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文档简介

中国兽医协会发布I1猫细小病毒实时荧光RAA检测方法NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范4缩略语Ct值:每个反应管内的荧光信号量达到设定的阈值所经历的循环DNA:脱氧核糖核酸(DeoxyribonucleicaciFPV:猫细小病毒(Felineparvovirus)PBS:磷酸盐缓冲盐水(PhosphatebufferedsRAA:重组酶介导的核酸扩增(Recombinase-aidednucleicacRNA:核糖核苷酸(Ribonucleicac结合后,核酸外切酶Ⅲ(ExonucleaseⅢ,ExoⅢ)能够识别并切除THF残基,并解除3’端阻断,荧光2):三磷酸腺苷6mmol/L,三(羟甲基)氨基甲烷(pH7.9)100mmol/L,乙酸3非抗凝真空采血管、注射器、无菌植绒拭子、5mL灭菌离心管、灭菌剪刀、组下可以稳定保存3个月,-70℃及以下可长期保存,应避免反复冻低温保存进行运输,并在规定温度下的保存期内送达实细胞培养上清液8000r/min离心5min41个检测反应的加入量(μL)注:在试剂配制区进行。先将荧光RAA反应混管中,最后将乙酸镁加在反应单元管盖上,盖上盖子,短暂离心后进行检测。每次进行荧性、阴性及空白对照。阳性对照应为阳性质1检测结果30<Ct值≤35,且出现典型的扩增曲线,判定为仍然Ct值≤35,且为典型的扩增曲线,则判定为5CT[BHQ1-dT]AAACTAACTAACTTT(C3-Spacer6B.1阳性对照质粒序列(FPV-BJ04株NS1基因序列,GenBan5-tcaatcaaatgtactttgcgggacttggttagtaaaagagtaacatcacctgaagactggatgatgttacaaccagatagttatattgaaatgaccaggaggtgaaaatcttttaaaaaatacacttgaaatttgtactttgactttagcaagaacaaaaacagcatttgaattaatacttgaaaaagcaaataatactaaactaactaactttgatcttgcaaattctagaacatgtcaaatttttagaatgcacggatggaattggattaaagtttgtcacgctatagcatgtgttttaaacaaggtggtaaaagaaatacagttctttttcatggaccagcaagtacaggaaaatctattattgctcaagccatagcacaagctgtggg重组菌,提取重组质粒进行PCR检测和测序分析,鉴定为重组阳利用超微量分光光

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