CN119385914B 一种具有促进外敷药物透皮吸收的制备方法及其外敷药物组合物和应用 （三亚中心医院(海南省第三人民医院、三亚中心医院医疗集团总院)）

(19)国家知识产权局(10)授权公告号CN119385914B(65)同一申请的已公布的文献号(73)专利权人三亚中心医院(海南省第三人民医院、三亚中心医院医疗集团总地址572000海南省三亚市天涯区解放路1154号专利权人广东省中医院海南医院(72)发明人林称心潘能毅李光智林如意(74)专利代理机构海南万博知识产权代理事务所(普通合伙)46013专利代理师张耀婷A61K9/00(2006.01)A61K36/481(2006.01)A61K47/24(2006.01)A61P3/10(2006.01)A61P17/02(2006.01)A61K31/045(2006.01)(56)对比文件期),27-29.液外敷治疗糖尿病足部溃疡的临床应用研究”.《中国保健营养》.2013,第3卷摘要及2.2及正文最后1段.审查员吴冲(54)发明名称一种具有促进外敷药物透皮吸收的制备方法及其外敷药物组合物和应用本发明提供一种具有促进外敷药物透皮吸收的制备方法及其外敷药物组合物和应用，该组还包括燕麦β-葡聚糖、月桂氮卓酮等。黄芪采用特定蜜炙工艺，鸡屎藤提取物经超临界CO₂萃取。制备时，先对部分药材提取浓缩得浸膏，其余药材研粉加入浸膏混合，再将燕麦β-葡聚糖与卵磷脂制成纳米乳液滴加入混合物，经梯度升温加入月桂氮卓酮并搅拌，最后加珍珠粉制成外敷剂用，有效促进药物吸收利用，该药物组合物具有溃疡愈合、控制感染、缓解疼痛和改善神经功能等功效，适用于外敷治疗糖尿病足。21.一种具有促进外敷药物透皮吸收的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：目筛，加入6-8体积倍量的60-80%乙醇超声功率为300-500W,超声时间为30-40分钟，合并提取液，减压浓缩至相对密度为1.05-1.15的浸膏；分别研成细粉，过80-100目筛，得到细粉加入到上述浸膏中，加热至40-50℃,采用高剪切分散，高剪切分散机的转速为2000-3000rpm,处理时间为5-10min,使其充分混合均匀，得到混合物；S3、将燕麦β-葡聚糖、卵磷脂溶解在1-3体积倍的去离子水中，搅拌通过高压微射流乳化，高压微射流乳化的压力为100-200MPa,温度20-40℃,流量控制在10-30L/h,微通道直径为50-200μm,循环次数为3-6次，得到乳液滴再加入到上述混合物中，搅拌均匀后，梯度升温加入月桂氮卓酮，继续搅拌10-15分钟，最后加入珍所述梯度升温分三步加入月桂氮卓酮，第一阶段：先将药物混合物的温度30-35℃,加入1/3的月桂氮卓酮，搅拌均匀，第二阶段：温度升高到40-45℃,加入剩余月桂氮卓酮的一终药物混合物；S4、将上述最终药物混合物制成外敷剂型；所述外敷剂型的药物组合物包括以下重量份原料：地骨皮12-18份、川牛膝10-13份、黄冰片1-3份、燕麦β-葡聚糖5-12份、月桂氮卓酮3-6份、卵磷脂2-5份和珍珠粉的粒径为20-50nm;所述黄芪采用蜜炙黄芪，是将黄芪与100-118℃的炼蜜按照10:1-2屎藤提取物采用超临界CO₂萃取法获得，萃取压力为20-30MPa,萃取温度为40-50℃,CO₂流量为15-25kg/h,萃取时间为2-4小时，分离过滤，得到鸡屎藤提取物。2.如权利要求1所述的一种具有促进外敷药物透皮吸收的制备方法，其特征在于：所述外敷剂型的药物组合物包括以下重量份原料：地骨皮15份、川牛膝12份、黄芪25份、丹参18份和珍珠粉3份。3.根据权利要求1或2所述的制备方法制得的外敷剂型在制备治疗糖尿病足药物中的应用。3一种具有促进外敷药物透皮吸收的制备方法及其外敷药物组合物和应用技术领域[0001]本发明涉及药物制备技术领域，特别涉及一种具有促进外敷药物透皮吸收的制备方法及其外敷药物组合物和应用。