芽孢杆菌的研发及其应用前景（上海会议2025.3）

1/1芽孢杆菌的研发及其应用前景（上海会议2025.3）芽孢杆菌类生物杀菌剂的研发及其应用前景江苏省农业科学院植物保护研究所陈志谊内部资料，严禁传播2025主要内容一、芽孢杆菌及其控病作用机理二、研发的芽孢杆菌类生物杀菌剂产品三、生物杀菌剂B1619防控作物土传病害四、芽孢杆菌类生物杀菌剂的应用前景内部资料，严禁传播2025一、芽孢杆菌及其控病作用机理内部资料，严禁传播2025芽孢杆菌属，革兰氏阳性菌，需氧或兼性厌氧，产生芽孢，细胞呈直杆状。

芽孢杆菌属，革兰氏阳性菌，需氧或兼性厌氧，产生芽孢，细胞呈直杆状。

芽孢杆菌属的细菌具有一个共同的特性，能够形成带有芽孢的生物膜芽孢杆菌属的细菌具有一个共同的特性，能够形成带有芽孢的生物膜,,这个特点使得它们能够抵抗各种极端环境，如：

高温、极酸、极盐，而且对各种杀菌剂具有抵抗力。

芽孢杆菌属的细菌在各种自然环境中都能被分离到。

芽孢杆菌属的细菌能产生环肽、抗生素、氨基酸和聚多糖等。

11、芽孢杆菌的特性内部资料，严禁传播202522、国内外已登记的芽孢杆菌类生物杀菌剂我国农药登记的芽孢杆菌类生物杀菌剂的菌种有：

多粘类芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、蜡质芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌国外农药登记的芽孢杆菌类生物杀菌剂的菌种有：

多粘类芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、蜡质芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、蕈状芽孢杆菌、短小芽孢杆菌内部资料，严禁传播202533、芽孢杆菌作为生物杀菌剂的优势：

无毒、无致病性，对人畜安全；控病作用高效；形成芽孢、抗逆性强，耐储存，适宜产业化生产；适应性广，繁殖速度快，竞争能力强；诱导植物产生抗病性；抑菌物质丰富，抗菌谱广。

内部资料，严禁传播2025微生态竞争作用在植物根围建立保护屏障，占领病原菌侵染位，减少病原菌侵染几率；分泌抑菌物质脂肽类抗生素、抑菌蛋白，这些抑菌物质抑制病原菌生长繁殖，恶化病原菌生存环境；诱导寄主植物抗病性植物防卫反应PR--1a、PR--1b、PAL等基因超量表达，增强植物免疫能力，降低植物发病指数。

44、芽孢杆菌防控植物土传病害的作用机理内部资料，严禁传播2025解淀粉芽孢杆菌B1619控病作用机理1、生态空间的竞争作用保护屏障0100020003000400050006000定植前定植后一周盛果期采收后每克土壤中的孢子数B1619CK23002400250026002700280029003000定植前定植后一周盛果期采收后每克土壤中的孢子数B1619CK0100020003000400050006000定植前定植后一周盛果期采收后每克土壤中的孢子数B1619CK铜山示范基地番茄枯萎病菌种群数量消长情况（菌数/每克土壤）溱潼示范基地番茄枯萎病菌种群数量消长情况（菌数/每克土壤）沭阳示范基地番茄枯萎病菌种群数量消长情况（菌数/每克土壤）内部资料，严禁传播20251、生态空间的竞争作用保护屏障012345678910135715B1619在番茄根部定殖数量lg(cfu﹒g-1)时间Time(d)B1619RB1619R+RSB1619在番茄根部的定殖情况B1619在番茄根部定殖数量解淀粉芽孢杆菌B1619控病作用机理内部资料，严禁传播20252、分泌产生抗菌物质抑制病原菌（根结线虫）生长引物名称引物长度引物序列(53)PrimernameSize(bp)Sequence(53)sfpF20ATGAAGATTTACGGAATTTAsfpR20TTATAAAAGCTCTTCGTACGituAF20ATGTATACCAGTCAATTCCituAR20GATCCGAAGCTGACAATAGfenBF20CTATAGTTTGTTGACGGCTCfenBR20CAGCACTGGTTCTTGTCGCAPCR扩增脂肽类抗生素相关基因泳道1、2扩增出sfp基因。

