铜仁市山羊人工授精技术操作规程

I的CS.65.020

B43

DB5206

铜仁市地方标准

DB5206/T101—2018

代替DB522200/T116—2011

铜仁市山羊人工授精技术操作规程

TongrenCityofGoatartificialinseminationtechnologyoperatingrules

2018-12-06发布2018-12-06实施

铜仁市质量技术监督局发布

DB5206/T101—2018

铜仁市山羊人工授精技术操作规程

1范围

本标准规定了山羊人工授精技术的必备条件、采精前的准备、采精、精液品质检查、精液

稀释与保存、母羊发情鉴定、输精、妊娠诊断等。

本标准适用于铜仁市规模养羊场（户）、山羊人工授精站（点）开展山羊人工授精技术操作。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适

用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T5458液氮生物容器

GB20557山羊冷冻精液

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

3.1

人工授精

是指利用人工的方法采取公羊的精液，经检查和处理后，注入发情母羊的生殖道内，使

其受孕的一种繁殖技术。

3.2

假阴道

模拟母山羊阴道的、用于采精的工具，羊用假阴道具有与母羊阴道相似的结构。

3.3

精子活力

指在37℃～38℃条件下精液中呈直线前进运动的精子数占总精子数的百分率。

4必备条件

4.1从事山羊人工授精操作人员必须身体健康，具有一定文化程度，经县级以上业务主管部

门培训，能基本了解山羊繁殖的基本知识，熟练掌握山羊人工授精技术操作。

4.2种公羊圈舍2～3间，每间5m2～8m2，用水泥砂浆硬化的运动及采精场20m2～30m2。

4.3种公羊品种标准与调教

4.3.1根据品种标准，选择体质结实，结构匀称，生产性能高，生殖器官正常，有明显雄性

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特征，精液品质优良特级或一级公羊2～3只。

4.3.2种公羊调教

4.3.2.1发情母羊引诱法：将公羊放入发情母羊群中，几天后，当公羊爬跨母羊时，让其本

交几次，然后隔开。

4.3.2.2嗅觉刺激法：将发情母羊的尿液、分泌物或成年公羊的精液涂抹在公羊的鼻子上，

刺激性欲。

4.3.2.3观摩法：公羊配种或采精时，让其在一旁观摩，直至调教会为止。

4.4采精室的要求：采精地面平坦，坚实而不光滑，室内不得存放其他杂物，环境相对安静，

室温保持在18℃～25℃，面积12m2～20m2。

4.5器械、药品、用具

器械、药品、用具见附录A。

5采精准备

5.1台羊的准备

选择健康发情征状明显的母羊作台羊，台羊后躯用0.1%高锰酸钾液清洗消毒擦净。

5.2采精和输精器械的清洗与消毒

5.2.1采精和输精器械器械的清洗将采精、输精及与精液接触的所有器械用2％的碳酸氢

钠刷洗，然后用清水冲洗，再用蒸馏水冲洗数次。

5.2.2其他器械的消毒假阴道外筒清洗后不用消毒，内胎使用前用75％的酒精消毒。集

精杯、输精器、试管、玻璃棒等玻璃器皿及铁制输精器、镊子等蒸煮消毒30min，或置高压

锅内消毒15min，用前再用生理盐水冲洗数次。凡士林、毛巾、纱布等蒸气灭菌20min待用。

5.3假阴道的制作及安装

假阴道安装假阴道分内外两层，外层是硬塑料圆筒，亦称外壳，长20cm，直径4cm，壳

厚约0.5cm，筒上有一孔，孔上装有橡皮塞，塞上有气嘴。内层为薄橡胶皮筒，亦称内胎，

长30cm，扁平直径4cm。安装假阴道之前，首先检查所用的内胎有无损坏和砂眼，确认完整

无损后先放入开水中浸泡3～5min。新内胎或长期未用的内胎，必须洗净消毒后方可使用；

工作人员要剪短并磨平指甲，以免划破内胎，再用酒精棉球消毒双手。安装时，先将内胎装

入外壳，内胎光滑面朝里，粗糙面朝外壳，露出外壳的两头要求等长，然后将内胎的一端翻

套在外壳上，同样的方法套好另一端，注意不要使内胎发生扭转，也不要拉得太直太紧，做

到松紧适度，内胎平展。两端再分别套上橡皮圈固定。用酒精棉球由内向外彻底消毒内胎，

待酒精挥发后再用生理盐水擦拭。在假阴道一端安装消毒过的集精瓶。安装好假阴道后，左

手握住假阴道的中部，右手用烧杯将温水（水温50～55℃）从外壳的灌水孔注入，水量约

为外壳与内胎间容积的1/2～1/3（竖立假阴道，水位达灌水孔即可），再装上带活塞的气

嘴，并将活塞关好。随后，用消毒过的玻璃棒取少许凡士林，由内向外在内胎表面均匀涂抹

一薄层，涂抹深度以假阴道长度的1/2为宜。最后，从气嘴吹气，用消毒过的温度计插入假

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阴道内检查温度，以采精时40～42℃为宜。温度适宜后吹气加压，使假阴道口呈三角形，

