DB42-T 2227.1-2024 食用菌菌种质量检验规范 第1部分：羊肚菌

DB42湖北省市场监督管理局发布 V 2 4 6 8 9 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件实施应用中的疑问，可咨询湖北省农业农村厅，联系电话邮箱邮箱：wangzhuoren@hbaas.cV菌品种的不同，亦便于该文件各部分单独使用。DB42/T2227《食用菌菌种质量检验规范》拟由以下部——第1部分：羊肚菌。本文件规定了羊肚菌菌种签、标志、包装、运输、贮存等。本文件仅适用于梯棱羊肚菌、六妹羊肚菌和七妹羊肚菌等——第2部分：荷叶离褶伞。本文件规定了荷叶离褶伞菌种的质量要求、抽样、检及标签、标志、包装、运输、贮存等。本文件适用于荷——第3部分：斑玉蕈。本文件规定了斑玉蕈菌种的术语和定义、质量要样、判定及标签、标志、包装、运输、贮存等。本文件适用于斑玉蕈菌种的生产、流通和使1食用菌菌种质量检验规范GB/T37671—2019金针菇NY/T528—2010食用菌菌种生产技术规程NY/T1742—2009食用菌菌种通用技术要求GB/T12728—2006、GB/T37671—20193.13.23.33.423.53.63.74.2菌种分类4.3母种均匀，平整，表面允许有少量浅黄色（或黄褐无无4.3.3接种量：接种块大小控制在（3mm～54.3.4母种培养条件和时间：参考附录A中A1培养基的配方，15℃~18℃避光恒温培养，应在54.3.6母种栽培性状：母种需经出菇试验，确证34,4原种无无）～），菌丝长满培养基的时间：采用附录A中规定的配方在15℃~18℃避光恒温培养，菌丝长满4.4.2液体原种（摇瓶液体菌种）培养基装液量：容器的摇床上，温度15℃~18℃,避光培养，菌丝长满培养基的时间为4d～6d。无4无培养基装液量：容器的液体菌种接种量：与培养基投料量的体积比为罐压保持在0.02MPa～0.04MPa之间，温度15℃~18℃,菌丝长满培养基的时间为4d～6d。4.5栽培种无无核4.5.4菌丝长满培养基时间：采用附录A中规定的配方在15℃~18℃避光恒温培养，菌丝长满培养基5.1.1母种按品种、培养条件、接种时间分批编号，原种和栽培种按菌种来源、制种方法和接种时间5.2检验似性达97%以上为相应类别的种类。参考5在ITS序列检测确定相关菌株为栽培羊肚菌相应种类的基础上，参考附录C操作，对测试菌株的DNA产物分别使用羊肚菌交配型特异性引物对Mat1-1-1TF/R、MAT1-2-1TF/R进行PCR扩增，根据扩增条带的//母种：PDA培养基，参考附录A中的配方在15℃~18℃条件下培养，观测菌丝长满斜面所需原种和栽培种:参考附录A中的配方任选其一在15℃~18℃培养，观测菌丝长满培养基所需65.3留样a)产品名称（菌种类别、菌种名称、菌株代号）；a)产品名称（菌种类别、菌种名称、菌株代号）；6.2包装6.2.1母种外包装采用木盒或有足够6.3运输6.3.3气温达26℃以上时，应用2℃~6℃的冷藏车运输。6.4贮存6.4.1母种在3℃±1℃冰箱中贮存，贮存期不超过60d。89待测菌种固体培养基：马铃薯200.0g，葡萄糖20.0g，硫酸镁1.0g，磷酸二氢钾1.0g，酵母膏平板中，冷却，接种，16℃±2℃黑暗培养5d～10）；f)小心弃去上清液，将离心管压在干净的吸水纸上，吸干残留的上清液；TCCTCCGCTTATTGATATGC)对提取的基因组DPCR扩增产物经1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测后,使用DNA纯化回收试剂盒回收600bp大小的片段，与Gal的LB平板上进行蓝白斑筛选，并进行菌落PCR筛选出阳性克隆，阳性克隆送至相关基因测序单位采用通用测序引物（RV-M：GAGCGGATAACAATTTCACACAGG/M13-47：CGCCAGGGTTTTCCCA网站进行比对，待测菌种与数据库中某菌的序列同源性达到97%以上时，判断待ATCATTACCAAGAACCACACAGAAAAGGGCAGCCGAGGGGCCACCAGGGCTAGTAGCTTTACGTTGTTGAACGTCCTGGCCGGACCCGGAGCCGCCCCCATCTAAACCCTCTGCGTACCTGTCCCGCCTTGCTTCCCCCGGCTACCCGCTGGGGGGAGGAACAACAACCTCTTTGTGAACAAGCCGACGTCAGAATCATAACAAAACAAAAAAGTTAