DB12∕T 847-2018 饲料中总糖的测定分光光度法

饲料中总糖的测定分光光度法Animalfeeding饲料中总糖的测定分光光度法AnimalfeedingstuffsdeterminationoftotalsugarsPolarimetricmethodB46DB12DB12/T847—201820181226发布2019II本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。本标准由天津市农业科学院提出并归口。本标准起草单位：天津市农业质量标准与检测技术研究所。本标准主要起草人：张强、陈秋生、王利宾、刘烨潼、殷萍、孟兆芳、张玺。DB12/T8472018饲料中总糖的测定分光光度法DB12/T847—20182饲料中总糖的测定分光光度法DB12/T847—20182规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T20195动物饲料试样的制备本标准规定了饲料中总糖含量的测定方法、原理、试剂和材料、仪器与设备、分析步骤、结果计算与精密度。本标准适用于饲料及其原料中总糖含量的测定。饲料中水溶性糖和水不溶性多糖经盐酸溶液水解后转化成还原糖，水解物在硫酸的作用下，生成物与芳香族酚类化合物缩合生成黄色溶液，在490nm处有最大吸收，在一定范围内其吸光度值同糖的浓度呈正比，以此测定糖的含量。4试剂和材料4.1实验用水指标满足GB/T6682—级标准。4.2浓盐酸，p=1.18g/mL。4.3浓硫酸，p=1.84g/mL。4.4苯酚溶液（50g/L)，称取5g苯酚，用水定容至100mL，摇匀后避光保存。4.5葡萄糖标准溶液（1g/L)，将葡萄糖于105°C恒温烘干至恒重，准确称取1.0000g，用水溶解后加入5mL盐酸，并以水定容至1000ml。5仪器与设备5.1可见分光光度计。5.2电子天平，感量0.1mg。5.3电子天平，感量0.01g。5.4恒温水浴锅。5.5电热鼓风干燥箱。5.6样品粉碎设备。5.7实验室常用玻璃器具。16分析步骤6分析步骤称取试样约1g(精确至0.01g)于250ml锥形瓶中，加入25ml水，10ml盐酸，振荡摇匀至形成均匀的悬浊液，装上冷凝回流装置，在沸水浴中水解1h,冷却之后过滤，并洗涤滤渣，合并滤液及洗液，最后定容至250ml，摇匀待用，此为待测溶液。6.3标准系列溶液的制备分取0mL、1mL、2mL、4mL、6mL、10mL葡萄糖标准溶液（4.4)分别置于50mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此曲线浓度分别为0M<g/mL、20pg/mL、40pg/mL、80pg/mL、120pg/mL、200pg/mL。准确吸取上述标准溶液各1mL(相当于葡萄糖含量分别为0昭、20昭、40网、80昭、120昭、200网），加入10mL比色管中，分别加入苯酚溶液（4.3)各1mL，加入浓硫酸（4.2)5mL，反应液静止放置10min后，涡旋摇匀，冷却至室温，选择波长为490nm，以空白溶液调零，测定吸光度。以葡萄糖质量浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。准确吸取待测溶液（6.2)1ml于10mL比色管中，按6.3步骤自“加入苯酚溶液各1ml……”起进行操作，至冷却至室温后测定。按照GB/T20195的规定执行。DB12/T847—2018式中：^—试样中总糖的含量，单位为克每千克，g/kg;a-一从标准曲线上查得葡萄糖含量，单位为微克，pg;V—试样经前处理后定容的体积，单位为毫升，mL;V—测定时吸取滤液的体积，单位为毫升，mL;m一一试样质量，单位为克，g。试样中总糖的含量按⑴式进行计算:⑴28精密度应符合以下要