DB37∕T 4252-2020 灵芝菌种质量要求

ICS65.020.20

CCSB0537

山东省地方标准

DB37/T4252—2020

灵芝菌种质量要求

QualityrequirementsofGanodermalingzhispawn

2020-12-04发布2021-01-01实施

山东省市场监督管理局发布

DB37/T4252—2020

目次

前言.................................................................................II

1范围...............................................................................1

2规范性引用文件.....................................................................1

3术语和定义.........................................................................1

4质量指标...........................................................................1

4.1固体菌种.......................................................................1

4.1.1母种质量...................................................................1

4.1.2原种质量...................................................................2

4.1.3栽培种质量.................................................................3

4.2液体菌种.......................................................................4

4.2.1摇瓶液体菌种质量...........................................................4

4.2.2发酵罐液体菌种质量.........................................................5

5检验规则...........................................................................6

6留样...............................................................................6

附录A（规范性）母种栽培性状检验方法和检验项目.......................................7

I

DB37/T4252—2020

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由山东省农业农村厅提出并组织实施。

本文件由山东省农业标准化技术委员会归口。

本文件起草单位：泰安市农业科学研究院、山东省农业技术推广总站、山东三秀生物科技有限公司。

本文件主要起草人：王庆武、高霞、丛倩倩、赵淑芳、崔晓、孙振福、唐丽娜、马化彬、李秀梅、

司元明、兰玉菲、张燕、安秀荣、于清伟、曹子英。

II

DB37/T4252—2020

灵芝菌种质量要求

1范围

本文件规定了灵芝菌种质量要求的术语和定义、质量指标、检验规则、留样等技术要求。

本文件适用于灵芝菌种质量要求。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB150.1压力容器第1部分：通用要求

