异常图谱解读和解决方案讲课文档

异常图谱解读和解决方案第一页，共48页。前引

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选择BIO-RAD？第二页，共48页。前引

第三页，共48页。主要内容一正确认识血红蛋白变异体二识别血红蛋白变异体的意义三血红蛋白变异体图谱分析和案例四变异体解决方案

第四页，共48页。主要内容变异体的重要性哪家结果测得更准“测得准”和“能分辨”哪个更重要

第五页，共48页。一正确认识血红蛋白变异体

血红蛋白变异体是什么？

种类？分布？

第六页，共48页。什么是血红蛋白变异体？血红蛋白变异体：是多种异常形式的血红蛋白。红细胞中的血红蛋白由亚铁血红素和珠蛋白组成，当珠蛋白基因突变导致组成珠蛋白的氨基酸改变，就会产生血红蛋白变异体。血红蛋白的结构、性质、合成率以及稳定性发生改变。

第七页，共48页。血红蛋白变异体的发生率全世界已经发现了超过一千种血红蛋白变异体全球的血红蛋白变异体发生率的最新数据是7%*非洲裔美国人：HbS7.8%；HbC2.3%1988年,2.5‰,河南**2001年,3.2‰,丝绸之路***云南：4%云南省的阿昌族HbE的发病率为41.2%*KohneE.Hemoglobinopathies:clinicalmanifestations,diagnosis,andtreatment.1.DtschArzteblInt.2011;108(31-32):532-540.**河南省异常血红蛋白的调查与化学结构的分析研究,新乡医学院学报,1988,(02)9-12***中国丝绸之路地区血红蛋白病的遗传流行病学的特点，人类学学报，2001，V20第八页，共48页。常见的血红蛋白变异体类型地区临床HbS约8%非裔美国人镰状细胞病患者主要的血红蛋白.镰状红细胞会阻塞小血管，阻碍血液循环并伴疼痛，同时红细胞携氧能力和寿命均下降。HbC约2-3%西非裔美国人血红蛋白C病很少见且并不严重。通常引起少量贫血和轻微脾肿大。HbD主要分布在东南亚通常并不发病，而会导致血红蛋白分子功能性和稳定性发生改变。HbE是最普遍的β链血红蛋白变异体.在东南亚特别是柬埔寨、老挝、泰国等东南亚裔人口中较普遍通常引起轻微的溶血性贫血、小红细胞症以及轻度脾肿大。血红蛋白单β链基因E突变不会出现症状，但合并有其他β链突变，如β地中海贫血特征例外。第九页，共48页。检测方法其它少见的血红蛋白变异体：

-HbG、HbJ、HbM、HbF、Bart血红蛋白……实验室检查：

筛查：全血细胞计数(CBC)

血红蛋白变异体检测

–电泳和HPLC

诊断：DNA分析

第十页，共48页。

二识别血红蛋白变异体的意义

血红蛋白变异体对HbA1c的影响？

第十一页，共48页。二识别血红蛋白变异体的意义VII-7.1%G7-4.9%

差值：2.2%？

第十二页，共48页。HbA1c与并发症（DCCT\UKPDS）

与糖尿病相关的死亡21%心脏病14%43%12%卒中HbA1c1%微血管并发症，如肾病和失明37%StrattonIM,etal.UKPDS35.BMJ.2000;321:405-12.第十三页，共48页。不能鉴定变异体后果

变异体如何影响A1C的检测并干扰诊断呢？有变异体会使检测结果出现误差假性增高，医生会增加剂量或更换用药，结果导致低血糖，严重症状昏迷或死亡假性降低，医生会改变治疗方案，结果导致血糖过高，增加眼部、神经、肾脏并发症尽管不是所有的变异体都会导致结果影响，但医生需要一个准确的A1C结果美国糖尿病研究院，NIH，DCCT的研究院第十四页，共48页。变异体影响图示

第十五页，共48页。三血红蛋白变异体图谱分析和案例1通过图谱分辨血红蛋白变异体2血红蛋白变异体案例图谱

第十六页，共48页。1通过图谱分辨血红蛋白变异体正常的血红蛋白形式包括：

HbAHbA2HbF

成人95%-98%2%-3%成人2%

胎儿血红蛋白HbF在胎儿及出生6个月以内的新生儿体内为高浓度，6个月后基本降为成人水平第十七页，共48页。糖化和非糖化血红蛋白

HbHbA0HbA1HbA1aHbA1bHbA1cHbA(

ßß)HbA2(

)HbF(

)95%<2%1-3.5%成人血红蛋白分三种HbA为主要成人Hb非糖化Hb糖化Hb6-8%87-89%血红蛋白第十八页，共48页。正常成人中各组分血红蛋白含量

Hb的组成%ofHbHb与糖类的结合HbA1a<1%

链NH2端与其它糖成分结合的产物HbA1b<1%HbA1c进一步代谢的产物HbF<2%胎儿血红蛋白，HPLC可分辨LA1c<1%血红蛋白形成HbA1c之前的中间产物，HPLC可分辨