泳道3、4扩增出ituA基因。

泳道5、6扩增出fenB基因。

B1619基因组中存在表面活性素、伊枯草素、泛革素代谢合成操纵子序列，能代谢产生这3类脂肽类抗生素。

解淀粉芽孢杆菌B1619控病作用机理内部资料，严禁传播20252、分泌产生抗菌物质抑制病原菌（根结线虫）生长min304050mAU050100150202550surfactinAsurfactinBsurfactinCAmin1020mAU050100150202550bacillomycinLAbacillomycinLBBmin2040mAU050100150202550fengycinAfengycinBfengycinC/fengycinD\fengycinE̸CB1619三种脂肽类物质的HPLC图脂肽类抗生素Lipopeptides分子量MassvalueMM+H+M+Na+表面活性素SurfactinsSurfactinA(C13)1007.61008.6*1030.6*SurfactinB(C14)1021.71022.6*1044.7*SurfactinC(C15)1035.71036.7*1058.6*伊枯草素IturinsBacillomycinL(C13)1020.51021.51043.4*BacillomycinL(C14)1034.51035.5*1057.6*BacillomycinL(C15)1048.51049.5*1071.4*泛革素FengycinsFengycinA(C15/Ala-6)1448.81449.8*1471.9FengycinB(C16/Ala-6)1462.91463.5*1485.9FengycinC(C17/Ala-6)1476.91477.7*1499.9FengycinD(C16/Val-6)1490.91491.8*1513.9FengycinE(C17/Val-6)1504.91505.9*1527.9*B1619三种脂肽类物质的分子质量测定解淀粉芽孢杆菌B1619控病作用机理内部资料，严禁传播20252、分泌产生抗菌物质抑制病原菌（根结线虫）生长B1619三种脂肽类物质对枯萎病菌生长的抑制作用1、1mg.mL-1的bacillomycinL（伊枯草素）2、1mg.mL-1的fengycins（泛革素）3、1mg.mL-1的surfactins（表面活性素）4、1mg.mL-1的B1619脂肽类物质粗提物5、甲醇对照6、空白对照解淀粉芽孢杆菌B1619控病作用机理内部资料，严禁传播20252、分泌产生抗菌物质抑制病原菌（根结线虫）生长B1619脂肽类物质粗提物对根结线虫的毒力测定处理时间稀释倍数死亡率（%）毒力回归方程相关系数EC50(cfu/mL)24小时178.8481y=-1.4900x+6.0570-0.93015.1217561.49511048.55601526.92142015.8889257.985248小时182.4923y=-1.5494x+6.1703-0.94155.6922562.83731051.12411527.73872016.1501259.2389解淀粉芽孢杆菌B1619控病作用机理内部资料，严禁传播20253、诱导植物寄主抗病性抗病基因超量表达AA：

CK（喷施YPG培养液）BB：

喷施生防菌B-1619在番茄植物根部撒施生物杀菌剂BB1619后，番茄植株体内与抗病性相关基因PR-1a和PR-1b表达值显著高于对照解淀粉芽孢杆菌B1619控病作用机理内部资料，严禁传播20253、诱导植物寄主抗病性抗病基因超量表达051015202530350h8h24h48h96h相对表达量时间CKB1619线虫线虫+B1619抗病基因PR1的相对表达量012345678h24h48h96h144d相对表达量时间CKB1619线虫线虫+B1619抗病基因PAL2的相对表达量解淀粉芽孢杆菌B1619控病作用机理内部资料，严禁传播20253、诱导植物寄主抗病性抗氧化酶系活性超量表达180.00280.00380.00480.00580.000h8h24h48h96h144h168hSOD（U/mgprot）时间CKB1619线虫线虫+B161910.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.0055.0060.000h8h24h48h96h144h168hPOD(U/mgprot)时间CKB1619线虫线虫+B161955.0075.0095.00115.00135.00155.000h8h24h48h96h144h168hCAT(U/mgprot)时间CKB1619线虫线虫+B1619超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化过氧化物酶（POD）活性的变化过氧化氢酶（CAT）活性的变化解淀粉芽孢杆菌B1619控病作用机理内部资料，严禁传播2025二、研发的芽孢杆菌类生物杀菌剂产品研制出22个芽孢杆菌类生物杀菌剂22个以芽孢杆菌类为主体的微生物复配剂内部资料，严禁传播202560亿活芽孢/毫升解淀粉芽孢杆菌Lx-11水剂防治对象：

