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PAGEPAGE6微生物的培育与应用1.(2024·江西赣中南五校一联)回答下列有关微生物培育与运用的问题:KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2gFeCl30.1gX1g维生素微量琼脂15g(1)如上表是筛选异养型细菌的培育基配方。从物理性质上看该培育基属于________培育基,其中成分X除了为目的菌供应能源外,还能供应____________。制备该培育基的一般操作依次是计算→称量→________→灭菌→________。对培育基进行灭菌的常用方法是____________________。(2)如图A、B是纯化微生物培育的两种接种方法,C、D是接种后培育的效果。某同学接种培育后获得图C所示效果,则其采纳的接种方法是[]____________([]选填“A”“B”);接种时可能的失误操作是__________________________。(3)微生物强化采油是利用某些微生物能降解石油、增大石油的乳化度、降低石油黏度的原理,通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。为筛选和纯化该类微生物,应向培育基中添加________作为唯一碳源;培育一段时间后在培育基上形成降油圈,此时选取________就可获得高效菌株。答案(1)固体碳源和氮源溶化倒平板高压蒸汽灭菌法(2)B稀释涂布平板法涂布不匀称(3)石油降油圈大的菌落解析(1)题表中培育基的成分有凝固剂——琼脂,因此该培育基为固体培育基。培育基除应含有水、无机盐、特别养分物质(维生素等)外,还应有碳源和氮源。制备固体培育基的一般操作依次是计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。(2)图A运用接种环接种,表示的是平板划线法,相应培育效果如图D所示;图B运用涂布器接种,表示的是稀释涂布平板法,相应培育效果如图C所示。图C所示培育基上菌落分布不匀称,可能是接种过程中涂布不匀称所致。(3)筛选和纯化能降解石油的微生物时,应以石油为唯一碳源。降油圈越大,说明该处微生物降解石油的实力越强。2.(2024·湖北八校二模)为了调查某学校旁边河流的水质状况,该学校生物爱好小组测定了河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分别等工作。回答下列问题:(1)如图,该小组采纳的是________分别水样中的细菌。操作时,接种环通过________灭菌,在其次次及以后的操作时,总是从上一次的末端起先,这样做的目的是____________________________。(2)该试验组将接种好的培育皿在恒温箱中培育时倒置,其目的是________________________________________;在培育基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为________。(3)依据培育皿上菌落的平均数可以计算河水中该细菌的密度,但计算的数据要比实际活菌的数目少,缘由是______________________。除了上述的活菌计数法外,________也是测定微生物数量的常用方法。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培育基中并混匀,一部分进行静置培育,另一部分进行振荡培育。结果发觉:振荡培育的细菌比静置培育的细菌生长速度快。分析其缘由是:__________________________________________________________________________________。答案(1)平板划线法灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(2)防止形成的冷凝水滴落在培育基上产生杂菌污染种群(3)当两个或者多个细胞连在一起时平板上视察到的是一个菌落显微镜干脆计数(4)振荡培育能提高培育液的溶解氧的含量,同时可以使菌体与培育液充分接触,提高养分物质的利用率解析(1)从图中可明显看到三个划线区域,这说明该小组采纳的是平板划线法分别水样中的细菌。接种环是金属制品,可用灼烧灭菌。在其次次及以后的操作时,总是从上一次的末端起先,这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(2)将接种好的培育皿在恒温箱中培育时倒置,其目的是防止形成的冷凝水滴落在培育基上产生杂菌污染。种群是生活在同一区域的同种生物全部个体的总和,因此在培育基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为种群。(3)计算的数据要比实际活菌的数目少,缘由是当两个或者多个细胞连在一起时平板上视察到的是一个菌落。除了上述的活菌计数法外,显微镜干脆计数也是测定微生物数量的常用方法。(4)振荡培育的细菌比静置培育的细菌生长速度快的缘由是:振荡培育能提高培育液的溶解氧的含量,同时可以使菌体与培育液充分接触,提高养分物质的利用率。3.(2024·河北邯郸一模)某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。探讨人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培育基,胜利筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。试验的主要步骤如图所示。请分析回答下列问题:(1)培育基中加入化合物A的目的是________________________,这种培育基属于________培育基。(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培育基中的________。试验须要振荡培育,由此推想“目的菌”的代谢类型是________。(3)在上述试验操作过程中,获得纯净“目的菌”的关键是________________________。(4)转为固体培育基时,常采纳平板划线的方法进行接种,此过程中所用的接种工具是________,操作时采纳的灭菌方法是________。(5)试验结束后,运用过的培育基应当进行灭菌处理才能倒掉,这样做的目的是________________________________________。(6)某同学安排统计污水池中“目的菌”的总数,他选用104、105、106稀释液进行平板划线,每种稀释液都设置了3个培育皿,从设计试验的角度看,还应设置的一组比照试验是_________________,此比照试验的目的是________________________________。答案(1)筛选目的菌选择(2)化合物A异养需氧型(3)防止外来杂菌污染(4)接种环灼烧灭菌(5)防止造成环境污染(6)不接种的空白培育基检验培育基灭菌是否合格解析(1)该试验的目的是筛选“目的菌”,故培育基中添加的化合物A起选择作用。(2)微生物正常生长须要碳源、氮源、无机盐等,由培育基中添加的物质种类知:化合物A应当给微生物生长供应碳源、氮源。