松紧适度，能以装入公羊的阴茎为宜。

5.4其它准备

5.4.1操作人员剪短指甲并磨光，肥皂洗手，冲洗干净后擦干，戴上乳胶手套，涂上滑石粉

，穿上工作服。

5.4.2采精公羊的准备用0.1%高锰酸钾溶液清洗外生殖器及周围并擦干净，若阴茎包皮

孔有长毛先剪短。

6采精

6.1采精时间

一般为早上进食前或进食后1h采精，盛夏中午不采，冬季清晨不采。

6.2采精人员右手握住假阴道后端，固定好集精杯(瓶)，并将气嘴活塞朝下，蹲在台羊右后

侧，让假阴道靠近母羊的臀部，在公羊跨上母羊背侧的同时，将假阴道与地面保持35～40°

角迅速将公羊的阴茎引入假阴道内，当公羊后躯急速用力向前一冲时，即已射精，此时，顺

公羊动作向后移下假阴道，并迅速将假阴道竖起，集精杯一端向下，然后打开活塞上的气嘴，

放出空气，取下集精杯，用盖盖好送精液处理室待检。

6.3种公羊利用8～12月龄调教配种，成年公羊一般每周采精3～4次，日采精1～2次，必

要时每d采3～6次，二次采精间隔2h。采精应在喂完料、运动1h后进行。连续采精5～6d

应休息1d。公羊的利用年限为4～5年。

采精步骤及注意事项：牵引公羊到采精现场后，人为控制其几min后再让其爬跨台羊，

这样不仅可以增强公羊的性反射，也可提高射精量和精液品质。采精步骤如下：①采精人员

右手紧握假阴道，用食指、中指夹好集精瓶，使假阴道气嘴活塞朝下，蹲在台羊的右后侧。

②待公羊爬跨台羊且阴茎伸出时，采精人员用左手轻拨公羊包皮（勿触龟头），将阴茎导入

假阴道（假阴道应与地面呈35°）。③若假阴道内的温度、压力和润滑感适宜，公羊很快

就会射精。当公羊后躯急速向前一冲，表明已经射精。此时，顺公羊动作向后及时取下假阴

道，并迅速将假阴道竖立，安装有集精瓶的一端向下。④打开活塞上的气嘴，放出空气，取

下集精瓶，用盖盖好并保温（37℃水浴），待检查。

7精液品质检查

7.1精液的外观检查

7.1.1精液量成年公羊射精量，一般每次为0.5mL～1．5mL，每mL精子总数约为20亿。

公羊的射精量一般为0.5～2mL，平均为1mL左右,每mL精液中精子数量为20亿～50亿个。

7.1.2色泽正常精液呈乳白色或淡黄色，浓厚而不透明；红色、褐色、绿色的精液为不

正常。

7.1.3气味正常精液无异味或略带腥味，腐臭等异味精液为不正常。

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7.2显微镜检查

7.2.1精液检查操作的基本原则采得的精液要迅速置于30℃左右的恒温水浴中或保温瓶

中；精液的检查要保持室温在18℃～30℃和显微镜周围温度37℃～38℃下进行；检查精液

时要求动作迅速；取样要有代表性，要求从全部并轻轻振摇的精液中取样；操作过程中不应

使精液品质受到损害和其他异物的影响。

7.2.2精子活力：是指精液中直线运动的精子所占比例。一般采用五级评分的办法：全部精

子做直线运动，则评为五级（1）；80%左右的精子做直线运动，评为四级（0.8～0.9）；60%

左右的精子做直线运动，评为三级（0.6～0.7）；40%左右的精子做直线运动，评为二级（0.4～

0.5）；20%左右的精子做直线运动，评为一级（0.3以下）。在人工授精中，鲜精的活力低

于四级，一般不能用于输精。直线前进运动的精子占90%,则活力为0.9;直线前进运动的精

子占80%,则活力为0.8;以此类推,活力低于0.6精液不能存放和稀释。

7.2.3精液的密度：通常与精子活力同时检查。在200～600倍的显微镜下观察，精子密度

一般分为密、中、稀三级。如精子密布整个视野，精子之间无空隙，即为“密”；精子之间

有明显的空隙，距离为1～2个精子的长度，即为“中”；如果视野中只有少数精子，精子

之间的空隙超过2个以上精子的长度，即为“稀”。在视野中没有看到精子的，用“无”标

记。一般用于输精的精液，其精子密度至少是“中”级。

7.2.4酸碱度（pH值）正常精液呈中性或弱碱性,平均PH值为6.6～7.5。