背景技术[0002]糖尿病足是糖尿病常见且严重的慢性并发症之一，主要因糖尿病患者长期处于高血糖状态，致使神经病变、血管病变以及局部感染等多种因素相互作用而引发。糖尿病神经病变可导致足部感觉减退或丧失，使患者难以察觉足部的损伤；血管病变则造成足部血液在上述病理基础上极易迅速蔓延且难以控制，严重时可导致坏疽，甚至面临截肢的风险，给患者的身心健康带来极大痛苦，同时也给家庭和社会造成沉重的经济负担。[0003]目前，针对糖尿病足的治疗方法多种多样。在药物治疗方面，西药多采用抗生素控制感染、改善微循环药物促进血液循环以及神经营养药物修复神经损伤等，但长期使用抗生素易引发耐药菌产生，且这些药物往往只能针对单一病理环节进行干预，难以从整体上综合改善糖尿病足的复杂病情。例如，某些抗生素虽然能够在一定程度上抑制细菌生长，但对于已经受损的神经和血管组织修复作用有限。[0004]中医在糖尿病足治疗中也有诸多应用，如中药内服以调节机体气血阴阳，但对于局部病变的直接作用相对较弱；中药外洗或熏蒸虽能在一定程度上改善局部症状，但药物有效成分的渗透吸收效率较低，难以深入病变组织发挥持久现有的糖尿病足外敷药物在配方组成上不够全面，可能仅侧重于活血化瘀或清热解毒某一方面，缺乏对糖尿病足多病因、多病理机制的综合考量，导致治疗效果不尽如人意，难以满足临床治疗糖尿病足的迫切需求。因此，研发一种更为高效、全面且安全的糖尿病足治疗药物组合物具有极其重要的现实意义。发明内容[0005]鉴于此，本发明提出一种具有促进外敷药物透皮吸收的制备方法及其外敷药物组[0006]本发明的技术方案是这样实现的：一种具有促进外敷药物透皮吸收的制备方法，包括以下步骤：40-60目筛，加入6-8体积倍量的60-80%乙醇溶液，浸泡1-2小时后，采用超声辅助提取1-3次，每次超声功率为300-500W,超声时间为30-40分钟，合并提取液，减压浓缩至相对密度为1.05-1.15的浸膏。冰片分别研成细粉，过80-100目筛，得到细粉加入到上述浸膏中，加热至40-50℃,采用高剪4[0009]S3、将燕麦β-葡聚糖、卵磷脂溶解在1-3体积倍的去离子水中，搅拌形成均匀的分散液，通过高压微射流乳化，得到乳液滴再加入到上述混合物中，搅拌均匀后，梯度升温加[0010]所述S3的梯度升温分三步加入月桂氮卓酮，第一阶段：先将药物混合物的温度30-35℃,加入1/3的月桂氮卓酮，搅拌均匀，此时较低的温度可以使月桂氮卓酮缓慢地与其他成分相互作用，初步改善药物混合物的透皮性能，在这个温度范围内，月桂氮卓酮能够更好地渗透到药物分子之间，进一步增强其促进药物透皮吸收的作用。第二阶段：温度升高到40-45℃,加入剩余月桂氮卓酮的一半，继续搅拌；在这个温度范围内，月桂氮卓酮能够更好地渗透到药物分子之间，进一步增强其促进药物透皮吸收的作用；第三阶段：将温度升高到50-55℃,加入最后的月桂氮卓酮，充分搅拌；通过这种梯度升温添加的方式，可以使月桂氮卓酮更均匀地分布在药物组合物中，并且充分发挥其透皮促进剂的功能，提高药物对糖尿病足病变部位的渗透能力。[0011]S4、将上述最终药物混合物制成外敷剂型。[0012]进一步的，所述S2的高剪切分散机的转速为2000-3000rpm,处理时间为5-10min。[0013]进一步的，所述S3的高压微射流乳化的压力为100-200MPa,温度20-40℃,流量控制在10-30L/h,微通道直径为50-200μm,循环次数为3-6次。[0014]进一步的，所述外敷剂型的药物组合物，包括藤提取物1-3份、冰片1-3份、燕麦β-葡聚糖5-12份、月桂氮卓酮3-6粉1-4份，所述珍珠粉的粒径为20-50nm。