CN120204234A 11βHSD1通路活性抑制剂在制备治疗青光眼睫状体炎综合征药物上的应用

(19)国家知识产权局(10)申请公布号CN120204234A(71)申请人温州医科大学附属眼视光医院地址325000浙江省温州市学院西路270号(72)发明人张绍丹梁远波刘醉梦谢彬涛解彦茜(74)专利代理机构温州金瓯联合专利代理有限公司33601专利代理师王宏雷A61K31/56(2006.01)A61K31/4545(2006.01)A61K9/08(2006.01)(54)发明名称11β-HSD1通路活性抑制剂在制备治疗青光眼睫状体炎综合征药物上的应用一种11β-HSD1通路活性抑制剂在制备治疗青光眼睫状体炎综合征药物上的应用，通过特异性抑制眼部11β-HSD1活性，能够有效纠正眼局部皮质类固醇代谢失衡，缓解盐皮质激素过剩的生理效应，同时实现减少房水生成与减轻眼部炎症，适用于治疗青光眼睫状体炎综合征及其他与眼部11β-HSD1活性增高的相关疾病，本发明具21.11β-HSD1通路活性抑制剂在制备治疗青光眼睫状体炎综合征药物上的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的11β-HSD1通路活性抑制剂为11β-拟似剂的浓度为0.1-20mg/ml。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的治疗青光眼睫状体炎综合征药物为滴眼液。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的治疗青光眼睫状体炎综合征药物为治疗11β-HSD1活性增强引起的青光眼睫状体炎综合征药物。6.11β-HSD1通路活性抑制剂在制备治疗眼部11β-HSD1活性增强相关疾病药物上的应7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的眼部11β-HSD1活性增强相关疾病为眼部11β-HSD1活性增强及其导致的局部皮质类固醇代谢失衡相关疾病。8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的11β-HSD1通路活性抑制剂为11β-拟似剂的浓度为0.1-20mg/ml。311β-HSD1通路活性抑制剂在制备治疗青光眼睫状体炎综合征药物上的应用技术领域[0001]本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种11β-HSD1通路活性抑制剂在制备治疗青光眼睫状体炎综合征药物上的应用。背景技术[0002]青光眼睫状体炎综合征(PSS),简称青睫综合征，是一种反复发作且具有自限性前部葡萄膜炎。我国PSS相对高发，尤其长江中下游地区PSS患病率约为西方国家的19倍，是我国重要的眼科问题。PSS临床表现主要为眼压的急剧升高、羊脂状角膜后沉积物(KP)以及轻度视力下降。以往认为PSS预后良好，但最新的研究发现，疾病反复发作可使相当一部分患者发生不可逆的视功能损伤，严重影响视觉质量和生活质量。目前PSS的发病机制仍不明确，临床缺乏理想治疗手段。目前临床治疗仍主要以激素抗炎和降眼压药物对症治疗为主。激素治疗可以缩短病程，但不能避免和减少疾病复发。且长期激素应用还可能导致激素依赖和激素性青光眼，以及诱发和加速白内障形成，进一步加重视觉障碍。降眼压药物因未对疾病病因进行干预，因此通常作为辅助治疗手段。最近巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)感染被认为是PSS的重要病因，高达52.2%-56.97%的PSS患者可检测到CMV感染，但这一水平与人群总体感染率无明显差异，且超过1/3的患者检测不到任何病毒感染的证据，提示病毒感染并不能解释全部的PSS,PSS存在病毒之外的其他致病因素。同时，抗病毒治疗虽可一定程度降低疾病复发，但单独应用的治疗效果并不理想。因此，深入探索PSS的发病机制，开发有效的治疗靶点和策略，减少PSS发作频率、降低或避免视功能损伤，是眼科领域的重要需求。