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文档简介

PAGE6-试验操作及试验结果[基础对点]学问点一制备牛肉膏蛋白胨固体培育基1.在培育基的配制过程中,详细有如下步骤,其正确依次为()①溶化②调pH③加棉塞④包扎⑤分装⑥称量A.①②⑥⑤③④B.⑥①②⑤③④C.⑥①②⑤④③D.①②⑤④⑥③答案B解析上述步骤中,培育基的配制依次为称量→溶化→调pH→分装→加棉塞→包扎,B正确。2.下列有关倒平板操作的叙述,错误的是()A.将灭过菌的培育皿放在火焰旁的桌面上B.使打开的锥形瓶瓶口快速通过火焰C.将培育皿打开,培育皿盖倒放在桌面上D.等待平板冷却凝固后须要倒过来放置答案C解析整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵,因此灭过菌的培育皿应放在火焰旁,A正确;打开的锥形瓶瓶口应快速通过火焰,B正确;培育皿应打开一条稍大于瓶口的缝隙,而不能将培育皿盖完全打开,C错误;平板冷却凝固后须要倒过来放置,D正确。3.下列关于制备牛肉膏蛋白胨培育基的叙述,错误的是()A.培育基应先调pH再进行灭菌B.培育基应先灭菌再分装到培育皿C.熔化琼脂时要不断用玻璃棒搅拌D.运用高压蒸汽灭菌锅时干脆将灭菌锅密封加热答案D解析把灭菌锅内的水加热煮沸,将其中原有的冷空气彻底排出后,将锅密闭,接着加热使锅内气压逐步上升。学问点二纯化大肠杆菌4.下列有关平板划线接种法的操作错误的是()A.将接种环放在火焰上灼烧B.将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液C.沾取菌液和划线要在火焰旁进行D.接种环划线要将最终一区的划线与第一区的划线相连答案D解析为了避开杂菌污染,沾取菌液和划线要在火焰旁进行,C正确;每次划线之前都需灼烧灭菌,划线操作结束仍需灼烧接种环,A正确;灼烧接种环之后,要冷却后才能伸入菌液,以免温度太高,杀死菌种,B正确;在平板划线时不要将最终一区的划线与第一区相连,D错误。5.如图为纯化大肠杆菌的一个操作环节,下列相关叙述中,错误的是()A.该操作步骤是接种,方法是平板划线法B.除第一次划线外,以后的每一次划线的起点是上一次划线的末端C.图中细菌密度最小的是5处D.每次划线前要用酒精灯灼烧接种环,接着进行下次划线答案D解析每次划线前都要灼烧接种环灭菌,然后等其冷却后进行下次划线,D错误。6.稀释涂布平板法是微生物培育中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是()A.操作中须要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B.需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培育基表面C.不同浓度的菌液均可在培育基表面形成单个菌落D.操作过程中对培育基和涂布器等均需进行严格灭菌处理答案C解析若菌液浓度过大,形成的菌落连在一起,得不到单个的菌落,C错误。7.下图是采纳纯化微生物培育的两种接种方法接种后培育的效果图,据图分析不正确的是()A.获得图A效果的接种方法是稀释涂布平板法B.获得图B效果的接种方法是平板划线法C.若在纯化土壤细菌时菌液浓度过高,培育基上的菌落可能会连成一片D.在接种前要对培育基进行消毒处理答案D解析在接种前要对培育基进行高压蒸汽灭菌处理,D错误。8.将接种后的培育基和一个未接种的培育基都放入37℃恒温箱的目的是()A.对比视察培育基有没有被微生物利用B.对比分析培育基是否被杂菌污染C.没必要放入未接种的培育基D.为了下次接种时再运用答案B解析对未接种的培育基进行培育,起到比照作用,可确定培育基是否被杂菌污染,B正确。9.利用稀释涂布平板法纯化的大肠杆菌,经培育后发觉培育基上出现了多种菌落,不行能的缘由是()A.培育基制备过程中被杂菌污染B.接种过程中,无菌操作不符合要求C.系列稀释时,无菌操作不符合要求D.大肠杆菌的种类不同答案D解析大肠杆菌培育基中出现了多种菌落,说明污染了杂菌,杂菌可能来自培育基,也可能是因为操作过程中无菌操作不符合要求,A、B、C正确;大肠杆菌就是一种类型的细菌,因此不会导致培育基上出现多种菌落,D错误。学问点三菌种保藏10.为了保持菌种的纯净须要进行菌种的保藏,下列有关叙述不正确的是()A.对于频繁运用的菌种,可以采纳临时保藏的方法B.临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培育基上C.临时保藏菌种简单被污染或产生变异D.对于须要长期保存的菌种,可以采纳低温4℃保藏的方法答案D解析低温4℃保藏属于临时保藏的方法,而对于须要长期保存的菌种,需放在-20℃的冷冻箱中保存,D错误。[实力提升]11.做“微生物的分别与培育”试验时,下列叙述正确的是()A.高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培育基溅到皿盖上C.为了防止污染,接种环经火焰后应趁热快速挑取菌落D.用记号笔标记培育皿中菌落时,应标记在皿底上答案D解析高压灭菌加热结束,等待压力表指针回到零后,才能开启锅盖,不能打开放气阀使压力表指针回到零,A错误;倒平板过程中培育皿的皿盖打开一个稍大于瓶口的缝隙即可,B错误;接种环火焰上灼烧后,待冷却后才可以快速挑取菌落,C错误;用记号笔标记培育皿中菌落时,应标记在皿底上,D正确。12.下图是试验室运用某种接种方法在培育基上培育某种微生物的结果,相关说法错误的是()A.该图最可能是用稀释涂布平板法进行接种的B.在操作时,为防止杂菌污染,需进行严格的消毒和灭菌C.恒温培育箱中培育时须要将平板倒置D.