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文档简介

ICS01.120

CCSA00

DB23

黑龙江省地方标准

DB23/T3333-2022

龙牙楤木培育技术规程

(草案)

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

黑龙江省市场监督管理局发布

DB23/TXXXX-XXXX

龙牙楤木培育技术规程

1范围

本标准规定了龙牙楤木(Araliaelata(Miq.)Seem.)种子采集与调制、实生苗木培育、组培育苗、

造林栽培技术、采收技术、良种选育、提取加工工艺和档案管理。

本标准适用于龙牙楤木的培育。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有修改单)适用于本文件。

GB2772林木种子检验规程

GB3095环境空气质量标准

GB5084农田灌溉水质标准

GB6000主要造林树种苗木质量分级

GB/T6001育苗技术规程

GB15618土壤环境质量标准

GB18406.1农产品安全质量无公害蔬菜安全要求

NY/T496肥料合理使用准则

NY/T1276农药安全使用规范

LY/T1882林木组织培养技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1苗木种类

1

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按繁殖材料和培育方法划分的苗木群体,如播种苗、移植苗等。

3.2幼苗移植

未满一年生的苗木,经间苗后再进行移植的方法。

3.3苗龄

苗木的年龄。从播种开始到出圃时苗木的实际年龄。以经历1个年生长周期作为1个苗龄单位。

示例:

a)1-0表示1年生播种苗;