8精液稀释与保存

8.1精液稀释液配方

8.1.1常温保存稀释液

8.1.1.1葡萄糖3g、柠檬酸钠1.4克、加蒸馏水100mL，溶解过滤后煮沸消毒15min—20min，

降至室温每mL加入青霉素1000IU、链霉素1000IU；

8.1.1.2新鲜牛奶用数层纱布过滤，然后在水浴锅中加热至92℃～95℃，维持10min～

15min，冷却至室温，除去上层奶皮，每mL加青霉素1000IU、链霉素1000IU。

8.1.2低温保存稀释液

8.1.2.1100mL蒸馏水加10克奶粉，溶解后用多层纱布过滤，然后在水浴锅中加热至92℃

—95℃，维持15min，冷却至室温，每mL加入青霉素1000IU、链霉素1000IU；

8.1.2.2100mL的蒸馏水加1.4克柠檬酸钠、3克葡萄糖溶解过滤后消毒，冷却至40℃时加

入新鲜卵黄20mL，每毫再加入青霉素1000IU、链霉素1000IU。

8.2精液稀释倍数

一般稀释比例为1：2～4；精子密度在25亿以上的精液可以按1:40～50稀释。

8.3精液稀释方法

稀释液的温度要与精液的温度一致，在20℃～25℃时进行稀释。将稀释液沿精液瓶壁

缓缓倒入，轻轻搅匀。如作20倍以上高倍稀释时，应分两步进行，先加入稀释液总量的1

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／3～1／2作低倍稀释，稍后再将剩余的稀释液全部加入。稀释后，进行精子活力检查，稀

释前后活力一样，可进行分装与保存。

8.4．精液保存

8.4.1鲜精保存山羊鲜精常温保存（15℃～25℃）48h；低温保存（0℃～5℃），从常温每

min降2℃逐级降至低温，放在冰箱内或装有冰块的广口保温瓶中冷藏，保存60h-72h，活

力可达70％以上。

8.4.2冻精保存山羊冻精质量应符合GB20557的规定，并浸放在液氮生物容器內（-196℃）

备用，液氮生物容器应符合GB/T5458的规定。定期捡查容器(罐)內液氮消耗量，不足60%

时，应及时补充液氮。

8.5精液运输

做到低温、防震、防污染、防辐射、防时间过长（不超过6h）。

9母羊发情鉴定

9.1母羊发情征状鸣叫不安、食欲减退、频频排尿、主动接近公羊、爬跨其它母羊；外阴

部潮红、肿胀、流出粘液:发情开始透明粘稠带状，中期白色，末期混浊、不透明粘胶状。

9.2配种适期母羊发情周期18d～24d，平均为21d，发情持续期24h～48h，平均为30h。

发情开始后12h～24h为配种适宜期。

10输精

10.1准备工作

在人工授精前，应做好适当的准备工作，保证输精过程快速、准确、连贯，尽量缩短精

液在羊体外存留的时间。①输精器械的准备。输精所有可能用到的器材如玻璃输精器、开膣

器、输精管等，均要消毒灭菌。②输精人员的准备。输精人员穿工作服，剪短指甲，双手洗

净擦干后用75%酒精消毒，再用生理盐水冲洗。③授精母羊的准备。把发情母羊牵到输精架

上保定，并将其外阴部擦洗干净、消毒。生产中，可采取一人背对羊头骑于母羊背上，抬起

母羊的两后肢，其余人帮助固定好母羊以便输精。④精液的准备。常温或低温保存的精液，

要在温水中升温到35℃左右，并在显微镜下检查其活力，符合要求才能输精。

10.2清点消毒好的输精器械，并再用稀释液冲洗备用。

10.3冻精解冻

颗粒冻精用2.2%～2.9%的柠檬酸钠溶液0.1mL注入消毒的小玻璃试管内，并置于45℃～

60℃的温水杯中，然后取出颗粒精液一枚，投入解冻液内，并轻轻摇动；细管冻精38℃～

40℃的温水直接解冻，10s～15s后立即取出输给发情母羊。

10.4检查精液

鲜精镜检活力0.6以上、冻精镜检活力0.3以上，并将精液吸入输精器。

10.5输精母羊保定

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多采用倒提后腿法保定或将发情母羊两后肢担在离地高度50cm左右的横杠式输精架上