[0015]进一步的，所述外敷剂型的药物组合物，包括以下重量份原料：地骨皮15份、川牛[0016]进一步的，所述黄芪采用蜜炙黄芪，是将黄芪与100-118℃的炼蜜按照10:1-2的重[0017]进一步的，所述鸡屎藤提取物采用超临界CO₂萃取法获得，萃取压力为20-30MPa,萃取温度为40-50℃,CO₂流量为15-25kg/h,萃取时间为2-4小时，分离过滤，得到鸡屎藤提取物。[0018]进一步的，所述的制备方法制得的外敷剂型在制备治疗糖尿病足药物中的应用。[0020]本发明方剂的配伍遵循君臣佐使的原则，以达到协同增效、平衡药性并精准针对改善足部血液循环，消除瘀血阻滞，且其止血生肌之功可有效控制创面出血，促进新肉生参活血化瘀、凉血消痈并引药至病所，可引诸药直达病所，为臣药中的关键，乳香与没药活血行气止痛、消肿生肌，辅助君药强化化瘀消肿止痛之效。佐药地骨皮清热凉血、金银花二CN119385914B说明书5药可清除局部热毒，预防和控制感染扩散，同时可制约君药中温燥之性，使全方温而不燥，无伤阴之弊，共为佐药以清解热毒，薜荔与胆木清热利湿解毒改善局部环境，冰片开窍醒神、清热止痛、防腐生肌且促透皮吸收，鸡屎藤提取物佐助改善症状，共同助力君臣药发挥作用。使药燕麦β-葡聚糖、月桂氮卓酮、卵磷脂促进药物透皮，珍珠粉收敛生肌并调和诸药，益智仁与降香黄檀佐助君臣药且调和药性，全方诸药合用，共施补气活血、清热除湿、解毒消肿、生肌止痛之功，多靶点针对糖尿病足病因病机，促进愈合与症状缓解。具体实施方式[0021]为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。[0022]本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。[0023]本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。[0024]以下依据《中国药典[0025]介绍主要原料药的基本情况：[0026]地骨皮：性味归经：味甘，性寒；归肺、肝、肾经。功能主治：凉血除蒸，清肺降火。[0027]川牛膝：性味归经：性平；味甘、微苦；归肝经、肾经。功能主治：活血通经，祛风除湿，利尿通淋。[0028]丹参：性味归经：味苦，性微寒；归心经、肝经、脾经、肺经。功能主治：活血化瘀，疏肝解郁，调节脾胃，润肺止咳。[0029]金银花：性味归经：味甘，性寒。归肺、心、胃经。功能主治：清热解毒，疏散风热。[0030]胆木：性味归经：味苦，性寒；归肝、胆经。功能主治：清热解毒，祛痰止咳，止痛，消[0031]黄芪：性味归经：味甘，性温；归脾、肺经。功能主治：补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌。用于气虚乏力、食少便溏、中气下陷、久泻脱肛、便血崩漏、表虚自汗、气虚水肿等症[0032]乳香：性味归经：味辛、苦，性温；归心、肝、脾经。功能主治：活血行气止痛，消肿生肌。用于心腹诸痛、筋脉拘挛、跌打损伤、疮疡肿痛等症状。[0033]没药：性味归经：味辛、苦，性平；归心经、肝经、脾经。功能主治：散瘀定痛，消肿生[0034]血竭：性味归经：味甘、咸，性平；归心、肝经。功能主治：活血定痛，化瘀止血，生肌敛疮。[0035]龙血树：甘、凉。归肺、脾、肾经。功能主治：具有活血散瘀、定痛止血、敛疮生肌的功[0036]薜荔：性味归经：味甘、酸，性平；归肾、胃、大肠经。功能主治：祛风除解毒消肿。[0037]益智仁：性味归经：味辛，性温；归脾、肾经。功能主治：温脾止泻摄唾，暖肾固精缩[0038]降香黄檀：性味归经：味辛，性温；归肝、脾经。功能主治：化瘀止血，理气止痛。6实施例1磷脂2份和珍珠粉1份。