b)1-1表示2年生移植苗,播种一年,移植后继续培育一年。

4采种与调制技术

4.1采种时间

九月中旬至十月上旬,果实成熟后至脱落前进行。

4.2种子调制方法

4.2.1堆沤淘洗:堆沤后及时搓种、淘洗。

4.2.2净种方法:先风选,后筛选。

4.3种子质量标准

千粒重≥1.2g、净度≥90%、发芽率≥40%。种子检验方法应按照GB2772执行。

4.4种子贮藏

采用低温贮藏,温度范围在(2~5)℃,贮藏期不宜超过二年。

5实生苗木培育技术

5.1苗圃建立

5.1.1苗圃应具备的条件

5.1.1.1地势平坦,排水良好。水质应符合GB5084的规定。

5.1.1.2土层厚度≥50cm,耕作层≥25cm,pH值为(5.0~7.0),质地为沙壤土或壤土。土壤环境质量

应符合GB15618的规定。

5.1.1.3栽培环境应符合GB3095的规定。同时忌风口、霜穴、雹带等不良气象条件。

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5.1.2苗圃的设施

5.1.2.1设有生产资料储藏室、给排水设施、圃道、苗木窖或假植场。

5.1.2.2育苗区划分为播种区、移植区和休闲区等。

5.1.2.3准备作业设计应依据苗圃现状及年度生产计划,进行面积分配与区划;确定种子处理方法、

播种量、播种密度及田间管理、防灾、起苗、越冬管理等技术措施;依照定额进行劳力、物药料、水电

费用及财务成本概算。

5.2种子预处理

5.2.1育苗宜选用品质纯正一致、适宜种源的种子。种子质量应符合4.3的要求。

5.2.2购买的种子应有主管部门签发的种子质量检验合格证和植物检疫证书。

5.2.3种子处理之前,应复查种子的净度、千粒重和生活力。种子检验方法应按照GB2772规定执行。

5.2.4种子处理前进行留样种的抽取,抽样量为1‰,采用低温(2~5)℃贮藏,保留一年。样种袋内

放标签,注明树种、数量、种源、种子处理方法、播种时间和播种地点。

5.2.5种子应进行消毒处理。

5.2.6种子处理时间和播种日期要紧密衔接。

5.2.7播种前种子处理程序。

净种→种子初始检斤→留种样→种子播种品质检验→消毒处理→催芽处理→播前检验→种子播前

检斤→分配→播种。

5.3催芽处理

5.3.1拌沙:选净沙,过20目筛,经过消毒,种子与沙子的比例体积比1:2,重量比1:3,拌好后手

握成团,松手即散。

5.3.2挖坑:选干燥向阳,便于看管的地块。

5.3.3规格:宽、深为30cm~40cm,长随种量而定。

5.3.4装坑:沙拌种放入坑内,厚20cm~50cm,上盖15cm~20cm细土,土上覆一层草5cm~6cm,坑

四周围挖好排水沟。

5.3.5时间:由10月经11月至翌年5月初。

5.3.6播种前催芽:4月下旬至5月上旬,根据种子裂口育苗地准备而定。取出拌沙装坑处理的种子,

置于室内15~25℃的变温环境中保湿催芽7~10d,种子裂口率达20%以上时,即可播种。

5.4播种前准备作业

3

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5.4.1苗圃施基肥

5.4.1.1应本着科学施肥的原则,确定施肥的种类和数量。

5.4.1.2宜施用有机肥,不宜或少施无机肥。有机肥经充分腐熟后使用,应符合NY/T496规定。

5.4.1.3基肥施用量:(3×103~5×103)kg/667m2。

5.4.1.4基肥施用方法:采取分期分层方法,也可以一次性施用。基肥施用时应扬均、拌匀。

5.4.2苗圃整地

实行秋翻、秋耙、春作床(垄),或春翻春作床(垄),翻、耙、作床应相结合。翻地时应适当深翻,

不漏耕,不宜将底层冷浆生土翻上来。田间持水量>70%时不宜整地。

5.4.3作床(垄)

5.4.3.1作床前充分碎土,清除残根、石块和拌匀粪肥,作床(垄)应整齐一致。

5.4.3.2作床规格:床面宽110cm,步道宽(60~70)cm。床高(15~20)cm,床长(10~20)m。床内无直

径1.5cm以上土块,搂平后镇压床面。

5.4.3.3作垄规格:垄宽(60~70)cm,垄高(20~25)cm,长同作业区。

5.5播种

5.5.1播种前准备

安装、检修浇水排灌设施,备全备足播种用具。应按照播种面积的要求,备足覆土材料。

5.5.2播种时间

春季播种。宜于5cm地温稳定在≥8℃时播种。

5.5.3播种损耗系数

采用(2.0~2.5)进行计算。

5.5.4播种量

应按照GB6001中6.4所给出的方法进行计算。

5.5.5播种方式

5.5.5.1垄式采用单行或双行育苗。双行间距应为(8~10)cm。

5.5.5.2床式采用条播方式,床面四周各留5cm宽保护带,实际播种床面宽100cm。播幅与行间间距的

宽度比为2:1~3:1,用播种框控制。

5.5.6覆土

5.5.6.1覆土材料:有机肥、腐殖土或草炭粉等。

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5.5.6.2覆土厚度:(0.3~0.5)cm,应以看不见种子为宜。

5.5.6.3播种程序:随播种随镇压,然后覆土,再镇压、覆盖后浇水。土壤湿则宜播种后直接覆土,

随后镇压浇水。

播种程序为:播种→镇压→覆土→镇压→覆盖→浇水

5.6覆盖

播种后,宜用苇帘或稻草盖床面。小苗出至(70~80)%时,在傍晚或阴天撤掉覆盖材料。

5.7田间管理

5.7.1浇水

种子发芽出土与出土后保苗阶段,宜量少次多;在苗木旺盛生长阶段,宜量多次少。土壤湿润层应

超过苗木根系分布层。

5.7.2施肥

5.7.2.1苗木追肥,前期以氮肥为主,中期以磷肥为主,后期以钾肥为主。

5.7.2.2追肥时间应于幼苗出现侧根以后开始,苗木进入速生期不宜追施氮肥。

5.7.2.3喷洒追肥时,应控制肥液浓度,并用清水及时冲洗苗木;土壤施肥时,不应与苗木根系接触,

施肥后及时灌水。根外追肥时,浓度不应超过(0.3~0.5)%。应符合NY/T496的规定。

5.7.3除草与松土

应保持育苗地块的清洁、无杂草。应保持苗圃土壤疏松。除草、松土时宜与清除病苗、死苗、残苗

相结合进行。

5.7.4间苗、补苗、幼苗移植作业

5.7.4.1新播苗密度大于设计密度时,应适时间苗。应间密补稀,间小留大,间劣留优,分布均匀。

5.7.4.2间苗时间与次数:在6月上中旬进行(1~2)次。

5.7.4.3对剩余的优质幼苗,可另置一处进行幼苗移植。密度应比播种苗上调(10~20)%。

5.7.4.4作业应在阴天进行,完成后及时灌水。

5.7.5病虫灾害防治

5.7.5.1防治原则:预防为主,综合防治。优先使用农业防治,人工物理防治、生物防治。必须使用化

学防治时,农药使用应符合NY/T1276的规定。

5.7.5.2立枯病用波尔多液(1:1:100或1:1:125水溶液)、敌克松(1:1000水溶液)、多菌灵(1:800水溶

液)等进行土壤处理或发病初期灌根防治。

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5.7.5.3出现蛴螬、蝼蛄、地老虎等地下害虫危害苗木,应进行综合防治,以人工诱杀和捕杀为主。