该接种方法常用于微生物的分别纯化答案A解析培育基上微生物的分布有疏有密,应为平板划线法接种,该接种方法常用于微生物的分别纯化,A错误,D正确;在操作时,为防止杂菌污染,应对培育基和接种针等进行灭菌,对操作空间、衣着和手进行消毒,B正确;恒温培育箱中培育时须要将平板倒置,防止冷凝水滴在培育基上,C正确。13.科学家发觉家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白,这种蛋白质具有极强的抗菌实力,受到探讨者重视。(1)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白质的抗菌特性。抗菌试验中所用培育基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长供应________和________。(2)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培育基中接种等量菌液。培育肯定时间后,比较两种培育基中菌落的________,确定该蛋白质的抗菌效果。(3)细菌培育常用的接种方法有________和________________。试验结束后,对运用过的培育基应进行________处理。答案(1)碳源氮源(2)数量和大小(3)平板划线法稀释涂布平板法灭菌解析(1)牛肉膏和蛋白胨都是自然培育基成分,含有丰富的蛋白质、糖类等养分成分,可以为微生物的生长供应碳源和氮源以及生长因子。(2)通过对比加入和未加入该抗菌蛋白的培育基中细菌菌落的数量和大小,确定该蛋白质的抗菌效果。(3)在培育细菌时,往往采纳平板划线法和稀释涂布平板法进行接种;操作过程中用完的培育基都要进行灭菌处理,以防止污染环境和对人造成感染。14.下表是培育某微生物的培育基的配方,请回答下列问题:试剂牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂加水定容至用量5g10g5g20g1000mL(1)培育基的类型许多,但培育基中一般都含有水、碳源、________和无机盐。上述培育基配方中能充当碳源的成分是____________________。培育基配制完成以后,一般还要调整pH并对培育基进行________处理。(2)微生物在生长过程中对各种成分的须要量不同,配制培育基时各成分要有合适的________。在烧杯中加入琼脂加热时要不停地________,防止______________________。(3)将配制好的培育基分装到试管中,加棉塞后,若干个试管一捆,包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入________________中灭菌,压力为________kPa,温度为________,时间为________。灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力自然降到0时,将试管取出。假如棉塞上沾有培育基,此试管应________。(4)运用高压蒸汽灭菌锅时应留意,先向锅内倒入________。把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后,将锅密闭。(5)从一支试管向另一支试管接种时应留意,接种环要在酒精灯________(填“内”或“外”)焰灭菌,并且待接种环________后沾取菌种,试管口不能离开酒精灯火焰旁边。将接种的试管在适温下培育,长成菌落后放入________℃冰箱中保藏。答案(1)氮源蛋白胨和牛肉膏灭菌(2)比例搅拌琼脂糊底引起烧杯裂开(3)高压蒸汽灭菌锅100121℃15~30min废弃(4)适量水(5)外冷却4解析(1)培育基中一般都含有水、无机盐、碳源、氮源。培育基配制完成后要调pH和灭菌。牛肉膏、蛋白胨中含碳元素,可作为有机碳源。(2)在配制培育基时养分要协调,按所培育微生物对各种成分的需求确定其成分及比例;在加入琼脂后,要不断搅拌,防止琼脂糊底而导致烧杯裂开。(3)培育基的灭菌应用高压蒸汽灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃条件下,灭菌15~30min。若棉塞上沾有培育基,易被杂菌污染,应废弃。(4)高压蒸汽灭菌锅操作步骤为先向锅内倒入水,加热煮沸,将冷空气排出,将锅密闭,接着加热使锅内气压和温度上升到须要的程度。(5)酒精灯外焰温度高,灭菌效果好。灼烧后待冷却再沾取菌种,否则会烫死菌种造成试验失败。15.下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法,请回答相关问题:(1)图甲是利用________法进行微生物接种,图乙是利用________________法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是________和________;对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。(2)平板划线时,为保证微生物的数目随划线次数的增加而逐步削减,每次划线都要从__________________起先,平板划线结束后,最终一次划的线不能与第一次划的线________。(3)接种操作为什么肯定要在火焰旁边进行?________________。(4)下图是接种后培育的效果图解,其接种方法是________(填“图甲”或“图乙”)。(5)假设用图乙所示方法接种培育结束后,发觉培育基上菌落连成一片,可能的缘由是什么?____________________________________________。答案(1)平板划线稀释涂布平板接种环涂布器灼烧灭菌(2)上一次划线的末端相连(或相接、相交、交叉等)(3)火焰旁边存在着无菌区域(4

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