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ICSX 标T/SATA0002—含量的测定微孔板法Determinationoffolicacid(folateactivity)contentininfantfoodsanddairyproducts—Microplatemethod 深圳市分析测试协 T/SATAT/SATA0002— 目 前 范 原 其 T/SATAT/SATA0002—含量的测定微孔板法GB/T6682分析实验用水规格和试验方法（GB/T6682-2008，ISO提取物和叶酸检测培养基加入包被有鼠李糖乳杆菌Lactobacillusrhamnosus的微孔中。Lactobacillus3744-48h610-630nm（540-550nm）GB/T6682检测叶酸总量所需试剂：猪胰酶（SigmaP1750）、鸡胰酶（RBiopharmP2002）氢氧化钠溶液（2mol/L）：8g100mL氢氧化钠溶液（1mol/L）：4g100mL水中，混匀。0.1mol/L氢氧化钠溶液（0.1mol/L）：0.4g100mL磷酸盐缓冲液（0.05mol/L,0.1抗坏血酸钠，pH7.2）7.8g11LpH7.20.1mg微量移液器：100μL、1000μL、30μL-300μL0.22μm无菌V96Lactobacillusrhamnosus（r-biopharm生化培养箱：36℃±11g（0.0001g）50mL30mL磷酸盐缓冲液，40mL（300mg高峰淀粉酶，3730min以利于样品的溶解9530min530℃0.0001g）20mg10mg50mL30mL40mL372h（其间不时振荡）300mg12h956条微孔板条试验。打开瓶盖用镊子取出干燥剂（丢掉干燥剂），加955min230℃0.2μm15mL无菌离心管中。采用德国拜发公司生产的VitaFast（x见标准品瓶所示）无菌水（取自试剂盒）=标准品浓6个无菌管（1.5-2.0mL），1准备标准品溶液：1标准曲线µg/100无菌水空白12345*1：40培养基的移取：将过滤后的叶酸培养基倒入无菌V150µL叶酸培养3744-48h180角轻扯下粘合箔，与此同时务必用另一只手200uL枪头反复吹吸菌体，使菌体充分溶解在培养基中。OD1且OD50.6OD制可使用配套的RIDASOFTWinEIA软件四阶参数法进行。0.16µg100-1.28µg/100g（mL）范围内，则按在下式（1）40已经包括在标准曲

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X——样品中叶酸含量，单

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