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152023-12-29发布本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定I北虫草菌种制作技术规程NY/T528食用菌菌种生产技术规程用液体培养基在生物发酵罐等容器中，通过深124.2场地选择水电便利，通风良好、空间充足，配料室配磅秤、天平、搅拌机，分装室洁净、水电畅通、通风良好，配有恒温培养箱或培养架、摇床、发酵罐、空调、杀菌设备等。3水电畅通，配有显微镜、pH计、菌落计数器等。玻璃试管(18mm×180mm或20mm×200mm)或平板培养皿，(90mm×90mm),试管塞带有砂芯或者不带砂芯的硅胶塞。耐高温高压的透明洁净摇瓶或聚丙烯塑料瓶。4.4.3栽培种耐高温高压的带有透气盖(膜)玻璃瓶、聚丙烯塑料瓶或不同容积规格发酵罐。4.5原料葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、磷酸二氢钾等化学试剂，马铃薯、小麦、麦麸等要求新鲜、干燥、无虫、无霉变。5菌种制备5.1培养基制备配方为马玲薯200g(煮汁)、葡萄糖20g、琼脂20g、蛋白胨5g、牛肉膏0.5g、酵母粉5g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g,加水定容1000mL,pH6.5～7.0。分装至试管中，分装量掌握在试管长度的配方为马玲薯200g(煮汁)、葡萄糖20g、蛋白胨5g、牛肉膏0.5g、酵母粉5g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g,加水定容1000mL,pH6.5～7.0。将液体培养基分装至容器内，分装量不超总容积的3/5。5.1.3栽培种制备配方和方法同原种，分装量不超过摇床培养容器或发酵罐总容积的3/5。培养基采用常压或高压灭菌，在高压121℃~123℃(0.11MPa～0.15MPa)条件下灭菌20min~25min,常压100℃~105℃灭菌10h～12h,自然冷却到50℃左右时，取出试管，摆放斜面，原种和栽培种取出备用。在超净工作台上，取一段消毒好的子实体或培养的菌丝体放入试管培养基质中间部位，操作过程按照NY/T1731的规定执行。4每升接入4～5块(2mm×2mm)母种，迅速置于原种培养基内，及时盖上瓶盖，所有操作按照NY/T528的规定执行。5.3.3栽培种按栽培培养基体积的2%取原种，迅速放入栽培种培养基内，及时盖上瓶盖，所有操作按照NY/T528的规定执行。5.4培养将接好的试管置于20℃的恒温培养箱中暗培养6d～8d,长至4cm~5cm时使用，或转置于光照强度为200Lx下培养2d～3d转色后使用。5.4.2原种和栽培种置于18℃~22℃、120r/min~150r/min可控温摇床上或发酵罐中暗培养5d~7d,当培养基颜色变为棕色或黄白色，且有大量菌丝碎片，不浑浊。取少量培养后的菌种在显微镜上进行检测，无杂菌、无异味，有北虫草菌种特有的清香味即合

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