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文档简介
152024-05-31发布本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定I1范围本文件规定了燕麦炭疽病品种抗性室内鉴定技术中所需的材料准备、接种方法、调查和统计方法和抗性评价标准等内容。本文件适用于燕麦品种、品系、种质资源对炭疽病的室内抗性鉴定或病原菌的致病性测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。DB15/T2110高粱炭疽病抗性鉴定技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。燕麦炭疽病由禾生炭疽菌(ColletotrichumcerealeManns)侵染燕麦引起的病害。4材料准备4.1培养基PDA-燕麦秸秆培养基：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂粉18g,新鲜燕麦秸秆20g。将马铃薯切成1cm³小块，燕麦秸秆剪成1cm长的小段，用蒸馏水煮沸20min,浸出液将葡萄糖、琼脂粉充分溶解；121℃高压湿热灭菌20min,冷却至55℃,制作培养基平板。4.2病原菌分离和接种体制备燕麦禾生炭疽菌的分离、培养，按照DB15/T2110执行。分离得到的菌株接种于PDA平板，25℃黑暗条件下培养5d。用直径为5mm的打孔器取边缘菌丝，接种于PDA-燕麦秸秆培养基中，25℃黑暗条件下培养5d后，按照标准DB15/T2110进行诱导产孢。在诱导产孢的平板培养基中加入10mL无菌水，洗下分生孢子，并用无菌水调整孢子浓度到1×10⁶个/mL,将孢子悬浮液作为接种材料。4.3燕麦幼苗的准备点种前，用5倍于种子体积的50℃~55℃热水浸种15min～20min，或用0.3%～0.5%的次氯酸钠溶液浸泡15min，或40%过氧乙酸8在直径为12.5cm培养皿中铺上4层湿润纱布；将燕麦种子在纱布上平铺一层，种子上覆盖4层湿润纱布；培养皿置于25℃、80%RH、在口径为10cm的营养钵中装入2/3体积的营养基质，并浇透水，每钵中播撒催芽后的燕麦种子20中加入深度为1cm的水保湿，室温23℃,黑暗处理24h后，置于25℃、16h光照，22℃、8h黑暗条燕麦炭疽病发生时病斑沿叶脉呈梭形。喷雾接种的燕麦植株在培养30d后调查第2和第3片叶的病按照附录A表A.1燕麦抗炭疽病室内鉴定病情级
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