（正式版）DB44∕T 2681-2025 《日化用品致畸毒性斑马鱼评价指南》

44GuidelinesfortheevaluationofteratogenictoxicityofdailychemicalproductsusingI 2 2 2 3 3 3 3 4 5 6 7 8本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。1日化用品致畸毒性斑马鱼评价指南斑马鱼是一种原产于南亚地区的小型淡水鱼，具有繁殖能力强、胚胎透明和易于饲养等特点。无可观察效应浓度noobservedeffectconcent半数致死浓度halflethalconcentration,LC50半数致畸效应浓度halfteratogenesiseffectiveconcentration,EC5025.1.1通常宜配备斑马鱼养殖设备、繁殖配对器具、胚胎孵化用光照培养箱、带成像功能的显微镜等5.1.2根据试验需要，建议配备适宜的辅助设备，包括恒温培养箱、水质检测设备等。5.2主要试剂5.2.1斑马鱼养殖及试验宜使用标准稀释水，宜按照HJ1069中规定的斑马鱼养殖及试验用标准稀释5.2.2选择合适物质作为参比毒物，宜按照HJ1069中规定的参比毒物的种类及浓度设置方法执行。可选常用助溶剂如甲醇或二甲基亚砜等，根据受试物特点及已有关于助溶剂对斑马鱼毒性的研究6.2.1宜选择种质、遗传、病原及环境质量可控6.2.2获得高质量的斑马鱼胚胎是保障试验结果可靠的关键，标准HJ1069给出了斑马鱼胚胎获取的6.2.3通常宜选取受精后6h～8h健康的斑马鱼胚胎作为实验生物。当受试物毒性难以预估时，建议进行预试验。通常以较高稀释倍数设置连续的几个受试物浓度组 (如以5倍或10倍为梯度进行设置),确定100%死亡或100%致畸至无死亡或无致畸的浓度范围。如用到根据预试验或已有的相关毒性数据，确定受试物的测试浓度范围。测试浓度宜按照几何级数完成胚胎分放后，将含胚胎的测试容器放置于恒温培养箱或恒温室中，温度和光照等宜控制在适宜斑马鱼生长发育的范围，如温度通常为2对于不能确定理化性质是否稳定的受试物，可按需要定期更换测试溶液。间可依具体试验的需要设定，一般建议每24h观察并记录一次。附录B给出了各指标的参考特征，可参9数据处理试验结果宜同时满足对照组和助溶剂对照组胚胎死亡率和致畸率不大于10%，以及4结合LC50和EC50数据，进一步综合评估受试物致畸危害风险，附录C给出了常用的致畸危害法，可参考使用；在能提供充足科学依据情况下，也可选用其他致畸危害评估方解释致畸试验结果时，应注意种属的差异。试验结果从5(资料性)6统计并记录各组死亡胚胎个数，死亡判定依据参考国际通用斑马鱼胚胎发育图谱，逐一对比测试组与对照组斑马鱼胚胎各发育阶段组织和器官发育情况。国际通用斑马鱼胚胎发育图谱及各组织器官典型发育特征可在国际斑马鱼信息网站斑马鱼胚胎发育各组织器官常见典型致畸特征包括：头部的头盖/鳃盖骨异常、小眼、眼球突出、7致畸危害指数为半数致死浓度（LC50）与致畸危害指数数值越小，致畸毒性风险越小、对人体越安全。当致畸危害指数大于等于3时，表示8[3]OECDGuidelinesfortheTesti[4]KimmelCB,BallardWW,KiDevelopmentaldynamicassayandquantitativepredictionmodel[J].BirthDefectsRe[6]Panzica-KellyJM,Zhandechrionatedzebrafishteratogenicityassay[J].BirthDefectsResearch(PartB),2010Biota,2011,XLIV:63-7chemicalsfromzebrafishdevelopmentaltoxicitystudies[J].Reproductiusingzebrafishembryos[J].TheJournalofToxicologicalSciences,2014,39(3):453-4[10]JarqueS,Rubio-BrotonsM,IbarraJ