TSAIA-0042021-猪瘟病毒PPAELISA抗体检测方法_第1页
TSAIA-0042021-猪瘟病毒PPAELISA抗体检测方法_第2页
TSAIA-0042021-猪瘟病毒PPAELISA抗体检测方法_第3页
TSAIA-0042021-猪瘟病毒PPAELISA抗体检测方法_第4页
TSAIA-0042021-猪瘟病毒PPAELISA抗体检测方法_第5页
已阅读5页，还剩2页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

ICSB

T/SAIA004—猪瘟病毒PPA-ELISAPPA-ELISAtodetectantibodyagainstclassicalswinefever2021-12-20发 2021-12-20实山东省农业产业化促进会T/SAIAT/SAIA004—T/SAIAT/SAIA004— GB/T1.1-20201部分：标准化文件的结构和起草规则》给出GB/T GB NY/T ELISA：酶联免疫吸附试验（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay）HRP：辣根过氧化物酶（HorseradishPeroxidase）SPAA蛋白（StaphylococcalProteinA）OD：光密度（OpticalDensity）微量移液器（10μL、20μL、100μL、1000μL）37酶标读数仪（450nm波长）一次性注射器（5mL～10mL）T/SAIAT/SAIA004—T/SAIAT/SAIA004—白。获得重组蛋白纯度应≥95%A。1：28以上。A：见B.6B：见B.7清，4000r/min3min～5min100μL的上层血清。420min～3min。A1A2100μLA3A4100μL1:40100μL，37℃1hSPA37℃1h，弃掉反应液，洗板同上。将底物液A和底物液B100L，37℃温箱10min。50μL附录A表达载体pET32a（+）、DNAMarker、低分子量蛋白Marker、RNA提取试剂盒、RT-PCR扩增试剂、T4DNALigase、EcoRI、SalI限制性内切酶、DAB底物显色液、HRP-SPA均为商品化试剂。E2-R：5'-GCGTCGACAGTCGTGTTRCCRATCAAGC-3'（SalI）。RNART-PCR扩增体系：RT-PCRMix（2）10L、上1μLRNA2μL、H2O6μL20μL。反应条件为：42℃104786bp的PCR产物片段用胶回收试剂盒回收，置于-20℃SDSkDa；用紫外分280nm260nmOD值，计算蛋白浓度，纯化后的重组蛋白的浓度应≥1mg/mL，分装后-20℃保存。5μL、2.5μL、1μLSDS电泳，用蛋白密度扫描分析纯度，重组蛋白纯度应≥95%E2Westernblot鉴定，猪瘟病毒阳性血附录B称取碳酸钠1.59g，碳酸氢钠2.93g，加水至1000mL，调节pH值至9.4～9.6称取氯化钠80g，氯化钾2g，十二水合磷酸氢二钠29g，磷酸二氢钾2g，吐温-205mL，加水定容至500mL。称取氯化钠8g，氯化钾0.2g，十二水合磷酸氢二钠2.9g，磷酸二氢钾0.2g，脱脂乳50g，加水定容至1000mL。称取氯化钠8g，氯化钾0.2g，十二水合磷酸氢二钠2.9g，磷酸二氢钾0.2g，小牛血清100mL，吐温-205mL，加水定容至1000mL。称取氯化钠8g，氯化钾0.2g，十二水合磷酸氢二钠2.9g，磷酸二氢钾0.2g，小牛血清100mL，甘油20

人人文库> 全部分类> 行业资料 > 各类标准

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论