TSATA010-2019冰鲜鳕鱼产品中易与鳕鱼混淆物种检测-实时荧光PCR法_第1页
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标T/SATA010—Real-timePCRDetectionMethodforCodFishMixupSpeciesinFreshandFrozenProducts 深圳市分析测试协 发T/SATAT/SATA010— 范 原 分析步 本标准按照GB/T1.1给出的规则起草。T/SATAT/SATA010—PCR法本方法规定了鳕鱼及其制品中易混淆物种裸盖鱼（Anoplopomafimbria）、油鱼（Lepidocybium成分的实时荧光PCR检测方法。GB/T GB/T ’’-’’’-’-’’’-’’’-’-’’’-’’’-’’-’’’-’’’-’’-’18,000g微量移液器（0.5μL10μL，10μL100μL，20μL200μL，100μL1000μL）0.001g1μLDNA溶液，使用微量紫外分光光度计按照dsDNA（DNA）实时荧光PCR实时荧光PCR1表1PCRPCR预混液（21010μmol/L0.410μmol/L0.410μmol/L0.220-5020PCR反应程序：9515s955s6034s（读取荧光），40检出XXXDNA成分。XXXDNA成分。裸盖鱼引物探针检出限范围为0.1~5，油鱼引物探针检出限范围为1~10，南极犬牙鱼引物探针检出限范围为1%~2%。（资料性附录DNA（Qiagen69514DNeasymericonFoodKit为例见表A.1裂解液（FoodLysis4x200K溶液（Proteinase1.4柱结合液（Buffer2x30漂洗液（Buffer13洗脱液（Buffer15见表A.2核酸结合柱（QIAquick®Spin50502.0mL200mg1mL裂解液（FoodLysisBuffer），2.5μLK溶液（ProteinaseK）置于恒温混匀仪或水浴震荡器中，60℃、1000rpm30min15–25C2500g5min700μL500μL2.0mL15s14000g15min将核酸结合柱（QIAquick®SpinColumns）放置到废液收集管（collectiontube）上，将A.2.9中的集管（collectiontube）中收集到的废液。μL漂洗液（BufferAW2），17900g1min，丢弃废液收集管（collectiontube）中收集到的17900g1min将核酸结

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