类型病死率均较高危害严重人畜健康世界动物卫生组织

、,,。

将其列为必须报告的动物疫病我国将其列为二类动物疫病

(WOAH),。

本文件的制定参考了陆生动物诊断试验和疫苗手册年版章炭疽诊断技

WOAH《》(2023)3.1.1

术并结合了我国相关技术研究新成果

,。

Ⅳ

GB/T45101—2024

动物炭疽诊断技术

1范围

本文件描述了动物炭疽的临床诊断染色镜检分离与鉴定噬菌体裂解试验青霉素抑制试验

、、、γ、、

环状沉淀试验等实验室诊断方法

PCR、Real-timePCR、。

本文件适用于动物炭疽的诊断检测检疫监测和流行病学调查

、、、。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

,,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

实验室生物安全通用要求

GB19489

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义

。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

值循环阈值

Ct:(CycleThreshold)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(Diethypyrocarbonate)

脱氧核糖核酸

DNA:(DeoxyribonucleicAcid)

乙二胺四乙酸

EDTA:(EthyleneDiamineTetraaceticAcid)