DB42∕T 1376-2018 《水稻抗褐飞虱抗性鉴定技术规程》

水稻抗褐飞虱抗性鉴定技术规程2018-09-20实施2018-09-20实施湖北省质量技术监督局发布 Ⅲ V 1 1 13.1水稻秧苗受害程度鉴定法 1 13.1.2水稻材料准备 13.1.3接虫 23.1.4接虫后的管理 23.1.5调查 2 2 2 23.2.2水稻材料准备 3 33.2.4接虫 33.2.5接虫后的管理 33.2.6调查 3 3 4 4 44.3秧苗移栽 4 4 44.6接虫后的管理 44.7调查 4 4 55.1植物抗虫性的机制 5 5附录A(资料性附录)水稻抗褐飞虱抗性鉴定调查表 6附录B(资料性附录)水稻褐飞虱的识别特征 7工Ⅲ本标准按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构与编写》给出的规则起草。请注意本标准的某些内容可能涉及专利。本标准的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由武汉禾泰青生物科技有限公司提出。本标准由湖北省农业厅归口管理。本标准起草单位：武汉禾泰青生物科技有限公司、武汉大学、湖北省农业科学院粮食作物研究所。本标准起草人：何青、姜伟华、宋心竹、祝莉莉、何光存、杜波、陈荣智、游艾青、李三和、V1下列术语和定义适用三本标室内鉴定resistanceevaluationinlabor定水稻上的表现情况，评定待鉴定水稻对褐飞虱的抗性水平。对褐飞虱的抗性水平抗虫对照B5theresistan抗虫对照B5含有水稻抗褐飞虱基因BPH14和BPH15,还有多个抗褐飞虱微效位点，“九五”国家感虫对照TN1thesuscoptiblecont感虫对照为台中本地1宽TaichungNative1,简写为TN1),国际水稻所鉴定为高感褐飞虱，其抗性级别为9级。在下口径为19.5cm、上口径29cm、高16cm的塑料桶中播5株TN1,罩上80目尼龙网罩。水稻长至分蘖盛期时，每株接入怀卵的褐飞虱短翅型雌成虫10头，让其在水稻植株上产卵繁殖。正常水分每年5月-9月在室外TN1植株上饲养褐飞虱，10月-来年4月在温室内TN1植株上饲养。将待鉴定的水稻材料和对照浸种48h-72h,在35℃恒温箱中催芽24h-48h。在上口径为9cm塑2料杯中装入水稻土至杯口下1cm处，备用。用镊子将正常发芽的水稻种子播种于泥面上。每杯播20粒种子，每份水稻材料播种三杯，设为3个重复。将播好种的塑料杯放入长71cm、宽46cm、高18cm的大面包盒中排列整齐，湿润管理。待秧苗长至3叶期进行间苗，每杯中只保留15株长势一致的水稻当塑料杯中待鉴定水稻材料长至3叶期，收集3龄褐飞虱若虫。并按每株秧苗8头若虫的量用吸管每天检查水稻秧苗受害情况。当感虫对照TN1的死苗率达到95%时，依据水稻苗期抗性鉴定分级评价标准(表1),调查每一秧苗的受害程度，并记载单株抗性级别于附录A表A.1中。单株抗性级别0未受害1第1片叶部分发黄，发黄部分不超过叶片面3第1-2片叶发黄，发黄部分不超过叶片面积的50%;或者第1片叶枯萎5第2-3片叶显著发黄，发黄部分超过叶片面积的50%;或79统计3次重复共45个单株抗性级别的平均值，按照表2的标准评定水稻材料的抗性级别。免疫(I)高抗(HR)抗虫(R)2.0<平均值≤4.0中抗(MR)4.0<平均值≤6.0感虫(S)6.0<平均值≤8.0高感(HS)在下口径为19.5cm、上口径29cm、高16cm的塑料桶中播5株TN1,罩上80目尼龙网罩。水稻长至分蘖盛期时，每株接入怀卵的褐飞虱短翅型雌成虫10头，让其在水稻植株上产卵繁殖。水稻苗放3于温室(27℃,12h光照),正常水分管理。繁殖得到的下一代刚羽化的短翅型褐飞虱雌虫作为抗性鉴将待鉴定的水稻材料和对照浸种48h-72h,在35℃恒温箱中催芽24h-48h。在上口径为9cm塑料杯中装入水稻土至泥面离杯口1cm处，备用。