5.8苗木调查

5.8.1物候观测与灾害调查

5.8.1.1对苗木物候进行观测时应设置随机样方,样方规格为(20×20)cm,样方应不少于三十个。应

如实调查记录。

5.8.1.2发生的灾害应如实调查和记载。

5.8.2质量与产量调查

5.8.2.1调查时间在苗木停止生长后、落叶前进行。

5.8.2.2调查内容应包括苗木生长质量和苗木产量状况。可靠性指标和精度均应达到95%。

5.9起苗、分级、包装、运输和贮藏

5.9.1起苗

5.9.1.1起苗前应做好准备工作。选好假植场地,起苗时间应在结冻前结束。苗木损失率≤3%。

5.9.1.2起苗深度应≥20cm以上。

5.9.1.3起苗时应做到随起、随捡、随分级和随假植。苗木拣出后宜用湿草帘覆盖。

5.9.1.4起苗分级时应按数扎捆,25株或30株为一捆。

5.9.1.5起苗结束后整理现场,应将扎成捆的苗木用保湿剂蘸根后,归入苗木窖或固定假植场。用于

造林的苗木,宜适当剪根。

5.9.2苗木分级

苗木分级应参照GB6000的要求进行,苗木出圃时,应有专人负责管理,其质量应符合下表中规定

的标准。

龙牙楤木苗木质量标准

质量指标产量指标

Ⅰ级Ⅱ级

育苗Ⅰ、Ⅱ

苗龄地径苗高主根长侧根

方式地径苗高株m/株m2万株/hm2级苗率

mmcmcm数条

mmcm%

>>

垄式5.0154.0~5.012~1518720~2530.0~37.595

1-0

床式4.5154.0~4.512~1520650~7027.0~37.890

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5.9.3包装运输

5.9.3.1苗木包装应用稻草帘或苗木箱包装,苗根向内,互相重叠,内加含水填充物。

5.9.3.2每个包装应附以标签标明:

a)树种;

b)苗木种类;

c)苗龄;

d)苗木等级;

e)苗木数量;

f)起苗日期;

g)苗木质量检验证编号;

h)批号;

i)检验人;

j)检验日期;

k)植物检疫证书编号;

l)种子生产许可证或经营许可证编号;