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCCCACATCGGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCCCTGGTGGGGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATAAAAACCTCCTCCCCCATCGGGTTTGATTACTATCGTTGGGGGGTTTTGGCCTAATGGCGATTGGCAATTAGTTTCCCAATGTCCTAAATAGACGTAGACCCGCCTCCAGATGCGACAGCACCGAGGCCATCAACCGTGGAGGGATATATAGGCTTGCAGTAAAATGCTCACCTTTCTCCATACGCCGATGGCACACCGGTCGCAGTTGCGGGCGTAAATTGGAGCTTTCAGGACCCTCGTGGCCTAGCATCCACCATACACAATTTGACCTCGGATCAGGTAGGGATACCCGCTGAAC六妹羊肚菌对照标准种ITS序列的GeneBank登录号为OM956369CCTCCCGATGAGGGGGGCCTGCGGAAGGATCATTACCAAGAACCACACAGAAAAGGGCTGCTATAGGGGCCGGCAGGGCCTTTACGTTGTTGAACGTCCTGTTTGGACCCGTTGGCAGCCCCCATCTAAACCCTCTGCGTACCTGTCCCCCCTTGCTTCCCCCGGCACCTCGCTGGGGGGAGGAACAACAACCAAAACTCTTTGTGAACAAACAGACGTCAGAATTACAAAAACAAAAAAAAGTTAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCCCACATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCCCTGGTATTCCGGGGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATAAAAACCTCCTCCCCCTTCGGGTTTGATTACTATCGTTGGGGGGTTTTGGCCTAATGGGATAGCGATTGGCAATTAGTTTCCCAATGTCCTAAATAGACGTAGACCCGCCTCCAGATGCGACAGCACCGAGGCCATCAACCGTGGAGTTATGGGATATATAGGCTTGCAGTAAAATGCTCACCTTTCTCCATACGCCGATGGCACACCGGTCGCAGTTGCGGGCGTAAATTGGAGTCCTCTTCAGGACCCTCGTGGCCTAGCATCCACCATACATAATTGACCTCGGATCAGGTAG。七妹羊肚菌对照标准种ITS序列的GeneBank登录号为JQ618758.1，TGCGGAAGGATCATTACCAAGAACCACACAGAAAAGGGCAGCCGAGGGGCCAACCAGGGCTAGTAGCTTTACGTTGTTGACTGGAACGGACCCGGAGCCGCCCCCATCTAAACACTCTGCGTACCCATCCCACCTTGCTTCCCCCGGCCATCCGCTGGGGGGAGGAACAACAACCAAAACTCTTTGTGAAGAAACAGACGTCAGAATCATAACCAAAAAAAAGTTAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCCCACATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCTCTGGTATTCCGGGGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATAAAAACCTCCTCCCCCTTCGGGTTTGATTACTATCGTTGGGGGGTATTGGCCTACTGGGAAAGCGATTTGGCAATTGCCTTCCCACTGTCCTAAATACACTTAGACCCGCCTCCAGATGCGACAGCACCGAGGCCATCAACCGTGGAGTTATGGAATACCGTTCTCCACACGCCGATGGCAAACCGGTCGCAGTTGCGGGCGTAAATTGGAGCCCTCTTCAGGACCCTCGTGGCCTAGCATCCA