DB32∕T 4922-2024 彩色马蹄莲组培快繁技术规程

ICS65.020.20

CCSB62

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DB32/T4922—2024

彩色马蹄莲组培快繁技术规程

Technicalcodeofpracticeforrapidpropagationofcoloredcalla

lilybytissueculture

2024-12-16发布2025-01-16实施

江苏省市场监督管理局发布

中国标准出版社出版

DB32/T4922—2024

目次

前言……………………………Ⅲ

1范围…………………………1

2规范性引用文件……………1

3术语和定义…………………1

4缩略语………………………1

5无菌系的建立………………1

5.1外植体获取……………1

5.2外植体的消毒…………………………2

5.3不定芽的诱导…………………………2

6培养…………………………2

6.1初代培养………………2

6.2继代培养………………2

6.3无菌仔球的培养………………………2

6.4生根培养………………2

7炼苗及移栽…………………2

7.1环境条件………………2

7.2炼苗……………………2

7.3移栽基质………………3

7.4移栽……………………3

8移栽后管理…………………3

8.1水分……………………3

8.2光照……………………3

8.3温度……………………3

8.4湿度……………………3

8.5施肥……………………3

8.6病害防治………………3

9一年生仔球的培养…………………………3

9.1生产……………………3

9.2采收……………………3

9.3储藏……………………4

附录A（规范性）不同培养阶段培养基配方及培养条件……………………5

附录B（资料性）基质消毒方法………………6

附录C（资料性）常用细菌杀菌剂……………7

Ⅰ

DB32/T4922—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由江苏省园艺标准化技术委员会提出、归口并组织实施。

本文件起草单位：江苏省中国科学院植物研究所。

本文件主要起草人：郑玉红、逯岩、韩福贵、芦治国、李骏豪、马玉磊、付娇娇。

Ⅲ

DB32/T4922—2024

彩色马蹄莲组培快繁技术规程

1范围

本文件规定了彩色马蹄莲组培快繁的无菌系的建立、培养、炼苗及移栽、移栽后管理和一年生仔球的

培养等。

本文件适用于采用组织培养的方式进行彩色马蹄莲的繁殖。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文

件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB5084农田灌溉水质标准

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

无菌系asepticline

在无菌条件下，对外植体消毒灭菌后，形成的无菌群体。

3.2

无菌仔球aseptictuberlets

通过组织培养的方法获得无菌小块茎。

3.3

一年生仔球one⁃year⁃oldtubers

组培苗移栽后，经过一个生长季的培养发育形成的块茎。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

IBA：吲哚丁酸（3⁃Indolebutyricacid）

MS：一种组织培养常用的基本培养基[MurashigeandSkoog（1962）]

NAA：α⁃萘乙酸（α⁃Naphthyleneaceticacid）

6⁃BA：6⁃苄基腺嘌呤（6⁃Benzylaminopurine）

5无菌系的建立

5.1外植体获取

选取直径2.5cm~4.0cm的健康的彩色马蹄莲块茎，用800倍~1000倍广谱性杀菌剂水溶液浸泡

1

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15min后，浅埋于经高压灭菌的湿润细沙中，在光照度3000lx、光照时间12h/d、（25±1)℃的条件下预