m)产苗单位。

5.9.3.3运输时应加盖苫布,保持苗根湿润。

5.9.3.4运到目的地后,应及时进行假植或造林。

5.9.4苗木贮藏

5.9.4.1假植苗木应挖沟假植,沟深(25~30)cm,苗木倾斜30°,单行摆放在沟内,培土超过地径(3~

5)cm踏实,浇水。应架设荫棚或用草帘覆盖。

5.9.4.2留圃越冬的苗木,在秋起后放入窖藏或露天假植。

5.9.4.3经过冬天贮藏的苗木,应测定生活力,合格后用于栽培。

6组培育苗

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6.1培养基制备

6.1.1培养基配制、灭菌及保存栽培基质

按照LY/T1882的规定执行。

6.1.2培养基选择

胚性愈伤组织诱导培养基:MS+20g•L-1蔗糖+5.5g•L-1琼脂+2,4-D2.0g•L-1;体细胞胚继代增殖培养

基:1/2MS+2.0g•L-12,4-D+20g•L-1蔗糖+5.5g•L-1琼脂;体细胞胚成熟和不定芽诱导培养基:1/2MS+3.0g

•L-1IBA+20g•L-1蔗糖+5.5g•L-1琼脂;生根培养基:1/2MS+20g•L-1蔗糖+5.5g/L琼脂。pH值用NaOH或HCL

调至5.8~6.0。琼脂的凝胶强度为1200g·m-3。

6.2无菌体系建立

将幼嫩的龙牙楤木叶片或者叶柄灭菌后接种在诱导培养基上启动培养,待长出愈伤组织后,再继续

进行继代增殖培养。

6.2.1叶片和叶柄选取、采集与预处理

采集龙牙楤木萌动枝条,对其中优树进行标定,水培萌发后,每株树采3-5个茎尖,切下叶片、叶

柄分类放入两瓶灭菌水中浸泡两小时。

6.2.2外植体消毒处理

取龙牙楤木幼嫩的叶片、叶柄用75%酒精消毒30s,冲洗一次后放入1%次氯酸钠溶液消毒10min,

无菌水冲洗3次,在超净台内的无菌培养皿中;叶片切去边缘胚,叶片表面轻划3刀,水平接种于愈伤

组织诱导培养基上;叶柄切去两端,在叶柄表面轻划几刀,水平接种于体细胞胚组织诱导培养基上。每

瓶中接种3~5个外植体。

6.3初代培养

外植体接种到胚性愈伤组织诱导培养上,使伤口贴合于培养基上,4~7天开始长出,表现在伤口周

围出现堆积且松散的色白微透明的组织,出愈率高达90%以上。

6.4继代培养和增殖培养

将愈伤组织培养2周~3周后,用灭菌镊子刮取直径约0.3~0.7cm大小的愈伤组织团,转接种到继代

培养基上,平铺,进行继代培养,每个培养瓶内接种3团,并分布均匀。15d左右继代一次,24±1℃下

暗培养。

6.5成熟体细胞胚的培养

将胚性愈伤组织在成熟体细胞胚诱导培养基培养,得到成熟体细胞胚。表现为胚性愈伤组织由浅白

色变为浅黄色,松散的愈伤组织小堆里出现卵圆形、鱼雷形或肾形颗粒,颗粒大小为1mm左右。

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6.6不定芽的诱导

将成熟的体细胞胚在不定芽诱导培养基中继代培养,就可以得到不定芽。表现为在成熟的体配上出

现两个或以上的绿色叶片。

6.7生根诱导

当增殖培养获得一定数量无菌不定芽后,用灭菌镊子夹取,接入生根培养基上进行生根培养,培养

1周左右可见有根长出,2周左右不定根数量大于3,生根率在100%。

6.8培养条件

培养室内温度24±1℃,湿度40%~50%。胚性愈伤组织诱导、继代及增殖培养过程暗培养。其余过

程,光照强度2000Lx~3000Lx,光周期12h~16h,培养周期2周。所有无菌操作均在超净工作台中

进行。

6.9炼苗

将龙牙楤木再生植株地上部分高于2cm,在自然光下旋开瓶盖即松盖炼苗2天左右,半开瓶盖2天。

具体方法如下:将培养容器的盖子或塞打开,在自然光下进行开瓶练苗,正午光照较强地区要注意采取

措施如用阴蓬或温室避免灼伤小苗。开瓶炼苗可以分阶段进行,即首先松盖(或塞)一两天,然后部分

开盖一两天,最后完全揭去盖。

6.10移栽

取相同体积比为V腐植土:V蛭石铺=1:1的混合基质,铺在多穴插秧盘中,用稀释10倍的MS培养液浇

透。将组培苗用镊子夹出,自来水冲洗干净,避免伤根,栽植于穴盘中,1株/穴。将植入组培苗的插秧

盘放入湿度为70~90%,遮阳网覆盖的大棚里,遮阳率在40%~60%,两侧自然通弱风。有新叶长出即成

活。长至15cm左右可移栽到苗圃或大田中,移栽入大田后,及时浇透水。

6.11棚室

6.11.1结构

竹木或钢管,棚南北向,长20m~40m,宽9m~12m,边沿高1.2m~1.4m,中间高度2m~2.5m。

两头开门,大棚覆无滴膜,加盖1层草帘、1层遮阳网及防风网,用尼龙绳加固,门加防虫网,室内以散

射光为主。

6.11.2棚室管理

温度控制在26℃~28℃,不高于32℃,地面经常喷水。

7造林栽培技术

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7.1造林地选择