HbA1c4~6%

链NH2端与葡萄糖结合的产物HbA0>90%

约有8%~10%被糖化，是链NH2端及、链的赖氨酸、-氨基酸与葡萄糖结合的产物变异体（S,C,D,E）0%6.8%的人群含有血红蛋白变异体，HPLC可分辨第十九页，共48页。各组分在图谱中分布

HbA1a&HbA1b

HbA的次要组分前HbA1c(希夫氏碱)和氨基乙酰化的Hb

HbA1c

A0总面积为

1M-5M

A1c结果第二十页，共48页。2血红蛋白变异体图谱案例根据变异体影响部位的不同，分为：

前-Unkown峰、P3\P4峰A0

后-

Variant峰、S\C\D\E峰A1c附近

--拖尾、阴影拟合不好、无A1c峰F附近

--F\A1a\A1b异常增高

第二十一页，共48页。A0后变异体案例

A0后E\D峰第二十二页，共48页。

A0后S峰第二十三页，共48页。A0后变异体

A0后变异窗口第二十四页，共48页。A0前变异体案例

A0前Unkown峰第二十五页，共48页。A0前变异体案例

A0前P3峰>10%第二十六页，共48页。A1c附近变异体

A1c拖尾、异常高值第二十七页，共48页。A1c附近变异体

没有A1c峰第二十八页，共48页。A1c附近变异体

A1c异常高值第二十九页，共48页。A1c附近变异体

A1c峰拟合不好第三十页，共48页。F附近变异体

F和A1b异常高第三十一页，共48页。特别案例资料：男、17岁、车祸骨折、失血

第三十二页，共48页。四变异体解决方案

伯乐结果准不准？能否应用于临床？怎么发报告？第三十三页，共48页。准不准？准不准？第三十四页，共48页。某医院一个样本的例子A0峰后有Variant峰计算时分母未包括Variant峰面积该样本HbA1c结果DCA2000:6.5%D-10:6.7%爱科来HA8160：5.24%G7:4.8%临床反馈：该样本来自一个2型糖尿病人第三十五页，共48页。%HbA1c计算原理GlycatedHbNonGlycatedHbHbA1aHbA1bHbFLA1cA1cP3P4A0HbCVariantWindow第三十六页，共48页。准不准？计算原理分析：伯乐的仪器可以准确的辨识出含有变异体的样本,可以帮助临床更准确判断病人的具体情况

伯乐能分辨变异体计算中能排除变异体峰面积结果更准确第三十七页，共48页。NGSP数据

NGSP官方网站/

第三十八页，共48页。爱科莱和东漕厂家声明

爱科莱和东漕在中国市场的快速模式试剂：当有变异体时，结果可能偏低第三十九页，共48页。BIO-RAD厂家说明书

第四十页，共48页。能否应用于临床？能否应用于临床？

A1c地位？第四十一页，共48页。糖尿病文献《2013版中国2型糖尿病防治指南》HbA1c用于糖尿病血糖监测：

HbA1c是评价长期血糖控制的金指标，也是指导临床调整治疗方案的重要依据。对于患有贫血和血红蛋白异常疾病的患者，HbA1c结果是不可靠的。可用血糖、糖化血清白蛋白或糖化血清蛋白来评价血糖的控制。HbA1c测定所采用的方法应可以溯源到DCCT中曾使用过的HbA1c检测方法。（第455页）第四十二页，共48页。判断！

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哪个更重要？？

方法学不受变异体干扰能发现变异体第四十三页，共48页。怎么发报告？

怎么发报告？

第四十四页，共48页。怎么发报告？第一步：结果判断第二步：发报告

第四十五页，共48页。怎么发报告？第一步：结果判断有无变异体报告准则：

基本要求质控通过总面积达标（VII：150-450W、D10：100-400W）A1c峰和A0峰被恰当的识别（参考分析柱说明书出峰时间窗口）检查基线：基线是平的，没有漂移。线性范围：3.1-18.5%（超过范围结