水稻白叶枯病和细菌性条斑病。

防治效果：

65.0%--82.5%累计推广面积：

67.5万亩该产品2025年44月获得农药临时登记证。

内部资料，严禁传播20251.2亿活芽孢/克解淀粉芽孢杆菌B1619水分散粒剂防治对象：

设施蔬菜土传病害防治效果：

65.1--85.2%累计推广面积：

超过1000亩该产品2025年11月获得农药登记证。

内部资料，严禁传播20252.5%井100亿枯草芽孢杆菌Bs-916水剂。

防治对象：

水稻纹枯病和稻曲病。

防治效果：

68.5--87.4%累计推广面积：

超过11亿亩次。

该产品2025年获得农药临时登记证，2025年获得农药登记证。

内部资料，严禁传播20256%井240亿枯草芽孢杆菌H-74可湿性粉剂防治对象：

水稻纹枯病和稻曲病。

防治效果：

72.5--85.0%累计推广面积：

超过1000万亩该产品2025年获得农药临时登记证。

内部资料，严禁传播2025三、生物杀菌剂B1619防控设施蔬菜土传病害内部资料，严禁传播2025设施蔬菜由于经济价值显著好于大田作物（设施栽培每亩产值为8000-30000元），现已成为现代农业生产中的支柱产业和农民增收的主要途径。

截至2025年底，江苏省以设施蔬菜为主的设施农业面积已达到1136万亩。

由此可见，设施蔬菜产业的发展对促迚我省农业增效、农民增收发挥着重要的作用。

内部资料，严禁传播2025随着设施蔬菜连续种植年代的增加，由土传病害（枯萎病、青枯病、根腐病、立枯病、黄萎病和根结线虫病等）引起的设施蔬菜连作障碍频繁暴发，已成为设施蔬菜安全生产的主要瓶颈。

内部资料，严禁传播2025生产上防治设施蔬菜土传病害引起的连作障碍通常采用化学农药+高温焖棚处理的防控措施，但防治效果一直不理想，连作障碍发生依然严重。

同时大剂量化学农药处理土壤易造成设施生态环境污染，增加设施蔬菜中有毒化学物质的残留，对人类健康带来严重危害。

内部资料，严禁传播2025应用微生态学原理，在设施蔬菜根围大量引迚生防微生物，操纵管理设施土壤生态环境中微生物群落的合理分布；结合栽培管理、农业措施，形成一个稳定的、平衡的、生物多样化的设施蔬菜农田生态系统，从而达到有效控制设施蔬菜土传病害暴发与流行的目的。

必须突破目前设施蔬菜土传病害（根结线虫）以化学农药为主的防治对策的局限性，开拓以生物农药为核心的无公害综合防治设施蔬菜土传病害的技术体系，研发创制生物杀菌剂，为无公害优质蔬菜的产业化生产提供核心保障技术。

设施蔬菜土传病害生物防治策略内部资料，严禁传播20251.2亿活芽孢/克解淀粉芽孢杆菌水分散粒剂（B1619）是由江苏省农科院植保所植病生防研究室创制、与江苏省苏科农化有限责任公司合作开发。

经过多地多年试验示范，该产品能够有效防控设施蔬菜土传病害（根结线虫病）；无毒无致病性，对人畜安全；能够保护设施农业生态环境，降低化学农药使用量；幵对设施蔬菜生长有一定的促生作用。