7.1.1疏林地选择阴坡,半阴坡,山坡中下腹,土层深厚,土壤肥沃,排水良好,郁闭度,阔叶混交

林,针阔混交林。

7.1.2裸地林间空地,退耕还林地及耕地。

7.1.3土壤水质符合GB5084—92二类标准和GB/T18407.1—2001中的3.2.3的规定。

7.1.4空气质量符合GZB3095—99二级标准和GB/T18407.1—2001中的3.2.3的规定。

7.1.5土壤质量符合GB15618—95二级标准和GB/T18407.1—2001中的3.2.3的规定。

7.2整地

7.2.1疏林地清林杂草灌木丛生郁闭度0.3以下的林地,采用宽带清理非目的灌木,割带4m以上,

保留带3m以内,将割下的灌木堆积带两侧。

7.3整地方法

7.2.2.1暗穴整地疏林地造林,适用于土壤湿润,排水良好的山坡地。先铲除草皮,直径60cm,然后

刨穴,直径50cm,深20cm,打碎土块,拣出杂物,将土回填入穴内。

7.2.2.2明穴整地裸地和退耕地,适用于枯枝落叶少,土壤湿度中等的地类,操作上与暗穴整地相同,

只是将穴内土壤堆于穴外一侧。

7.2.2.3鱼鳞坑整地适用于坡度较大,干旱瘠薄的地块,穴的长边60cm,平行等高线,穴宽40cm,

劈土深20~25cm,外高内低,稍向内倾,呈倒簸萁行。

7.2.2.4揭草皮子整地适用于土壤疏松的有林地,穴面直径60cm,揭除草皮盘结层,露出表土。

7.2.3整地时间穴状、鱼鳞坑整地均于前一年秋进行。春季揭草皮子适用于现整现造。

7.2.4株行距1×1m或1×1.5m

7.4苗木栽植

7.3.1栽植时间4月下旬至5月上旬,顶浆造林为主,土壤解冻深度≥18CM。

7.3.2栽植密度条件好的地块4400—5500株/hm²,一般地块为5500—6600株/m2。

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7.3.3苗木准备一年生出圃的一、二级苗木,无烂根(如有可将腐烂的根段剪掉),枯死的地上茎剪掉,

若不能立即造林,应现场立即成捆临时假植。

7.3.4栽植方法栽苗时应用带水的苗木罐装苗,保持苗根湿润。在穴面中央处栽植,根系舒展、栽正、

扶直、培土、轻提、踏实,上覆2~3cm暄土,至根迹稍高处,一穴一苗。

7.5幼林抚育管理

7.4.1当年抚育栽植当年抚育3次,第一次在栽植后立即进行镐抚,将穴面扩大为60cm直径,同时调

整苗木栽植深度,以原根茎处以上以上覆土厚2~3cm为宜,第2、3次抚育在7月下旬至8月中旬前完

成刀抚,原则不能影响幼苗正常生长发育。

7.4.2第二年抚育栽植第二年以后,以刀抚除草为主,6月末8月初各一次刀抚。

7.4.3后抚育疏林地栽植2~3年后,视林分状况和立地条件,要采取透光抚育,主要清除压抑生长的

非目的树种和影响幼树生长的灌木。抚育强度结合木材生产实行定量与定性相结合的方法,时间在每年

1~11月,3~4年一次。

7.6整形修剪

7.5.1短截促萌栽植第二年早春,树液流动前,在主干三分之一左右处截断,促进地下根茎潜伏芽萌

生出新株。

7.5.2摘心促枝栽植第2~3年后,地上植株健壮,生长高度达1m以上时,早春树液流动前将顶芽掰

掉,促进側芽萌发,长出侧枝。

7.5.3修枝自栽植第三年开始,每年秋季落叶后或早春树液流动前,将株丛内生长细弱,病虫枯死的

植株割下,并清除林外。

7.6排水造林地内严禁长期积水,如有积水现象,要随即排除

7.7病虫鼠害防治

7.7.1病害主要是立枯疫病、白粉病,应避免在排水不良的地块造林,及时抚育加强通风,避免作业

时伤根伤茎,或用烂根烂茎的苗木造林,可采取生物药剂或高效低毒、低残留的化学药剂防治。

7.7.2虫害主要有蚜虫、云斑天牛,危害茎芽,可按常规方法防治。

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7.7.3鼠害的防治主要是棕背鼠、田鼠,啃咬树皮,严重时整株树皮啃光露出树质部,防治方法一是

生物防治,主要保护和利用天敌扑捉,如猫头鹰、黄鼬等;二是药剂防治,初冬落雪前在林内投放毒饵

杀鼠。

7.7.4化学农药使用符合农药管理条例和中药材质量管理规范参照附录B、C。

8采收技术

8.1采收年龄:栽植三年以后

8.2采收要求

8.2.1采收季节:4月下旬至5月上中旬

8.2.2采收标准:芽长5~15cm,叶尚未展开为宜,且无不良性状和病虫害,产品安全质量应符合

GB18406.1的规定

8.2.3采收方法:每一株丛内先确定留下2~3个健壮芽,再用手掰取上部余下的芽,逐年以次采收。

9良种选育

9.1目的:提高单位面积嫩芽产量和质量,培育优良栽培品系。

9.2优良品系标准:抗逆性强,生长健壮,无刺或少刺

9.3选育方法

初选---无性繁殖---建初级无性系测定园---初步筛选---扩繁---建立母本园---复选优良无性系---扩

繁、推广

10提取加工工艺

10.1龙牙楤木多糖复合酶法提取工艺

10.1.1材料与试剂

材料:龙牙楤木为春季新发的嫩芽;