培育过程需振荡,说明目的菌是需氧型微生物。(6)统计污水池中的“目的菌”时应设置空白比照,以用于检验培育基是否灭菌严格。4.(2024·山西太原一模)玉米秸秆含有大量的纤维素,用纤维素酶分解秸秆后的产物可以生产酒精。探讨人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制培育基,胜利地筛选到能产生纤维素酶的微生物。请分析回答:(1)纤维素酶至少包括________、________、__________三种组分,在这三种酶的作用下,纤维素最终被水解成________。(2)培育基中加入的化合物A是________,为微生物的生长供应碳源,这种培育基属于________培育基,对培育基进行灭菌时常用的灭菌法为__________________________________________________。(3)在筛选纤维素分解菌的过程中,通常用________染色法;假如培育基某部位出现________现象,则说明存在纤维素分解菌。(4)用获得的糖液发酵生产乙醇,常用的微生物是________,在________________发酵液中,该菌可以生长繁殖,而绝大多数其他生物受到抑制。常用________________法对该菌进行计数,检测是否产生酒精的常用试剂是________________,会变为________色。(5)试验结束后,运用过的培育基应当进行________处理后才能倒掉,这样做的目的是爱护环境。答案(1)C1酶CX酶葡萄糖苷酶葡萄糖(2)纤维素选择高压蒸汽灭菌(3)刚果红透亮圈(4)酵母菌酸性且缺氧稀释涂布平板(其他答案正确也可)酸性重铬酸钾灰绿(5)灭菌解析(1)纤维素的单体是葡萄糖,纤维素酶能够将纤维素水解成葡萄糖。纤维素酶是一种复合酶,包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。(2)依据题干信息可知,试验目的是筛选到能产生纤维素酶的微生物,因此培育基应以纤维素作为唯一碳源,这种培育基属于选择培育基,对培育基进行灭菌时常用的灭菌法为高压蒸汽灭菌。(3)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,红色复合物无法形成,出现以纤维素分解菌为中心的透亮圈,我们可以通过是否产生透亮圈来筛选纤维素分解菌。(4)酵母菌无氧呼吸时产生乙醇,所以用获得的糖液发酵生产乙醇,常用的微生物是酵母菌,在酸性且缺氧发酵液中,该菌可以生长繁殖,而绝大多数其他生物受到抑制,常用稀释涂布平板法对该菌进行计数。酒精与酸性的重铬酸钾发生反应,由橙色变为灰绿色。(5)试验结束后,为了爱护环境和防止操作者被感染,对运用过的培育基应进行灭菌处理。5.(2024·山东菏泽一模)为探究大肠杆菌CV101菌株和CV103菌株的养分需求,某团队在养分成分相同的含醋酸盐的培育液中分别接种CV101菌株和CV103菌株,并置于相同且相宜的环境中培育,每隔一段时间统计两种菌株的生长状况。试验数据如下图所示,回答下列问题:(1)醋酸盐培育基从物理性质上来看属于________培育基,该培育基主要应用是________;从功能上来看属于________培育基。(2)由图可知:更适应醋酸盐培育基环境的菌株是________,其依据是_________________________________________________,缘由是__________________________________________。(3)若要统计培育30小时后醋酸盐培育基中的CV101活菌数,可采纳________法;为保证能在固体培育基上获得单个菌落,接种前,需取1mL该菌液进行________处理。答案(1)液体扩大培育选择(2)CV101菌株在肯定时间内,CV101菌株在该培育基中数量持续增多,而CV103菌株的数量削减且维持在较低水平CV101菌株能以醋酸盐为碳源(3)稀释涂布平板梯度稀释解析(1)依据题干信息分析,某团队在养分成分相同的含醋酸盐的培育液中分别接种CV101菌株和CV103菌株,因此该培育基属于液体培育基,有利于菌种的扩大培育;从功能上看其属于选择培育基。(2)据图分析可知,在肯定时间内,CV101菌株在该培育基中数量持续增多,而CV103菌株的数量削减且维持在较低水平,说明CV101菌株能以醋酸盐为碳源,因此CV101菌株是更适应醋酸盐培育基环境的菌株。(3)常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,其中后者可以用于菌种的计数;为保证能在固体培育基上获得单个菌落,接种前,需取1mL该菌液进行梯度稀释处理。6.(2024·宁夏固原一中训练)某爱好小组欲调查学校某区域土壤中微生物的种类,并进行了微生物的分别等工作。回答下列问题:(1)该小组采纳稀释涂布平板法从土壤中分别分解纤维素的微生物,在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培育了一段时间,这样做的目的是________________________________;分别得到的纯化单菌落属于________(填“种群”或“群落”);筛选纤维素分解菌常用________________法,依据菌落四周是否出现________来判定。(2)该小组采纳平板划线法分别土壤中的微生物,操作时,接种环通过________灭菌,在其次次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端起先划线,这样做的目的是____________________________。(3)鉴定土壤中微生物的种类,可以通过菌落的___________(至少两点)等特征。在试验中小组每隔24小时统计一次菌落数目,并选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止_______________。答案(1)检测培育基灭菌是否合格种群刚果红染色透亮圈(2)灼烧将聚集的菌体渐渐稀释以便获得单个菌落(3)形态、大小、隆起程度及颜色因培育时间不足导致遗漏菌落数目解析(1)在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培育了一段时间,这样做的目的是检测培育基灭菌是否合格;分别得到的纯化单菌落是同种生物,属于种群;筛选纤维素分解菌常用刚果红染色法,依据菌落四周是否出现透亮圈来判定。(2)接种环常采纳灼烧灭菌法灭菌;在其次次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端起先划线,这样做的目的是将聚集的菌体渐渐稀释以便获得单个菌落。(3)鉴定土壤中微生物的种类,可以通过菌落的形态、大小、隆起程度及颜色等特征。在试验中小组每隔24小时统计一次菌落数目,并选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止因培育时间不足导致遗漏菌落数目。7.为了分别和纯化高效分解石油的细菌,科研人员利用
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