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34DB34/T1373—2025动物组织中氯丙嗪的残留测定酶联免疫DeterminationofchlorpromazineresiduesinanimaltissuesEnzyme-linkedimmunosorbentassay2025-01-24发布2025-02-24实施安徽省市场监督管理局发布I本文件代替DB34/T1373-2011）；）；）；）；）；f)更改了“结果判定和表述”（见第9章，2011版的1％）：％）：26.5离心机：≥4000g。6.9微量加样器及配套吸头：(单道20μL,50μL,100μL,多道57.1.1畜禽肌肉、肝脏、肾脏去筋膜切成小块，粉碎机制成糜状，10000rpm均质2min。称取2.0±0.05g均质或搅拌均匀后组织样品于50mL离心管中，分别加入2mL三氯乙酸溶液 (5.2)、6mL乙腈(5.3),涡动5min,室温4000g离心5min后，取2mL上层液于另一50mL离心管中，依次加入2mL氢氧化钠溶液(5.4)和4.5mL正已烷(5.5),涡动5min,4000g离心5min,取上层有机相3mL于离心管中，50℃~60℃氮气吹干，加入0.5mL复溶工作液(5.1.9),制备好的试样按检样和备样置于4℃下可保存3天～4天，或于-18℃以下保存6个月。8.1测定在室温(20℃~25℃)条件下操作，测定之前将试剂盒以及所有试剂恢复至室温(约1h～28.2按标准工作液和供试样品数量取孔条插入酶标板(5.1.1),标准工作液和供试样品做两孔平行，8.3分别在各孔中加入50μL标准工作液(5.1.2)或7.3项下待测试样溶液，每孔加入50μL抗体工作液(5.1.3),用盖板膜封板，轻轻振荡酶标板10s,充分混匀，室温下避光反应60min。8.4揭开盖板膜，倾出板孔中的液体，在所有微孔中加260μL洗涤工作液(5.6),轻轻振荡酶标板复洗板4遍。8.5每孔加100μL底物A、B混合液(5.7)用盖板膜封板，轻轻振荡酶标板10s,充分混匀，室温下避光反应15min～20min。8.6揭开盖板膜，每孔加50μL终止液(5.1.8),轻轻振荡酶标板10s,充分混匀，5min内在4509.1用获得的标准工作液和供试样品溶液吸光度值的比值进行计算，见式(1):3Bo—0浓度的标准工作液的平均吸光度值。9.2将计算的相对吸光度值(%)对应氯丙嗪标准溶液浓度(μg/L)的自然对数作半对数坐标系统曲算见式(2):X—供试样中氯丙嗪的含量，单位为微克/千克(μg/kg);A—供试样的相对吸光度值(%)对应的氯丙嗪的含量，单位为微克/升(μg/L);V—加入复溶工作液体积，单位为毫升(mL);m—试样的取样量，单位为克(g)。9.3检测结果小于检出限时判为未检出，大于或等于检出限时，应使用色谱质谱联用法进行确认。本方法在畜禽肌肉、肝脏、肾脏及禽蛋的检出限为0.5μg/kg。本方法在2～5倍检出限添加浓度水平上的回收率为80%～120%。本方法的批内变异系数CV%≤30%,

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