靶向二代测序在感染性疾病诊疗中的规范化应用专家共识（2025）解读

靶向二代测序在感染性疾病诊疗中的规范化应用专家共识（2025）解读202X汇报人：XXX2025.5目录1.4.2.5.3.感染性疾病诊疗现状与挑战靶向二代测序技术的优势与原理专家共识中的临床应用场景专家共识中的未来发展方向专家共识中的全流程规范感染性疾病诊疗现状与挑战01202X感染性疾病仍是全球重要公共卫生威胁，如结核病每年导致约130万人死亡，2022年全球报告约1060万新病例。2022年全球疟疾约2.49亿病例，60.8万人死亡，主要集中在非洲地区。感染性疾病全球负担传统病原体检测方法如涂片镜检、培养等在临床检测中存在局限性，如培养阳性率低。传统检测方法在检测范围、灵敏度和时效性上存在不足，难以满足临床需求。传统检测方法的局限性耐药性问题日益严峻，如2022年耐多药结核病治疗覆盖率仅2/5。耐药性问题导致治疗难度增加，给临床诊疗带来巨大挑战。耐药性问题的加剧感染性疾病对公共卫生的影响靶向二代测序技术的优势与原理02202X高灵敏度与特异性tNGS通过特异性引物或探针靶向富集目标病原体或基因，灵敏度高，可检测低载量病原体。在血流感染、中枢神经系统感染等样本中，tNGS灵敏度可达70.8%-95.0%。成本效益与快速检测tNGS测序量仅为mNGS的百分之一，成本低，且检测周期短，平均15小时可出结果。相比传统培养法（3-7天）和mNGS（平均24小时），tNGS能更快提供诊断信息。同时检测DNA和RNA病原体tNGS可同时检测DNA和RNA病原体，如在呼吸道感染中能同时检测病毒和细菌。这一特性使其在检测如结核分枝杆菌等RNA病毒时更具优势。tNGS技术的核心优势tNGS基于多重PCR特异扩增或探针捕获技术，富集特定病原体核酸。通过设计特异性引物或探针，可靶向检测临床标本中的病原体及其耐药基因。多重PCR扩增或探针捕获利用二代测序技术对富集后的核酸进行高通量测序，产生大量数据。通过生物信息学分析，将测序结果与参考数据库比对，确定病原体种类和耐药基因。高通量测序与数据分析mNGS为鸟枪法测序，无需预设待检病原，但易受人源背景干扰。tNGS通过靶向富集，减少了人源背景干扰，提高了检测效率和准确性。与mNGS的比较tNGS技术的工作原理专家共识中的临床应用场景03202X下呼吸道感染tNGS在下呼吸道感染中可检测多种病原体，包括细菌、病毒、真菌等。对于传统检测阴性或治疗无效的患者，tNGS可提供更准确的病原学诊断。上呼吸道感染上呼吸道感染的tNGS检测宜纳入呼吸道合胞病毒、流感病毒等常见病原体。tNGS可辅助判断上呼吸道感染的病原体类型，为临床治疗提供依据。0102呼吸系统感染血液样本中的病原体检测对临床治疗的指导意义tNGS在血流感染中具有高灵敏度，可检测低载量的病原体。能快速识别血流感染的病原体，指导临床合理使用抗生素。tNGS结果可帮助临床医生快速调整抗菌治疗方案，减少不必要的广谱抗生素使用。通过检测耐药基因，tNGS还能为血流感染的精准治疗提供依据。血流感染脑脊液样本中的病原体检测对预后评估的价值tNGS在中枢神经系统感染中可检测脑脊液中的病原体，包括病毒、细菌和真菌。对于脑膜炎等疾病，tNGS能快速确定病原体，为及时治疗提供支持。早期准确的病原体诊断有助于改善中枢神经系统感染患者的预后。tNGS可检测病原体的毒力基因，为评估疾病严重程度和预后提供参考。中枢神经系统感染专家共识中的全流程规范04202X样本采集要求不同类型的感染性疾病需采集相应的样本类型，如呼吸道感染采集痰液、鼻咽拭子等。采集样本时需注意无菌操作，避免样本污染。样本保存与运输样本采集后需根据类型和检测要求进行保存和运输，如血样需冷藏运输。为保证样本质量，需在规定时间内完成检测，避免核酸降解。样本采集与处理采用合适的核酸提取方法，确保核酸的完整性和浓度。文库构建过程中需严格控制质量，避免污染和错误。核酸提取与文库构建使用高通量测序仪进行测序，确保测序质量。数据分析需采用专业的生物信息学软件，与参考数据库比对，确定病原体。测序与数据分析0102实验室检测流程建立完整的质量控制体系，包括样本采集、实验室检测和数据分析等环节。定期进行内部质量控制和室间质量评价，确保检测结果的准确性和可比性。质量控制体系结果报告需包括病原体种类、耐药基因、序列数等信息。结果解读需结合患者临床表现、免疫状态和传统检测结果，由多学科团队共同完成。结果报告与解读质量控制与结果报告专家共识中的未来发展方向05202X目前tNGS检测范围尚未完全统一，未来需进一步标准化。通过优化引物和探针设计，扩大检测范围，提高检测准确性。检测范围的标准化低载量病原体检测是tNGS的挑战之一，需优化技术提高检测灵敏度。研究新的富集方法和数据分析算法，以更好地检测低载量病原体。低载量病原体检测优化技术创新与优化罕见病原体检测对于罕见或新发病原体感染，mNGS仍是更优选择，但tNGS也在不断拓展应用。通过不断更新数据库和优化检测流程，tNGS有望在罕见病原体检测中发挥更