发明内容[0003]为了解决现有技术存在的技术缺陷，本发明提供了一种11β羟类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)通路活性抑制剂在制备治疗青光眼睫状体炎综合征药物上的应用，通过抑制11β-HSD1活性来纠正局部皮质类固醇代谢失衡，进而减少房水生成和减轻眼部炎症的药物及其他策略的应用，该类药物可用于治疗青光眼睫状体炎综合征及其他与眼部11β-HSD1活性增高的相关疾病，具有显著的临床治疗潜力。[0004]本发明采用的技术解决方案是：11β-HSD1通路活性抑制剂在制备治疗青光眼睫状体炎综合征药物上的应用。拟似剂。[0007]进一步地，所述的治疗青光眼睫状体炎综合征药物为滴眼液。[0008]进一步地，所述的治疗青光眼睫状体炎综合征药物为治疗11β-HSD1活性增强引4起的青光眼睫状体炎综合征药物。[0009]11β-HSD1通路活性抑制剂在制备治疗眼部11β-HSD1活性增强相关疾病药物上的应用。导致的局部皮质类固醇代谢失衡相关疾病。拟似剂。[0013]本发明的有益效果在于：本发明提供了一种11β-HSD1通路活性抑制剂在制备治疗青光眼睫状体炎综合征药物上的应用，通过特异性抑制眼部11β-HSD1活性，能够有效纠正眼局部皮质类固醇代谢失衡，缓解盐皮质激素过剩的生理效应，同时实现减少房水生成与减轻眼部炎症，适用于治疗青光眼睫状体炎综合征及其他与眼部11β-HSD1活性增高的相关附图说明[0014]图1为利用免疫组织化学染色的方法证实人眼睫状体无色素上皮高表达11β-体局部的皮质类固醇代谢中发挥关键调节作用；其中图1A.青睫综合征患者和对照组患者房水皮质醇含量对比；图1B.青睫综合征患者和对照组患者房水可的松含量对比；图1C.青[0015]图2为青睫综合征患者房水中皮质醇及反映11β-HSD1活性的皮质醇/可的松比值较对照组(单纯白内障患者),以及同样具有眼压显著升高的原发性开角型青光眼(POAG)和慢性闭角型青光眼(CACG)患者显著升高；其中图左上：人眼睫状体形态；图右上：人眼睫状质激素受体GR表达和定位的免疫组化检测。[0016]图3为在健康小鼠中进行的0.1-100mg/ml11β-HSD1抑制剂CBX眼表毒性检测；可见0.1-20mg/ml的CBX滴眼液具有较好的安全性，而50mg及100mg的CBX滴眼可引起明显的角膜上皮损伤。[0017]图4为不同浓度CBX滴眼对于健康小鼠眼压的影响；可见0.1-100mg/ml的CBX局部滴眼，对于小鼠的眼压无明显影响，同其用药前基线以及对侧对照眼相比，不存在明显的降眼压作用。[0018]图5为小鼠在体实验证实，采用小鼠睫状体无色素上皮细胞特异性11β-HSD1表达上调成功构建青睫综合征动物模型，睫状体无色素上皮细胞11β-HSD1过表达可很好模拟临床青睫综合征患者的主要临床特征，即显著升高眼压及对地塞米松的降眼压效应。同时，持11β-HSD1在青睫综合征中的致病作用，及作为治疗干预靶点的可行性；其中图5A.转染病毒的玻璃体腔注射；图5B.Westernblot和免疫荧光染色证实小鼠睫状体无色素上皮细5胞的特异性转染和11β-HSD1表达上调；图5C.模型小鼠具备眼压升高以及对地塞米松的降眼压反应这两个青睫综合征主要临床特征；图5D.11β-HSD1抑制剂CBX和AZD407可以有效降低模型小鼠眼压，其效果与地塞米松相当。具体实施方式[0019]下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获的所有其他[0020]实施例1本部分实验对人眼睫状体11β-HSDs以及皮质类固醇受体的表达情况进行观察。收集医院眼库用于角膜移植捐献者供体眼球的睫状体组织，利用免疫组化和westernblot方些结果提示，11β-HSD1在人睫状体的皮质类固醇代谢调控中发实施例2.本部分实例通过房水样本的高效液相色谱串联质谱法检测，证青睫综合征患者存在疾病特异性的眼局部皮质类固醇代谢失衡和11β-HSD1活性增强。对照组：拟行白内障手术治疗的单纯的年龄相关性白内障患者PSS急性发作组：未接受任何治疗的青睫综合征急性发作期患眼，眼压>21mmHgPOAG组：近一月内未使用过任何可能影响房水内皮质类固醇代谢药物的原发性开CACG组：近一月内未使用过任何可能影响房水内皮质类固醇代谢药物的原发性慢患者知情同意后，眼周及结膜囊冲洗消毒，使用1ml注射器进行前房穿刺并抽取房水0.05-0.1ml,推注至无菌EP管，置于-80摄氏度冻存。