内部资料，严禁传播202552025年田间药效试验结果药效试验地点番茄枯萎病1.2亿活芽孢/克解淀粉芽孢杆菌水分散粒剂防效%%75%百菌清防效%%中国农科院植保所（北京市昌平区北庄户）79.283.3江苏省农科院植保所（盐城市亭湖区便仓镇）65.162.1辽宁省农科院植保所（院内试验田日光温室）85.268.3华中农业大学（孝感市云梦县隔蒲潭镇）71.0563.16生物杀菌剂B1619药效田间试验结果内部资料，严禁传播2025生物杀菌剂B1619药效田间试验结果62025年田间药效试验结果药效试验地点番茄枯萎病1.2亿活芽孢/克解淀粉芽孢杆菌水分散粒剂防效%%75%百菌清防效%%中国农科院植保所（北京市昌平区北庄户）76.480.0江苏省农科院植保所（盐城市盐都区葛武镇）67.863.6辽宁省农科院植保所（院内试验田日光温室）80.565.5华中农业大学（孝感市云梦县隔蒲潭镇）75.566.3内部资料，严禁传播2025生物杀菌剂B1619毒性试验结果，由南通通大化学物安全性评价中心有限公司进行检测，毒性级别为低毒性，无眼睛刺激性、无皮肤刺激性、弱致敏性。

试验项目试验结果毒性级别大鼠急性经口（（LD50））大于5000mg/kg低毒大鼠急性经皮（（LD50））大于2000mg/kg低毒大鼠急性吸入（（LD50））大于2000mg/kg低毒新西兰兔急性眼睛刺激无刺激性豚鼠急性皮肤刺激无刺激性豚鼠皮肤变态反应（致敏性））弱致敏物内部资料，严禁传播2025生物杀菌剂B1619环境生物毒性试验结果由江苏省农业科学院农药生物生态研究中心进行检测。

试验项目试验生物毒性指标毒性结果毒性等级鸟急性经口日本鹌鹑LD50(7d）＞2000mga.i./kg体重低毒鱼类急性毒性斑马鱼LC50(96h)＞100mga.i./L低毒蜜蜂急性经口意大利工蜂LC50(48h)＞101ga.i./蜂低毒蜜蜂急性接触意大利工蜂LD50(48h)＞100ga.i./蜂低毒家蚕急性毒性家蚕LC50(二龄)＞2000mga.i./L低毒溞类急性活动抑制大型溞LD50(48h)＞100mga.i./L低毒藻类生长抑制普通小球藻EyLD50(72h)＞100mga.i./L低毒普通小球藻ErLD50(72h)＞100mga.i./L低毒蚯蚓急性毒性赤子爱胜蚓LC50(14d)＞100mga.i./L干土低毒天敌赤眼蜂玉米赤眼蜂LR50(24h)7.28103ga.i./ha内部资料，严禁传播2025不同浓度的9B1619发酵液对番茄幼苗的促生作用处理株高/cm增长率%根长/cm增长率%鲜重/g增长率%干重/g增长率率%原液24.24cd-3.0611.52bc-3.8810.01de-1.430.88bc-0.23菌体23.79d-4.8612.48c4.179.84e-3.140.78c-10.94上清液26.01bcd4.0112.71abc6.1110.78bcd6.120.93bc5.151026.12bcd4.4712.84ab7.1210.90bcd7.350.94bc7.235027.22abc8.8413.19ab10.0711.38ab12.081.04abc18.0210028.88a15.5014.49a20.9712.01a18.191.24a40.5050027.58ab10.3013.32ab11.2011.46ab12.801.14ab28.99100026.98abc7.8713.17ab9.9111.15abc9.801.05ab18.70YPG25.70cd2.7612.30bc2.6510.25cde0.880.89bc1.21ddH2O25.01cd11.98bc10.16cde0.88bc在注：