试剂:主要有石油醚、乙醚、95%乙醇、无水乙醇、丙酮、浓硫酸、苯酚、葡萄糖、1,1-二苯基-2-苦

味基肼(DPPH)、硫酸铁、水杨酸、过氧化氢;纤维素酶(1×104U/g)、果胶酶(4.9×103U/g)、

木瓜、蛋白酶(5×105U/g);抗坏血酸,分析纯;纯化水:pH7.0~7.5。

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主要仪器与设备:紫外可见分光光度计:UV-2200型,北京瑞利分析仪器有限公司;数显恒温振荡器:

WHY-2型,常州普天仪器制造有限公司;旋转蒸发仪:R-501型,河南宇科自动化仪器仪表设备有限公

司;循环水真空泵:SHZ-DⅢ型,上海英化仪器设备有限公司;电子天平:ESJ200-4型,沈阳龙腾电子

有限公司。

10.1.2方法

10.1.2.1龙牙楤木预处理:取龙牙楤木嫩芽鲜品于80℃,烘干24h,再于60℃烘干至恒重,粉碎成

粗粉。石油醚超声脱脂1h,过滤,挥干石油醚,干燥粗粉备用。

10.1.2.2多糖提取工艺

干燥龙牙楤木粗粉→复合酶水解→减压浓缩→醇沉→静置过夜→离心得沉淀→有机溶剂

洗涤→挥干有机溶剂→龙牙楤木粗多糖

10.2龙牙楤木总皂苷提取工艺

10.2.1实验材料与设备药品

试验材料为龙牙楤木叶片,由吉林农业大学中药材学院田义新教授鉴定为3年生龙牙楤木。主要设

备为T6新世纪一紫外可见分光光度计,北京普析通用仪器有限公司。齐墩果酸标准品(纯度≥98%),

天津一方科技有限公司;石油醚、无水乙醇、香草醛、冰醋酸、高氯酸、乙酸乙酯均为分析纯。

10.2.2方法

10.2.2.1龙牙楤木总皂苷含量的测定

标准曲线的绘制

称取齐墩果酸标准品2mg,加乙醇溶解定容至10mL,制成浓度为0.2mg/mL的齐墩果酸标准溶液。

吸取齐墩果酸标准溶液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mL,分别加入7支干燥具塞试管中,70℃水

浴挥干乙醇,各加入新配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.2mL、高氯酸0.8mL,于60℃恒温水浴中加热

15min后,取出,流水冷却5min,加乙酸乙酯4mL,摇匀,随行试剂空白,在560nm波长处测定吸光度。

三次平行重复,以三次吸光度的平均值为纵坐标,齐墩果酸标准品含量为横坐标,绘制标准曲线。

10.2.2.2实验材料预处理

取龙牙楤木叶片洗净,60℃烘干、粉碎、过40目筛后,每份样品取1.0g,置于50ml三角瓶中,

加入20ml石油醚超生脱脂1h,挥干石油醚。

10.2.2.3皂苷含量的测定

取脱脂后的样品,加入一定量、一定浓度的乙醇提取液提取,抽滤,并用相应的提取剂定容至50ml,

13

DB23/TXXXX-XXXX

吸取样品溶液50μl,按照标准曲线绘制的方法进行含量测定。

10.2.2.4总皂苷提取率的计算

总皂苷提取率=提取总皂苷质量/龙牙楤木原料的质量×100%

10.2.2.5超声法的最佳提取工艺

料液比1:30、80%乙醇、时间60min,皂苷得率为7.56%;微波法的最佳提取工艺为:料液比1:25、

80%乙醇、时间50s、功率6400w,皂苷得率为7.32%;热回流法的最佳提取工艺为:料液比1:25、时

间2.5h、60%乙醇、温度60℃,皂苷得率为7.19%。

10.3龙牙楤木中总黄酮的提取工艺

10.3.1材料与设备

材料与试剂:龙牙楤木嫩芽,45℃烘干,粉碎过

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