利用高效液相色谱串联质谱法检测不同组别房水样本皮质醇和可的松的含量，并计算皮质醇/可的松比值，用于11β-HSD1活性评价。结果显示，同对照组相比，PSS患者房水中活性的皮质压升高的慢性闭角型青光眼(CACG)和原发性开角型青光眼(POAG)患者皮质醇含量未见明显变化。PSS患者房水中无活性的可的松含量与其他各组无显著变化。作为11β-HSD1活性指标的皮质醇/可的松比值，在PSS患者房水中显著升高，这一指标在CACG和POAG患者中未见明显变化。上述结果提示11β-HSD1活性增强在PSS发作中发挥特异性作用，11β-HSD1可能成为PSS的治疗新靶点。[0022]实施例3在部分实验中，我们首先对11β-HSD1抑制剂CBX局部滴眼的眼表毒性进行检测。6角膜上皮损伤，滴眼6天时可见小鼠角膜上皮的粗糙、局部上皮缺损，以及角膜荧光素染色的局部荧光积存。观察期末，可见小鼠角膜的混浊和云翳。提示眼表毒性。故在小鼠在体实在部分实验中，我们对11β-HSD1抑制剂CBX对正常健康小鼠眼压的影响进行了观察。不同浓度CBX滴眼液的配置如实例3。实验选取6-8W成年健康C57BL/6J雌性小鼠，给予每100mg/ml的CBX局部滴眼，对于小鼠的眼压无明显影响，同其用药前基线以及对侧对照眼相本部分实验利用特异性上调小鼠睫状体无色素上皮细胞11β-HSD1的方法构建青疗作用。毒2ul,对照组小鼠玻腔注射AAV-CAG-EGPF空白病毒2ul。分别于注射前和注射后不同时间点使用icare眼压计进行眼压测量。造模后4周时进行眼球取材，利用westernblot和免疫荧光染色的方法观察模型小鼠睫状体11β-HSD1的表达和定位。结果显示，单次玻璃体腔病毒转染即可有效和特异性的引起小鼠睫状体无色素上皮细胞11β-HSD1表达的增加。病毒转染后第1周后可以检测到模型小鼠眼压开始逐渐上升，第4周开始达到峰值并维持在高眼压平台。在第4周眼压峰值时给予0.1%地塞米松凝胶日2次滴眼，模型小鼠眼压显著下降，而在正常小鼠中使用上述0.1%地塞米松凝胶滴眼则表现为显著的眼压升高。上述特点与青睫综合征患者高度一致。不仅进一步支持11β-HSD1在青睫综合征中的致病作用，同时也为以11β-HSD1为靶点的青睫综合征治疗新策略的开发提供了依据。为了验证这一假设，我们进一低模型小鼠的眼压，其降眼压幅度与地塞米松在该模型小鼠中的降眼压效果相当。[0026]我们通过靶向上调了小鼠睫状体无色素上皮细胞11β-HSD1表达，成功诱导出眼压升高，且对激素具有降眼压反应的PSS特异性临床特征表现，进一步证明11β-HSD1在PSS发小鼠进行处理，观察到两种11β-HSD1抑制剂都可以成功降低模型小鼠的眼压，效果与激素凝胶相当。如图3所示，特异性上调睫状体无色素上皮细胞11β-HSD1可以成功诱导建立与鼠展示出与地塞米松相当的治疗效果。基于此，本发明提出利用11β-HSD1活性抑制性药物或基因干预等策略的眼局部给药治疗PSS和眼局部11β-HSD1活性增强相关疾病，提高治疗的安全性和有效性。[0027]结论7制性药物或基因干预等策略的眼局部给药治疗PSS和眼局部11β-HSD1活性增强相关疾病，提高治疗的安全性和有效性。[0028]本发明的创新点在于：1、理论创新：PSS发病机制不清，几十年来其发病机制理论缺少突破。本发明的核[0029]2、靶点新颖：相较于目前缺乏特异性的广谱免疫炎症抑制方法，首次提出11β-HSD1活性增强可能作为PSS等疾病的特异性干预靶点。作用。本发明针对PSS等存在眼局部11β-HSD1功能上调，提供浓度0.1-20mg/ml的CBX和AZD4017滴眼液作为治疗药物，表现出良好的降眼压效果，且局部和全身副作用较小。同时也避免了目前常规激素治疗带来的激素相关并发症。[0031]4、策略创新：本发明旨在保护具有眼部11β-HSD1活性抑制效果的药物及其他策[0032]本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例，凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰，应视为本发明的保护范围。8