固定作保定。

10.6外阴消毒

用0.1%高锰酸钾液清洗母羊外阴及后躯，再用温水洗掉药液并擦干。

10.7输精技术

10.7.1输精原则做到“适时”、“深部”、“慢插”、“轻注”“稍站”。

10.7.2.1方法输精员右手持输精器，左手持开膣器，先将涂上无菌润滑剂的开膣器顺着阴

门插人阴道深部之后旋转90°,开启开膣器寻找子宫颈口，开膣器开张幅度2cm～3cm。

10.7.2.2用额灯或手电筒光源辅助观察。子宫颈口位于阴道底部，稍向外突出，呈深红色

阴影或小孔，像极小的唇状物，如有云雾状粘液妨碍观察，用吸管吸去。有些羊需用输精器

前端拔开子宫颈外口上下2片或3片突起皱壁方可将输精器插入子宫颈口内。如果子宫颈紧

闭而干燥，说明母羊尚未发情，如果粘液清澈的，应取出开膣器延期输精。

10.7.2.3使用细管冻精，将细管枪上的活塞拉回12.7cm～17.8cm插入细管，棉花端封口朝

向前，切下细管尖使切口整齐，套上细管，扭紧“O”型环。

10.7.2.4找到子宫颈口后，将输精器插入子宫颈口内1cm～1．5cm处缓慢地注入精液。若

子宫颈口较紧或不正者，可将精液注到子宫颈口附近，但输精量应加大一倍。输完精后先将

输精器取出，再将开腔器抽出。

10.7.3输精量鲜精为0.1mL～0.2mL、细管冻精一支，有效精子数不少于6000万个。一

次输精的有效精子数应保持在7500万个以上，一个发情期要输精2次，间隔8h～12h。

10.7.4输精注意事项

10.7.4.1输精瞬间应缩小开腔器开张程度，减少刺激，并向外拉1/3，使阴道前边闭合，

容易输精。

10.7.4.2输精完毕的母羊在原保定位置停留一会再放开，输精后的母羊应休息10min左右，

并注意观察是否有精液倒流，不能立即驱赶或放牧。保持安静状态2h～3h将母羊赶走。

10.7.4.3输精人员的手和输精器外壁要用生理盐水擦净后再操作。

11妊娠鉴定

对已输配母羊，观察下一情期是否发情，如不出现返情，可视为怀孕，则加强饲养管理，

保证胎儿正常发育。山羊孕期为145d～159d，平均为150d，正确推算配种母羊的预产期，

要做好追综调查，不断总结和提高山羊人工输配受胎率。

12做好记录

做好种公羊精液或冻精品质检查记录和母羊配种繁殖记录是总结和提高山羊人工授精

受胎率关键措施之一。种公羊精液品质检查及利用记录表见附录B，母羊配种繁殖记录表见

附录C。

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附录A

(资料性附录)

表A.1主要器械、药品和用具表

序号名称规格单位数量

1显微镜300～600倍架1

2蒸馏器小型套1

3d平0.1～100g台1

4假阴道外壳个4

5假阴道内胎条8～12

6假阴道塞子(带气嘴)个6～8

7玻璃输精器1mL支8～12

8输精量调节器个4～6

9集精杯个8～12

10金属开腔器大、小两种个各2～3

11温度计100℃支4～6

12寒暑表个3

13载玻片盒1

14盖玻片盒1～2

15酒精灯个2

16玻璃量杯500mL、100mL个各1

17量筒500mmL、1000mL个各1

18蒸馏水瓶500mL、1000mL个各1

19玻璃漏斗8cm、12cm个各1～2

20漏斗架个1～2

21广口玻塞瓶125mL、500mL个4～6

22雨口玻塞瓶500mL、100mL个各1～2

23玻璃三角烧瓶500mL个2

24洗瓶500mL个2

25烧杯500mL个2

26玻璃皿10～12cm套2

27带盖搪瓷杯250mL、500mL个各2～3

28搪瓷盘20cm×30cm个2

29搪瓷盘40cm×50cm个2

30不锈钢锅带蒸笼个1

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附录A（续）

序号名称规格单位数量

31剪刀直头把2

32广口保温瓶手提式个2

33酒精95%，500mL瓶2

34氯化钠化学纯500g瓶2

35凡士林克1000

36试管刷大，中，小把各2

37纱布克1000

38药棉克1000

39瓷盆个2

40手电筒（额灯）带电池个2

41耳号钳把2

42羊耳号个按羊数量定

43工作服套每人1套

44肥皀块2

45毛巾块4

46高锰酸钾瓶2

47碳酸氢钠瓶2

48碘酊mL200

49配种记录本本2

50精液检查记录本本1

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