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进出口纺织品生物安全检验方法第10部分：乙型溶血性链球菌10XPCR缓冲液(5,10)dNTP混合液(10mmol/L)(5.11)上游引物(10μmol/L(5.12)下游引物(10μmol/L)(5.12)探针(10pmol/L)(5,12)agDNA聚合酶CSU/pL)(5,13)生：上、下游引物终浓度为04pmol/L探针终浓度为0.4应符合SN/T4656.8的规定。SN/T4656.10—2(规范性)培养基和试剂A.1培养基制备及质量保证按SN/T1538.1和SN/T1538.2制备培养基并进行性能测试，如使用等效商品化脱水合成培养基，使用前对其进行验收并按其说明书使用。A.2改良胰蛋白胨大豆肉汤(mTSB)A.2.1胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)胰蛋白胨大豆蛋白胨氯化钠磷酸氢二钾(无水)葡萄糖蒸馏水将A.2.1.1中各成分融于燕馏水中，加热溶解，调节pH至7.3±0.2,121℃高压灭菌15min。备用。A.2.2抗生素溶液A.2.2.1多黏菌素溶液称取10mg多黏菌素B置于10mL灭菌蒸馏水中，振摇混匀，充分溶解后过滤除菌。A.2.2.2萘啶酮酸钠溶液称取10mg茶啶酮酸置于10mL.0.05mol/L.氢氧化钠溶液中，振摇混匀，充分溶解后过滤除菌。A.2.3完全培养基胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)多黏菌素溶液萘啶酮酸钠溶液无菌条件下，将A.2.3.1中各成分进行混合，充分混匀，分装备用。A.3哥伦比亚CNA血琼脂胰酪蛋白胨动物组织蛋白消化液醉母提取物牛肉提取物氧化钠多黏菌素茶啶酸蒸馏水将A.3.1中各成分溶于蒸馏水中，加热溶解，调节pH至7.3±0.2.121℃高压灭菌15min。待冷却至50℃左右时加50mL无菌脱纤维绵羊血，摇匀后倾倒于平板上A.4哥伦比亚血琼脂A.4.1基础培养基动物组织酶解物氯化钠蒸馏水将基础培养基成分溶解于燕馏水中，加热溶解，121℃高压灭菌15min.A.4.2无菌脱纤维绵羊血无菌操作条件下，将绵羊血加入盛有灭菌玻璃珠的容器中，振摇10min,静置后除去附有血纤维的玻璃珠即可。A.4.3完全培养基基础培养基无菌脱纤维绵羊血当基础培养基的温度为45℃左右时，无菌加入绵羊血，混匀。调节pH至7.2±0.2。倾注15mL于无菌平皿中，静置至培养基凝固。使用前需预先干燥平板。预先制备的平板未干燥时在室温放置不应超过4h,或在4℃冷藏不应超过7d。A.5胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)胰蛋白胨大豆蛋白胨氧化钠磷酸氢二钾(无水)葡萄糖蒸馏水将A.6.1中各成分溶于燕馏水中，加热溶解，调节pH至7.3±0.2.121℃高压灭菌15min,分装备用。A.6革兰氏染色液A.6.1结品紫染色液结晶紫草酸铵水溶液(10g/L)将结品紫溶于乙醇[c(CH₂OH)-95%]中，然后与草酸铵水溶液混合。A.6.2革兰氏碘液碘片碘化钾蒸馏水将碘和碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许。

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