GB/T12728食用菌术语

NY/T528食用菌菌种生产技术规程

NY/T1742食用菌菌种通用技术要求

3术语和定义

GB/T12728、NY/T528界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1

液体菌种liquidspawn

用液体培养基，在发酵罐中，通过深层培养技术生产的液体形态的食用菌菌种。

3.2

终止pHterminalpHvalueofmedium

液体菌种达到放罐指标时的培养基pH。

4质量指标

4.1固体菌种

4.1.1母种质量

4.1.1.1容器

容器及封口物应符合NY/T528的规定。

4.1.1.2感官要求

母种感官要求应符合表1的规定。

表1母种感官要求

1

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项目检测方法要求

容器肉眼观察完整、无损、洁净

试管塞肉眼观察棉塞或硅胶塞，应干燥、洁净、松紧适度，能透气和滤菌

培养基灌入量肉眼观察试管总容量的1/5～1/4

斜面长度肉眼观察、测量斜面顶端距试管塞底部距离40mm～50mm

接种块大小肉眼观察、测量边长3mm～5mm，厚2.5mm～3mm

菌丝生长量长满斜面

菌丝体特征整齐浓密、丝状或绒毛状，白色

菌丝体表面均匀、平整、无角变

菌种外观肉眼观察

菌落边缘整齐

菌丝分泌物无

杂菌菌落无

斜面背面外观肉眼观察培养基贴壁、不干缩，颜色均匀、无暗斑、无明显色素

气味鼻嗅有灵芝菌种特有的香味，无酸、臭、霉等异味

子实体原基肉眼观察无

肉眼观察，必要时

纯度纯培养物，无虫（螨）体等生物

5×放大镜观察

菌丝显微形态粗壮、丰满、均匀

菌种微观显微镜

锁状联合有

4.1.1.3菌丝长速

采用PDA培养基，接种后26℃～28℃避光培养，48h内菌丝萌发定植，8d～10d菌丝长满18mm×180

mm试管斜面。

4.1.1.4母种栽培性状检验

在棉籽壳68%、阔叶木屑20%、麦麸10%、石膏1%、石灰1%、pH6.0～6.5，含水量55%～60%的培

养基上，应符合附录A的方法，确证母种栽培性状合格后，方可生产原种和栽培种。

4.1.1.5贮存要求

常温下贮存时间不超过7d，4℃～6℃下贮存时间不超过90d。

4.1.2原种质量

4.1.2.1容器

容器应符合NY/T528的规定。菌种瓶封口应使用透气和滤菌的棉塞或无棉盖体，菌种袋封口应使用

套环或扎口。

4.1.2.2感官要求

2

DB37/T4252—2020

原种感官要求应符合表2的规定。

表2原种感官要求

项目检测方法要求

容器肉眼观察完整、无损、洁净

封口物肉眼观察干燥、洁净、松紧适度，能透气和滤菌

培养基上表面距瓶（袋）口的距离肉眼观察、测量（50±5）mm

接种量肉眼观察、测量每瓶（袋）接1.5cm～2cm的母种一块

菌丝生长量长满容器

菌丝体特征洁白浓密、生长旺健

培养物紧贴瓶（袋）壁，无干缩，无菌皮

菌种培养物表面菌丝体均匀一致，无角变，无高温抑制线

肉眼观察

外观培养物表面分泌物无，允许有少量无色或浅黄色透明水珠

杂菌菌落无

拮抗现象无

子实体原基无

气味鼻嗅有灵芝菌种特有的清香味，无酸、臭、霉等异味

肉眼观察，必要时5×放大镜

纯度纯培养物，无虫（螨）体等生物

观察

菌种菌丝显微形态粗壮、丰满、均匀

显微镜

微观锁状联合有

4.1.2.3菌丝长速

在棉籽壳47%、阔叶木屑40%、麦麸10%、葡萄糖1%、石膏1%、石灰1%、pH6.0～6.5，含水量55%～

62%的培养基上，接种后，26℃～28℃，空气相对湿度50%～70%条件下，避光培养，菌丝应在35d～

37d长满750mL菌种培养瓶。

4.1.2.4贮存要求

在清洁、通风、干燥（空气相对湿度50%～70%）、避光的室内，常温下贮存时间不超过10d，4℃～

6℃下贮存时间不超过30d。

4.1.3栽培种质量

4.1.3.1容器

容器应符合NY/T528的规定，容器封口应符合4.1.2.1规定。

4.1.3.2感官要求

栽培种感官要求应符合表3的规定。

3

DB37/T4252—2020

表3栽培种感官要求

项目检测方法要求

容器肉眼观察完整、无损、洁净

封口物肉眼观察干燥、洁净、松紧适度，能透气和滤菌

培养基上表面距瓶（袋）口的距离肉眼观察、测量（50±5）mm

接种量肉眼观察、称量12g～15g/瓶（袋）

菌丝生长量长满容器

菌丝体特征洁白浓密、生长旺健、饱满

培养物紧贴（瓶）袋壁，无干缩，无菌皮

不同部位菌丝体生长均匀，色泽一致，无角变，无高温抑制线

菌种外观肉眼观察

培养物表面分泌物无，允许有少量无色或浅黄色透明水珠

杂菌菌落无

拮抗现象无

子实体原基无

气味鼻嗅有灵芝菌种特有的清香味，无酸、臭、霉等异味

肉眼观察，必要时5×放

纯度纯培养物，无虫（螨）体等生物

大镜观察

菌丝显微形态粗壮、丰满、均匀

菌种微观肉眼观察

锁状联合有

4.1.3.3菌丝长速

在棉籽壳48%、阔叶木屑40%、麦麸10%、石膏1%、石灰1%、pH6.0～6.5、含水量55%～62%的培

养基上，接种后26℃～28℃避光培养，空气相对湿度50%～70%，菌丝应在35d～40d长满17cm×35cm

菌种袋。

4.1.3.4贮存要求

在清洁、通风、干燥（空气相对湿度50%～70%）、避光的室内，常温下贮存时间不超过15d，4℃～

6℃下贮存时间不超过45d。

4.2液体菌种

4.2.1摇瓶液体菌种质量

4.2.1.1容器

使用1L～2L三角烧瓶或抽滤瓶，瓶口应使用能透气和滤菌的封口膜或瓶塞封口。

4.2.1.2感官要求

摇瓶液体菌种感官要求应符合表4的规定。

4

DB37/T4252—2020

表4摇瓶液体菌种感官要求

项目检测方法要求

菌液色泽肉眼观察菌丝体呈白色，滤液呈淡黄色

菌液气味鼻嗅有灵芝液体菌种培养时特有的气味，无异味

菌液形态肉眼观察菌液澄清透明不浑浊，菌丝体密集

菌种微观显微镜菌丝有隔膜、有锁状联合，无杂菌

4.2.1.3理化性状要求

在葡萄糖20g/L、蛋白胨3g/L、牛肉膏3g/L、磷酸二氢钾1g/L、硫酸镁0.5g/L，维生素B15mg/L

的培养基中，pH自然，接种7～8块2mm～3mm的母种菌块，避光静置24h后置于恒温摇床上，25℃～28℃、

140r/min～160r/min培养4d～6d，摇瓶液体菌种理化指标应符合表5的规定。

表5摇瓶液体菌种理化指标

项目检测方法要求

终止pHpH计或pH试纸4.0～5.5

菌丝体湿重（mg/mL）10000r/min离心5min，去掉上清液称重≥50

4.2.1.4贮存要求

在清洁、通风、干燥（空气相对湿度50%～70%）、避光的室内，常温下贮存时间不超过2d，4℃～

6℃下贮存时间不超过7d。

4.2.2发酵罐液体菌种质量

4.2.2.1容器

使用100L～800L食用菌液体菌种培养专用发酵罐，不锈钢材质、应符合GB150.1的要求，经有关

部门检验合格。

4.2.2.2感官要求

发酵罐液体菌种感官要求应符合表6的规定。

表6发酵罐液体菌种感官要求

项目检测方法要求

菌液色泽肉眼观察菌丝体呈白色，滤液呈淡黄色

菌液气味鼻嗅有灵芝液体菌种培养时特有的气味，无异味

菌液形态肉眼观察、手感菌液澄清透明不浑浊，稍粘稠；菌丝体密集、均匀悬浮于液体中不分层

显微镜，营养肉汤固体

菌种微观菌丝粗壮、分枝密度高、有隔膜，可见锁状联合，无杂菌

和液体培养基

4.2.2.3理化性状要求

5

DB37/T4252—2020

在葡萄糖20g/L，蛋白胨3g/L，牛肉膏3g/L，磷酸二氢钾1g/L，硫酸镁0.5g/L，维生素B15mg/L，

消泡剂0.3g/L的培养基中，pH自然，接种量为0.5%～1.0%，发酵罐持续通入无菌空气，维持罐压0.02

MPa～0.03MPa，25℃～28℃培养6d～7d，发酵罐液体菌种理化指标应符合表7的规定。

表7发酵罐液体菌种理化指标

项目检测方法要求

终止pHpH计或pH试纸3.6～5.5

菌丝体湿重（mg/mL）10000r/min离心5min，去掉上清液称重≥50

4.2.2.4贮存要求

发酵罐液体菌种生产后应及时使用。