同列数据后不同小写字母表示经极差法检验在p0.05水平差异显著。

生防菌B1619对番茄植株的促生作用内部资料，严禁传播202500.10.20.30.40.50.60.70.8原液菌体上清10501005001000YPGddH2O番茄叶片叶绿素b含量/（mgg-1）Chlorophyllbcontentoftomatoleaves/(mgg-1）不同处理differenttreatents叶绿素bchlorophyllbbccabababaaabcc00.511.522.5原液菌体上清10501005001000YPGddH2O番茄叶片叶绿素总含量/（mgg-1）totalchlorophyllcontentoftomatoleaves/（mgg-1）不同处理differenttreatents叶绿素总含量totalchlorophyllcdeeabcdbcdbcdaababdee测定了不同浓度菌液处理对番茄叶绿素测定了不同浓度菌液处理对番茄叶绿素aa、bb、总叶绿素含量的影响。

结果表明：

100倍和500倍上清稀释液均明显促进了植株叶片叶绿素aa、叶绿素bb和总叶绿素含量的增加，尤其以100倍上清稀释液的增加效果最显著。

生防菌B1619可提高番茄的叶绿素含量，从而增强其光合作用，促进番茄植株的生长。

内部资料，严禁传播2025Flunarizine-Tolbutamide(IS)(Unknown)271.300/171.800Da-sample43of87fromFlunarizine.wiffArea:8.77e+004countsHeight:4.45e+004cpsRT:0.569min0.10.20.30.40.50.60.70.80.91.01.11.21.31.4Time,min0.05000.01.0e41.5e42.0e42.5e43.0e43.5e44.0e4Intensity,cps0.57Flunarizine-Flunarizine(Unknown)405.000/203.000Da-sample43of87fromFlunarizine.wiffArea:2.42e+005countsHeight:1.20e+005cpsRT:0.564min0.10.20.30.40.50.60.70.80.91.01.11.21.31.4Time,min0.001.00e42.00e43.00e44.00e45.00e46.00e47.00e48.00e49.00e41.00e51.10e5Intensity,cps0.56脱落酸（ABA）标准品B1619上清液中脱落酸（ABA）Flunarizine-Tolbutamide(IS)(Unknown)271.300/171.800Da-sample55of87fromFlunarizine.wiffFlunarizine-Tolbutamide(IS)(Unknown)271.300/171.800Da-sample55of87fromFlunarizine.wiffArea:7.96e+004countsHeight:4.07e+004cpsRT:0.565minArea:7.96e+004countsHeight:4.07e+004cpsRT:0.565min0.10.10.20.20.30.30.40.40.50.50.60.60.70.70.80.80.90.91.01.01.11.11.21.21.31.31.41.4Time,minTime,min0.00.02000.02000.04000.04000.06000.06000.08000.08000.01.0e41.0e41.2e41.2e41.4e41.4e41.6e41.6e41.8e41.8e42.0e42.0e42.2e42.2e42.4e42.4e42.6e42.6e42.8e42.8e43.0e43.0e43.2e43.2e43.4e43.4e43.6e43.6e43.8e43.8e44.0e44.0e4Intensity,cpsIntensity,cps0.560.56Flunarizine-Flunarizine(Unknown)405.000/203.000Da-sample55of87fromFlunarizine.wiffFlunarizine-Flunarizine(Unknown)405.000/203.000Da-sample55of87fromFlunarizine.wiffArea:1.38e+005countsHeight:7.29e+004cpsRT:0.559minArea:1.38e+005countsHeight:7.29e+004cpsRT:0.559min0.10.10.20.20.30.30.40.40.50.50.60.60.70.70.80.80.90.91.01.01.11.11.21.21.31.31.41.4Time,minTime,min0.00.05000.05000.01.0e41.0e41.5e41.5e42.0e42.0e42.5e42.5e43.0e43.0e43.5e43.5e44.0e44.0e44.5e44.5e45.0e45.0e45.5e45.5e46.0e46.0e46.5e46.5e47.0e47.0e4Intensity,cpsIntensity,cps0.560.56亚精胺（Spd）标准品B1619上清液中亚精胺（Spd）运用液质联用方法检测了B1619上清液中与促生相关的物质。

检测结果表明：

B1619素上清液中含有生长素1.90mgL--11（IAA）素细胞分裂素1.30mgL--11（CTK）酸脱落酸1.94mgL--11（ABA）素赤霉素0.0544mgL--11（GA33）胺亚精胺1.22mgL--11（Spd）。