培养7d~10d后，选取芽长约1cm的块茎，作为外植体。

5.2外植体的消毒

用软毛刷将块茎刷洗干净，避免损伤顶芽，将其切成长宽均约为1.5cm的带芽小块，放入含1%液

体洗涤剂的溶液中振荡洗涤20min~30min，之后流水冲洗40min~60min，转入超净工作台，75%酒精

消毒30s~45s后，无菌水冲洗2次~3次，再用有效氯含量2%~3%的次氯酸钠溶液消毒25min~

35min，无菌水冲洗4次~5次，无菌吸水纸吸干表面的水分。

5.3不定芽的诱导

将消毒好的彩色马蹄莲外植体切成大小约lcm3的带芽小块，接种到不定芽诱导培养基上，培养基配

方和培养条件按附录A执行，直至外植体萌发出不定芽。

6培养

6.1初代培养

将生长至4.0cm~6.0cm的不定芽连同部分块茎一起切下，转接到不定芽增殖培养基中进行增殖培

养，培养基配方和培养条件按附录A执行，直至诱导出块状丛生芽。

6.2继代培养

将块状丛生芽切成约1.0cm2小块，接种到壮芽培养基上，进行壮芽培养，培养基配方和培养条件按

附录A执行，培养周期60d~80d，直至丛生芽长成可以分切成单株的小苗。其中，在第30~35天，采用

同样的配方进行继代培养。在第60d~65d，将分切成单株的小苗接种到壮苗培养基中进行壮苗培养，

培养基配方和培养条件按附录A执行，直至长成块茎直径约0.5cm小苗。

6.3无菌仔球的培养

将块茎约0.5cm小苗保留1.0cm~2cm叶柄，进行瓶内结球培养，培养基配方和培养条件按附录A

执行，培养周期30d~40d，直至每株小苗均膨大出直径约0.8cm的仔球。

6.4生根培养

将无菌仔球保留1.0cm~1.5cm叶柄，进行生根培养，培养基配方和培养条件按附录A执行，直至

每株苗均长成高度2.0cm~3.0cm、不定根3~5条组培苗。

7炼苗及移栽

7.1环境条件

炼苗和移栽均宜在春季3月—4月或秋季9月—10月进行。若其他季节进行，需在温度18℃~

25℃，相对湿度60%~80%的温室中进行。

7.2炼苗

在组织培养的缓冲间将组培瓶盖拧松，放置2d~3d；之后打开瓶盖，再放置2d~3d。

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7.3移栽基质

采用泥炭土：珍珠岩＝2∶1时，可适量加入蛭石。第一次使用的基质无需消毒，重复使用基质应消毒

后使用，基质消毒可采用物理消毒法或化学消毒法。具体的操作方法见附录B。

7.4移栽

用镊子将完成炼苗的组培苗从瓶中取出，洗净根部的培养基，用800倍~1000倍多菌灵浸泡

8min~10min，移栽到50孔、孔径4.5cm、孔深4.5cm的穴盘中。也可移栽到高40cm、宽90cm~

120cm的苗床上；定植密度600株/m2~700株/m2，定植深度1.5cm~2.0cm，然后用喷雾法浇透水。

8移栽后管理

8.1水分

采用EC值1.5以下，pH值6.5~7.2的灌溉水。水质应符合GB5084的要求。移栽后4周内，保持

基质相对含水量60%~70%；4周后，进行正常的水分管理。

8.2光照

夏季露地移栽时，应加盖一层遮光度30%~50%遮阳网进行遮荫。

8.3温度

温度宜控制在18℃~28℃，最高不超过30℃。夏季移栽，当温度超过28℃时，应用微喷雾设备降

温，同时加大遮阴度，保持良好的通风。

8.4湿度

移栽一周内宜保持空气湿度80%~90%，一周后可逐步降低，宜保持在60%以上。

8.5施肥

定植约4周后，应进行根外施肥。可使用N∶P∶K=2∶1∶1，浓度0.3%~0.5%的液态肥，并按先低后

高的原则，每7d~10d施肥一次。

8.6病害防治

以预防细菌性病害为主。可每2周~3周进行一次灌根。常用广谱性杀菌剂见附录C。

9一年生仔球的培养

9.1生产

彩色马蹄莲组培苗在穴盘或苗床上栽培一个生长周期，85%以上的块茎直径达2.0cm后，即可通过

断水等方法强制其休眠，待叶片变黄后采收。

9.2采收

采收时应尽量避免损伤块茎表皮。

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9.3储藏

采收后的块茎应置于阴凉、通风处干燥，制成一年生仔球，用于大田生产。

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附录A

（规范性）

不同培养阶段培养基配方及培养条件

不同培养阶段培养基配方及培养条件见表A.1。

表A.1不同培养阶段培养基配方及培养条件

培养阶段培养基配方培养条件

有无光照均可；若在光照条件下诱导，光照度

MS+琼脂（6.5mg/L~7.0mg/L）+蔗糖30g/L+6~BA

不定芽诱导宜为1000lx~3000lx，光照时长12h/d，培养

（2.0~5.0）mg/L，pH5.75~5.85

温度（25±1)℃

MS+琼脂（6.5mg/L~7.0mg/L）+蔗糖30g/L+6-BA光照度为1000lx~3000lx，光照时长12h/d，

不定芽增殖

（2.0mg/L~4.0mg/L），pH5.75~5.85培养温度（25±1)℃