[0042]所述黄芪采用蜜炙黄芪，是将黄芪与100℃的炼蜜按照10:1的重量比混合均匀，闷[0043]所述鸡屎藤提取物采用超临界CO₂萃取法获得，萃取压力为20MPa,萃取温度为40℃,CO₂流量为15kg/h,萃取时间为2小时，分离过滤，得到鸡实施例2[0045]所述黄芪采用蜜炙黄芪，是将黄芪与118℃的炼蜜按照10:2的重量比混合均匀，闷[0046]所述鸡屎藤提取物采用超临界CO₂萃取法获得，萃取压力为30MPa,萃取温度为50℃,CO₂流量为25kg/h,萃取时间为4小实施例3卵磷脂4份和珍珠粉3份。[0048]所述黄芪采用蜜炙黄芪，是将黄芪与115℃的炼蜜按照10:2的重量比混合均匀，闷[0049]所述鸡屎藤提取物采用超临界CO₂萃取法获得，萃取压力为25MPa,萃取温度为45℃,CO₂流量为20kg/h,萃取时间为3小[0050]上述实施例1-3采用以下制备方法：目筛，加入7倍量的70%乙醇溶液，浸泡2小时后，采用超声辅助提取2次，每次超声功率为400W,超声时间为35分钟，合并提取液，减压浓缩至相对密度为1.1的浸膏；冰片分别研成细粉，过90目筛，得到细粉加入到上述浸膏中，加热至45℃,采用高剪切分散，高剪切分散机的转速为2500rpm,处理时间为8min,使其充分混合均匀；压微射流乳化，高压微射流乳化的压力为150MPa,温度30℃,流量控制在20L/h,微通道直径为100μm,循环次数为5次，使溶液形成纳米级的乳液滴，加入到上述混合物中，搅拌均匀后，梯度升温加入月桂氮卓酮，第一阶段：先将药物混合物的温度35℃,加入1/3的月桂氮卓酮，7搅拌均匀，第二阶段：温度升高到42℃,加入剩余月桂氮卓酮的一半，继续搅拌；第三阶段：将温度升高到55℃,加入剩余的月桂氮卓酮，继续搅拌15分钟，最后加入珍珠粉，再搅拌10分钟；[0054]S4、将上述最终混合物制成外敷剂型。[0055]对比例1[0056]本对比例与实施例3的区别在于，一种外敷药物组合物，包括以下重量份原料：地骨皮15份、川牛膝12份、黄芪25份、丹参18份、金银花12份、乳香8份、没药8份、血竭15份、龙血树树脂2份、薜荔1份、胆木1份、益智仁5份、降香黄檀1份、鸡屎藤提取物1份、冰片2份、燕麦β-葡聚糖8份、月桂氮卓酮5份、卵磷脂4份和珍珠粉3份。[0057]对比例2[0058]本对比例与实施例3的区别在于，所述制备方法S3步骤中未进行高压微射流乳化；具体是将燕麦β-葡聚糖、卵磷脂溶解在2体积倍的去离子水中，搅拌形成均匀的分散液。[0059]对比例3[0060]本对比例与实施例3的区别在于，所述制备方法S3步骤中直接将月桂氮卓酮加入到混合物中，具体是将燕麦β-葡聚糖、卵磷脂溶解在去离子水中，搅拌形成均匀的分散液，通过高压微射流乳化，高压微射流乳化的压力为150MPa,温度30℃,流量控制在20L/h,微通道直径为100μm,循环次数为5次，使溶液形成纳米级的乳液滴，加入到上述混合物中，搅拌均匀后，加入月桂氮卓酮，继续搅拌15分钟，最后加入珍珠粉，搅拌10分钟。[0061]试验例1-药物吸收实验[0063]1.药物组合物：按照实施例1-3和对比例1-3制得的药物组合物。[0064]2.实验动物：选择雄性Wistar大鼠，体重200-250g。[0066]1.动物准备：实验动物在实验前适应性饲养1周，自由饮水和摄食。在实验时，用适宜的麻醉剂(戊巴比妥钠)对动物进行麻醉，然后在动物背部剃毛，暴露出约3cm×3cm的皮肤区域。[0067]2.药物敷用：将3mg/cm²的药物组合物均匀涂抹在动物背部皮肤暴露区域，然后用透气性良好的敷料覆盖，防止药物脱落和污染。[0068]3.取样时间点设定：在敷药后的1小时、4小时、8小时、12小时、24小时等时间点，分别取敷药部位及周边一定范围(距离敷药中心1cm半径范围内)的皮肤组织。[0069]4.皮肤组织处理与药物提取：将取下的皮肤组织用生理盐水冲洗干净，去除表面残留药物，然后用组织匀浆器将皮肤组织匀浆化。加入5mL甲醇-水(7:3,v/v)混合溶液，在振荡器上振荡提取30分钟，然后以10000rpm离心10分钟，取上清液作为待测样品。[0070]5.