内部资料，严禁传播2025Flunarizine-Tolbutamide(IS)(Unknown)271.300/171.800Da-sample19of87fromFlunarizine.wiffArea:9.99e+004countsHeight:4.92e+004cpsRT:0.599min0.10.20.30.40.50.60.70.80.91.01.11.21.31.4Time,min0.05000.01.0e41.5e42.0e42.5e43.0e43.5e44.0e44.5e4Intensity,cps0.60Flunarizine-Flunarizine(Unknown)405.000/203.000Da-sample19of87fromFlunarizine.wiffArea:2.70e+005countsHeight:1.32e+005cpsRT:0.591min0.10.20.30.40.50.60.70.80.91.01.11.21.31.4Time,min0.01.0e42.0e43.0e44.0e45.0e46.0e47.0e48.0e49.0e41.0e51.1e51.2e51.3e5Intensity,cps0.59生长素（IAA）标准品B1619上清液中生长素（IAA）RO6899416-000-001-Tolbutamide(IS)(Unknown)271.300/171.800Da-sample19of66fromRO6899416-000-001.wiffRO6899416-000-001-Tolbutamide(IS)(Unknown)271.300/171.800Da-sample19of66fromRO6899416-000-001.wiffArea:4.03e+004countsHeight:2.83e+004cpsRT:0.565minArea:4.03e+004countsHeight:2.83e+004cpsRT:0.565min0.10.10.20.20.30.30.40.40.50.50.60.60.70.70.80.80.90.91.01.01.11.11.21.21.31.31.41.4Time,minTime,min0.00.02000.02000.04000.04000.06000.06000.08000.08000.01.0e41.0e41.2e41.2e41.4e41.4e41.6e41.6e41.8e41.8e42.0e42.0e42.2e42.2e42.4e42.4e42.6e42.6e42.8e42.8e4Intensity,cpsIntensity,cps0.570.57RO6899416-000-001-RO6899416-000-001(Unknown)445.900/362.000Da-sample19of66fromRO6899416-000-001.wiffRO6899416-000-001-RO6899416-000-001(Unknown)445.900/362.000Da-sample19of66fromRO6899416-000-001.wiffArea:1.30e+004countsHeight:1.22e+004cpsRT:0.468minArea:1.30e+004countsHeight:1.22e+004cpsRT:0.468min0.10.10.20.20.30.30.40.40.50.50.60.60.70.70.80.80.90.91.01.01.11.11.21.21.31.31.41.4Time,minTime,min0.000.001000.001000.002000.002000.003000.003000.004000.004000.005000.005000.006000.006000.007000.007000.008000.008000.009000.009000.001.00e41.00e41.10e41.10e41.20e41.20e4Intensity,cpsIntensity,cps0.470.47细胞分裂素（CTK）标准品B1619上清液中细胞分裂素（CTK）Flunarizine-Tolbutamide(IS)(Unknown)271.300/171.800Da-sample43of87fromFlunarizine.wiffFlunarizine-Tolbutamide(IS)(Unknown)271.300/171.800Da-sample43of87fromFlunarizine.wiffArea:8.77e+004countsHeight:4.45e+004cpsRT:0.569minArea:8.77e+004countsHeight:4.45e+004cpsRT:0.569min0.10.10.20.20.30.30.40.40.50.50.60.60.70.70.80.80.90.91.01.01.11.11.21.21.31.31.41.4Time,minTime,min0.00.05000.05000.01.0e41.0e41.5e41.5e42.0e42.0e42.5e42.5e43.0e43.0e43.5e43.5e44.0e44.0e4Intensity,cpsIntensity,cps0.570.57Flunarizine-Flunarizine(Unknown)405.000/203.000Da-sample31of87fromFlunarizine.wiffFlunarizine-Flunarizine(Unknown)405.000/203.000Da-sample31of87fromFlunarizine.wiffArea:7.83e+003countsHeight:3.56e+003cpsRT:0.612minArea:7.83e+003countsHeight:3.56e+003cpsRT:0.612min0.10.