（高清版）DB1301∕T 329-2020 照山白杜鹃组培快繁育苗技术规程

照山白杜鹃组培快繁育苗技术规程2020-06-14实施2020-06-14实施石家庄市市场监督管理局发布前言 12规范性引用文件 13术语和定义 14组培实验室所需的设备、器材和试剂 15母本材料 26培养基选择与母液配制 27培养基制备 28外植体预处理与消毒 29接种准备与外植体接种操作 310组织培养过程 311移栽后管理 412苗木出圃质量标准 4附录A(规范性附录)WPM培养基母液配制 5附录B(资料性附录)WPM等缩略语名称对照表 6附录C(资料性附录)照山白常见病虫害及防治方法 7工本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由石家庄市农业农村局提出。本标准起草人：蒋淑磊、徐秋良、白霄霞、李振勤、李国松、杨红涛、边光亚、刘雅、王乃泽、吴然、张晓英、刘伟、陈洪波、牛晓丽。1件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。NY/T2306—2013花卉种苗组培快繁技术规程DB13/T2422—2016高山杜鹃工厂化育苗技术规程NY/T2306—2013界定的以及下列术语和定义适用于4.3所需试剂2除按照NY/T2306—2013中附录D的要求执行外，还需增加异戊烯基腺嘌呤[化学名：N6-(2-Isopentenyl)adenosine)]。按照NY/T2306—2013中第6章执行。选择无病虫害健壮植株为母本材料。以WPM培养基为初代培养、继代培养、增殖培养基本培养基；1/2WPM为生根培养基本培养基。培养基母液配制方法和保存注意事项见附录A。植物生长物质的母液配制及存储方法按照DB13/T2422—2016中5.3执行。7.1配制根据培养基成分准备好蒸馏水、琼脂、砂糖和各种母液。制作1L培养基，需要700ml蒸馏水，添加琼脂粉6.5g～7.0g,加热搅拌使之完全溶解，加砂糖30g,根据母液要求取量，添加植物生长调节剂，用pH计测pH值，用0.1mol/L的NaOH或HCl调节pH值至要求值，一般为5.5～5.8。用量以不同规格培养瓶培养基分装量不同，分装培养基注意勿将培养基沾到培养瓶瓶口，分装完成后注明日期和编号。培养基分装完成后应在10h内进行湿热灭菌，灭菌调节为121℃,18min。灭菌后的培养基放在储存间，注意储存时间不超过7d。按照NY/T2306—2013中第10章执行。3从健康母本材料上切取带芽幼嫩茎段2cm为外植体放入烧杯。将外植体用0.2%～0.3%的洗涤剂溶液浸泡并振荡4min～6min,自来水冲洗30min。在超净环境中，用75%酒精浸泡外植体30s,用无菌水冲洗外植体3次～4次。用0.1%的HgCl₂溶液浸泡3min~5min,用无菌水冲洗3次~5次，备用。培养温度为20℃±2℃,光照强度3000lux～3500lux,每日连续光照12h～13h。初代培养的培养基配方为：WPM+NAA0.2mg/L+2ip6mg/L+白砂糖30g/L+琼脂6.5g/L,pH值调至5.5～5.8。注：10.2～10.5中WPM等缩略语名称对照表参见附录B。继代培养基配方为：WPM+NAA0.25mg/L+ZT0.5mg/L+白砂糖30g/L+琼脂6.5g/L,pH增殖培养基配方为：WPMNAA0.1mg/L+ZT2.0mg/L+白砂糖30g/L+琼脂6.5g/L,pH将高度为2cm～3cm的增殖苗转接在诱导生根培养基，生根培养60d,幼苗基部长出4条～7条新诱导生根的培养基配方为：1/2WPM+IBA0.8mg/L+NAA0.25mg/L+白砂糖15g/L+琼脂6.5将生根苗从培养室中取出，置于温度控制在(20±2)℃,经彻底消毒的温室中，炼苗驯化3d～4d,4从瓶中取出组培苗，放在盛有(20±2)℃左右的温水中，将附着在根上的培养基清洗掉，洗时注意不伤根，用50%多菌灵WP1500倍液浸泡5min,清洗灭菌。选用1mm～3mm的珍珠岩与草炭1:3配比制成基质，装入穴盘。将基质喷湿至含水量达到60%左清洗灭菌后的苗移栽到穴盘中。浇透水，并使根系和基质紧密接触。11移栽后管理11.1光照与温湿度控制移栽后保温保湿10d,相对湿度保持在80%左右，温度保持在18℃~22℃,每天中午通风0.5h~1h,用遮阳网控制光照强度在5000lux～8000lux之间。施肥每15d～20d进行叶面喷肥一次，喷施1/10WPM培养基溶液+0.1%的鳌合铁溶液，共施3次。11.2病虫害防治移栽苗管理期间，实时监测病虫害发生情况，及时预防。照山白常见病虫害及防治方法参见附录C。12苗木出圃质量标准12.1组培穴盘苗株形植株挺拔，叶深绿色，无黄叶现象。根系嫩白密集，根毛浓密，根系将基质紧紧缠绕，形成完整根坨，基质不散。12.4叶片数叶片数在8片以上。同一批次90%以上的苗高达到要求的高度。12.6病虫害状况无检疫性病虫害。5(规范性附录)表A.1WPM培养基母液配制母液体积MgSO.7H0中量元素镁钙鳌合铁5微量元素维生素烟酸(维生素PP)注：母液配制应用去离子水，置于4℃左右冰箱保存，贴好标签，注明名称、配制日6DB1301/T329—2020(资料性附录)WPM等缩略语名称对照表表B.1WPM等缩略语名称对照表化学名称(英文)化学名称(中文)N6-(2-Isopenteny1)aden吲哚丁酸7(资料性附录)照山白常见病虫害及防治方法照山白常见病虫害及防治方法参见表C.1。常见病虫害防治方法生理性病害黄化病(Chlorosis)pH值保持在5.0～6.5范围内，用0.1%～0.5%的硫替清水浇灌，症状严重时可在叶面喷施0.1%～0.3%的鳌合铁水溶叶面喷洒0.1%～0.2%的硫酸锌溶液或螫合锌，茎尖枯死(ApicalBlight)叶面喷施0.2%的硼酸水溶液或800倍~1000倍的禾丰硼溶液，每隔6d～7d喷一次，喷2次～3次。侵染性病害白粉病(P25%粉锈宁1500倍~2000倍水溶液喷雾，每7天喷药一次，喷药2杜鹃锈病)疫霉根腐甲基托布津800倍～1000倍液或70%恶霉灵可湿性粉剂500倍～800倍水溶液或80%乙蒜素1500倍水溶液对发病植株和区域进行浸灌处埋处理。芽枯病(BudBlight)1000倍液或2.5%功夫乳油2500倍～3000倍液、4炭疽病(Anthracnosis)喷洒70%甲基托布津可湿性粉剂800倍水溶液或80%乙蒜素1500倍水溶液、70%代森锰锌可湿性粉剂500倍水溶液等，每10天喷1次，连喷3次~5次。浇水时注意不将水淋溅到植株上可避免病毒传播。虫害根象(RootWeevil)喷施40%毒死蜱1500倍~2000倍水溶液或2%甲维