药物含量测定：采用HPLC方法测定皮肤组织提取液中药物组合物的主要有效成分含量。[0071]6.实验结果[0072]表1:药物吸收试验结果8实施例1实施例2实施例3对比例1在上述表格中，可以看到实施例组在药物吸收的指标上表现均优于对比例，表明本发明的药物组合物的配方或制备工艺等因素使得药物具有更好的释放和吸收特性，更有利于在糖尿病足治疗中发挥作用。实施例3的药物组合物在皮肤组织中的药物吸收效果最[0075]实施例3和对比例1比较，说明药物在特定的配比下能达到更佳的吸收效果，与对比例2比较，通过高压微射流乳化增加燕麦β-葡聚糖和卵磷脂与其他药物成分的接触面积，提高它们的分散性和稳定性，同时纳米级别的颗粒更容易穿透皮肤屏障，增强药物的透皮吸收效果，更好地与地骨皮、丹参等其他具有抗菌、抗炎、促进伤口愈合的成分一起发挥综合治疗作用，提高对糖尿病足的整体治疗效果。[0076]与对比例3比较，梯度升温加入月桂氮卓酮可以有效提高药物组合物的透皮吸收效率，使药物成分能够更多、更快地穿透皮肤角质层，到达糖尿病足病变部位发挥治疗作[0077]试验例2-有效性验证[0079]1.纳入标准[0080]年龄在30-75岁之间，确诊为2型糖尿病且符合Wagner分级1-3级的糖尿病足患者。足部存在明确的溃疡、感染或神经病变症状，且溃疡面积在1-10cm²之间。近2周内未接受过其他糖尿病足相关的局部或全身治疗(除常规降糖治疗外)。患者自愿签署知情同意书，能够配合完成整个实验过程及随访。[0081]2.排除标准[0082]合并有严重的心、肝、肾功能不全或其他严重系统性疾病，可能影响实验结果或无法耐受实验药物者。[0083]足部溃疡存在恶性病变或严重骨髓炎者。[0084]对实验药物或其辅料过敏者。[0085]妊娠期或哺乳期妇女。[0086]精神疾病患者或无法正常沟通交流者。9[0087]通过志愿者招募，共纳入符合条件的患者108例，采用随机数字表法将患者分为观察组和对照组，每组各54例。两组患者在年龄、性别、糖尿病病程、血糖控制水平(HbA1c)、足部病变严重程度(Wagner分级、溃疡面积、深度等)等基线资料方面进行均衡性检验，确保无统计学差异(P>0.05)。[0089]1.观察组[0090]给予本发明实施例3外敷药物治疗，将药物均匀涂抹于糖尿病足病变部位，每日换药2次。在治疗期间，密切观察患者局部症状变化，并定期进行相关检查。同时，记录患者的用药依从性及可能出现的不良反应。[0091]2.对照组[0092]给予莫匹罗星软膏治疗，同样按照标准用法用量进行操作，换药频率为每日2次。观察指标与观察组一致，同样关注患者的用药情况及不良反应。[0094]1.溃疡愈合判定标准[0095]完全愈合：溃疡面完全被上皮组织覆盖，皮肤色泽接近正常，质地柔软，无渗出物，患者无疼痛等不适症状。[0096]显效：溃疡面积缩小≥70%,创面变浅，有新鲜肉芽组织生长，渗出物明显减少，疼痛显著减轻。[0097]有效：溃疡面积缩小30%-69%,创面有一定程度的改善，肉芽组织部分生长，渗出物有所减少，疼痛有所缓解。[0098]无效：溃疡面积缩小<30%,或者溃疡面无明显变化甚至扩大，创面仍有较多渗出，疼痛无明显改善或加重。[0099]2.感染控制判定标准[0100]治愈：溃疡表面分泌物细菌培养结果连续两次阴性，局部炎症症状(红肿、热痛)完全消失，炎症评分降至0分。[0101]显效：细菌培养阳性率较治疗前降低≥70%,炎症症状明显减轻，炎症评分降低≥2[0102]有效：细菌培养阳性率较治疗前降低30%-69%,炎症症状有所减轻，炎症评分降低1[0103]无效：细菌培养阳性率降低<30%,炎症症状无明显改善甚至加重，炎症评分无变化或升高。[0104]3.疼痛缓解判定标准[0105]完全缓解：患者足部疼痛完全消失，VAS评分降至0分，且在后续观察期间无疼痛复[0106]显效：VAS评分较