用镊子将正常发芽的水稻种子播种于泥面上。每杯播3粒种子，每份水稻材料播5杯。待秧苗长至6-7叶期，每杯中只保留2株，共保留10株长势一致的将Parafilm膜裁剪为2.5cm×5cm的长方形，对折后封口，制备成2cm×2cm大小的正方形蜡袋。取1.5ml离心管在高精度电子天平(1/100000g)上称取空管重量，之后将天平清零。用吸管吸取一头刚羽化的短翅型褐飞虱雌虫放入该离心管中，称取其体重并记录为体重A,只选取体重在叶期的水稻植株基部距离地面1cm以上部位，让蜡袋内的褐飞虱取食水稻绑上蜡袋的水稻放在温室内(27℃,12h光照),湿润水分管理。取1.5ml离心管在高精度电子天平(1/100000g)上称取空管重量，之后将天平清零。用吸管从蜡袋中吸出取食48h后成活的褐飞虱放入该离心管，称取其体重并记录为体重B。体重A和体重B的B——短翅型褐飞虱雌虫取食待鉴定水稻48h根据刚羽化的短翅型褐飞虱雌虫在待鉴定水稻植株上取食48h后的体重变化来评定水稻的抗性级别。统计5个水稻植株10个以上虫增重百分比的平均值按照表3的标准分级。表3褐飞虱增重率鉴定水稻抗性评价标准免疫(I)高抗(HR)0<平均值≤20抗虫(R)20<平均值≤40中抗(MR)40<平均值≤60感虫(S)60<平均值≤80高感(HS)4五月初，水稻材料的种子浸种48h-72h,在35℃恒温箱中催芽24h-48h后，均匀撒播于秧田中。水稻材料(包括待鉴定材料、感虫对照和抗虫对照)按照行距20cm,株距16.7cm,每行10株的规格单本移栽于鉴定圃内。每个小区种植100株，每份材料设置3个重复，采用完全随机区组设计。抗虫鉴定圃四周种植5行以上的感虫水稻TN1作为保护行。在下口径为19.5cm、上白径29cm、高16cm的塑料桶中播5株TN1,罩上80目尼龙网罩。水稻长至分蘖盛期时，每株接久怀卵的褐飞虱短翅型雌成虫10头，让其在水稻植株上产卵繁殖。正常水分当抗虫鉴定圃中的水稻材料长至分蘖期，用80目尼龙网罩住整个鉴定圃。在保护行、感虫对照、抗虫对照、待鉴定材料小区中人工接入褐飞虱。用量为每100株水稻材料接入约6000头2-3龄褐飞虱每周两次观察鉴定圃水稻材料的情况。当感虫对照小区内90%以上植株被害致死时，调查各小区统计3个重复的水稻死亡率，按照表4的标准评定水稻材料田间抗性级别。表4水稻田间抗虫性鉴定评价标准鉴定圃水稻死亡率(%)抗性级别0免疫(I)1高抗(HR)3抗虫(R)5中抗(MR)7感虫(S)9高感(HS)5植物抗虫性的机制以害虫和宿主植物的相互作用为基础，从生理功能的角度分为趋避性可精确控制水稻秧苗和褐飞虱的状态及数量，鉴定结果可靠性高褐飞虱增重可精确控制水稻秧苗和褐飞虱的状态及数量，鉴定结果可靠性高褐飞虱增重率法则度量了水稻对褐飞但是，对于一些抗生性相对较叁有趋避性和耐受性的水稻来说，则可用秧苗受害程度鉴定法来予以评6(资料性附录)水稻抗褐飞虱抗性鉴定调查表表A.1至A.3分别所示了水稻抗褐飞虱抗性鉴定调查中的水稻秧苗受害程度鉴定、褐飞虱增重率鉴定和水稻田间抗性鉴定调查表的样表。表A.1所示水稻秧苗受害程度鉴定调查的样表要求。表A.1水稻秧苗受害程度鉴定调查表单株抗性级别(1、2、3……15株)123表A.2所示褐飞虱增重率鉴定调查的样表要求。表A.2褐飞虱增重率鉴定调查表重量B(g)表A.3所示水稻田间抗性鉴定调查的样表要求。表A.3水稻田间抗性鉴定调查表重复1水稻死亡率(%)水稻死亡率(%)重复3水稻死亡率(%)7褐飞虱卵主要产在叶鞘中，排列成一条，称为“卵条”。卵粒长1.0mm,宽0.22mm,初产时乳白褐飞虱若虫分为5龄，体色分深浅两型。各龄若虫形态如下：1龄若虫体长1.1mm左右，体黄白色，无翅芽，腹部背面有一倒“凸”形斑纹；2龄若虫体长1.5mm左右，翅芽不明显，后胸稍长，胸后缘略向前凹；3龄若虫体长2mm左右，翅芽已明显，中后胸后缘向前凹成角状，前翅芽尖端不到后胸后缘；4龄若虫体长2.4mm左右，前