MS+琼脂（6.5mg/L~7.0mg/L）+蔗糖30g/L+NAA

光照度为1000lx~3000lx，光照时长12h/d，

壮芽（0mg/L~0.5mg/L）+6-BA（2.0mg/L~3.0mg/L），

培养温度（25±1)℃

pH5.75~5.85

MS+琼脂（6.5mg/L~7.0mg/L）+蔗糖30g/L+NAA

光照度为1000lx~3000lx，光照时长12h/

壮苗（0mg/L~1.0mg/L）+6-BA（2.0mg/L~3.0mg/L），

d，培养温度（25±1)℃

pH5.75~5.85

MS+琼脂（6.5mg/L~7.0mg/L）+蔗糖（40g/L~60g/L）

光照度为1000lx~3000lx，光照时长16h/

瓶内结球+NAA（0.5mg/L~1.0mg/L）mg/L+6-BA（1.0mg/

d，培养温度（25±1)℃

L~2.0mg/L），pH5.75~5.85

MS+琼脂（6.5mg/L~7.0mg/L）+蔗糖30g/L+IBA光照度为1000lx~3000lx，光照时长12h/

生根

（1.0mg/L~2.0mg/L），pH5.75~5.85d，培养温度（25±1)℃

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附录B

（资料性）

基质消毒方法

B.1物理方法

一般采用蒸汽消毒，即将基质堆成圆锥状，高度不超过1.5m，将多孔的管子平放并埋入基质约40cm、

80cm、120cm高处，表面严实地覆盖塑料薄膜，然后从蒸汽锅炉中放出200℃左右蒸汽，使基质温度上升

70℃~90℃保持0.5h~lh即可。

B.2化学方法

五氯硝基苯消40%可湿性粉剂，按照1∶（20~40）拌细土，然后将待消毒的基质平铺，厚度30cm~

40cm，按10g/m2用量均匀撒在基质上，然后再喷一次灌溉水，让基质湿润，最后用塑料薄膜覆盖，四周压

实，15d后掀膜即可。

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附录C

（资料性）

常用细菌杀菌剂

常用细菌杀菌剂见表C.1。

表C.1常用细菌杀菌剂

E类别名称用法用量注意事项

无机铜类制剂。不能与强酸、强碱

Cu（OH）500倍~700倍液每7d喷施1次，连续施用2次~4次

2性农药及肥料混用

无机铜类制剂。可与大多数不含

硫酸铜钙600倍~800倍液喷雾

金属离子的杀虫剂混用

硫酸铜∶石灰∶水＝1∶2∶200配制而成；配制容器宜选用木无机铜类制剂。不宜储存，通常是

波尔多液

缸、塑料桶、瓦缸或水泥池，不能用铝制、铁制等金属容器现配现用

500倍~700倍液在发病初期喷淋或者800倍液灌根，每有机铜类制剂。遇强碱分解，在酸

噻菌铜

7d~10d施用一次，共用3次~4次性条件下稳定

铜制剂类

有机铜类制剂。不可与酸性药剂

络氨铜500倍~800倍液，每10d喷施1次，共喷施2次~3次

混用

600倍~1000倍液叶面喷施或灌根。一般每7d~10d喷有机铜类制剂。不可与强碱性农

松脂酸铜

一次药混用

50%可湿性粉剂800倍~1000倍液喷雾施用，每7d~10d有机铜类制剂。不可与强酸、碱性

喹啉铜

施用一次及含其他金属离子的农药混用

20%可湿性粉剂300倍~400倍液叶面喷施，每7d~10d有机铜类制剂。不可与碱性农药

乙酸铜

施用一次混用

常见制剂有3种：20%悬浮剂、

喷雾施用，每7d喷施一次，连续防治2次~3次为宜。注

噻唑锌40%悬浮剂、60%水分散颗粒剂。

意二次稀释喷雾

根据产品说明书使用

不可与碱性农药混合使用。宜与

72%可湿性粉剂350倍~600倍液，每14d施用一次。每

福美锌作用机制不同的杀菌剂轮换使用，

生长季最多用药4次。用量160g/667m2~240g/667m2

有机锌类以延缓抗性产生

有60%、65%和80%可湿性粉剂

80%可湿性粉剂500倍~800倍液喷雾施用，每7d~10d

代森锌和4%粉剂四种制剂。不可与氧

施用一次。其他剂型按产品说明施用

化剂、酸类、碱类物质一起存放

不可与碱性农药、化肥和含铜的农

代森锰锌80%可湿性粉剂400倍~700倍液喷施，连喷3次~5次

药混用

链霉素72%可溶性粉剂4000倍~6000倍液，每7d~10d施用一次不可与碱性农药混合施用

中生菌素1000倍~1200倍液，每7d~10d施用一次，共施用3次~4次不可与碱性农药混合施用

抗生素类

2%水剂50倍~100倍液灌根或500倍~600倍液喷施，

春雷霉素不可与碱性农药混合施用

7d~10d后第2次用药，共用2次即可

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表C.1常用细菌杀菌剂（续）

E类别名称用法用量注意事项

抗生素类乙蒜素80%乳油1000倍~2000倍液喷施

氯溴异氰不可与有机磷类农药、碱性农药混

1000倍~1500倍喷雾

广谱杀尿酸合使用

菌剂三氯异氰

白色粉末或片剂，氯含量约90%；1.2%溶液喷雾施用不可与酸、碱物质混合使用

尿酸