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文档简介
1伴侣动物A型流感病毒主动监测技术要求集、样本库建立与管理质量、控制及结果分析的基本本标准适用于伴侣动物中A型流感病毒的诊断、检测GB/T42066-2022急性病毒性感染呼吸道选择合适规格拭子,将拭子头完全伸入采样对象咽部,拭子24缩略语VTM:病毒载液(VirusTranRNA:核糖核酸(RibonucleicAcPCR:聚合酶链式反应(PolymerasecDNA:互补脱氧核糖核酸(complementaryCt值:各反应管内荧光信号达到基线值时所经历的5.1实时监测国内伴侣动物A型流感病毒活动水平和流行趋势;5.2实时追踪A型流感病毒变异,及时发现新型流感病毒,并做出预警;5.3为伴侣动物流感疫情和动物源新型流感病毒向人类——该区域处于候鸟栖息地或候鸟迁徙路线;——该区域伴侣动物饲养密度或诊疗密度较大。6.2.1应监测因呼吸道症状于宠物医院就诊病例和全部住院监测,其它季节每两个月对监测点所有伴侣动物进和采样日期,填写“监测信息表”(见附录C)。确保监测信息表与监测对象一一对应3于各监测点采集符合6.2要求的伴侣动物咽拭子,若采样对象有明显呼吸道症状则加采鼻拭子(体型较小无法采集鼻拭子的动物可蘸取鼻涕或不采集)。样本采集应使用无菌拭子,拭子采集后装入含况填写“监测信息表”。的cDNA,阴性对照使用RNaseFreeWater。实时荧光PCR49结果报告5A.1.2取出玻璃瓶,倒出去核酸试剂和去核酸酶试剂后用DEPC水洗三次,高压灭菌A.1.3配置环境应包含生物安全柜或超净台,使用去核酸试剂和去核酸酶试剂擦拭后再用7.5试剂浸泡30min后使用DEPC水洗净)分液器经高压灭菌的玻璃瓶置于其中,紫外照射1h。6将新合成的引物瞬时离心后依照说明书用RNaseFreeWater溶解为100μM的储存液。将新合成的探针瞬时离心后,依照说明书用RNaseFreeWater溶解为100μM的储存液将配制好的正向引物工作液、反向引物工作液和探针工作液按照体积比1:1:1混合,可选用商品化的“一步法”实时荧光定量PCR试剂盒说明书配制5'-TATTCGTCTCAGGGAGCAAAAG5'-ATATCGTCTCGTATTAGTAGAAACAAGGGTGNA正向引物5'-TATTCCTCTCACCCAGCAAANA反向引物5'-ATATCCTCTCCTATTAGTAGAAACAAGGATTTT将新合成的引物瞬时离心后依照说明书用RNaseFreeWater溶解为100μM的储存液。7将新合成的探针瞬时离心后,依照说明书用RNaseFreeWater溶解为100μM的储存液将配制好的正向引物工作液、反向引物工作液和探
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