DB15∕T 2130-2021 土壤中硝基呋喃类药物残留量的测定 高效液相色谱法

ICS65.100.01CCSZ18152021-03-25发布IDB15/T2130—2021本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由赤峰市农牧科学研究院提出。本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。本文件起草单位：赤峰市农牧科学研究院。本文件主要起草人：乌仁图雅、文辉、荣迪、邓宇、王岩、王国全、娜日娜、王盛男、曲颖超、陈琪、赵剑平、李雯雯、索力墨、李峰、正月、刘丹竹、刘汉宇。DB15/T2130—20211土壤中硝基呋喃类药物残留量的测定高效液相色谱法本文件规定了土壤中呋喃西林、呋喃妥因、呋喃唑酮和呋喃它酮4种硝基呋喃类药物残留量的高效液相色谱测定方法。本文件适用于土壤中硝基呋喃类药物残留量的测定。2规范性引用文件仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T395农田土壤环境质量监测技术规范3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4原理试样经60%乙腈溶液振荡、超声提取处理后，HLB固相萃取柱净化，高效液相色谱法测定，外标法定量。5试剂和材料5.5乙酸铵(C2H7NO2)。5.6硝基呋喃类药物标准品：呋喃西林(furacilin),纯度大于等于99.9%；呋喃妥因(nitrofurantoin),纯度大于等于99.9%；呋喃唑酮(furazolidone),纯度大于等于99.9%；呋喃它酮(furaltanone),纯度大于等于99.9%。mL。2DB15/T2130—20215.8硝基呋喃类药物标准储备液（100μg/mL称取4种硝基呋喃类药物各10mg(精确到0.00001g)于4个100mL容量瓶中，加乙腈（5.1）超声溶解定容至刻度，超声溶解。0℃~4℃保存6个月。5.9硝基呋喃类药物混合标准储备液（10μg/mL精密量取100μg/mL的4种硝基呋喃类药物标准贮备液各10mL于100mL容量瓶中，用乙腈（5.1）定容至刻度。0℃~4℃保存6个月。定容至刻度，配制成0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.50μg/mL、1.00μg/mL、2.00μg/mL和4.00μg/mL的系列标准工作液。0℃~4℃保存1周。5.11乙腈水（60%量取600mL乙腈（4.1）与400mL水混匀。5.12甲酸乙腈（0.1%量取1mL甲酸（4.3）与999mL乙腈混匀。5.13甲醇溶液（10%量取100mL甲醇（4.2）与900mL水混匀。5.14乙腈水（10%量取100mL乙腈（4.1）与900mL水混匀。5.15固相萃取柱：HLB柱，规格为60mg/3mL。5.17微孔滤膜：规格为0.2μm。6仪器和设备6.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。6.2分析天平：感量0.00001g。6.3分析天平：感量为0.01g。6.4离心机：转速不低于4000r/min。6.5振荡器：振荡频率不低于300r/min。6.6超声波清洗器。6.7旋转蒸发仪：配有50mL茄型瓶。6.8固相萃取装置。6.9移液枪：1000μL。6.10移液枪：100μL。6.11具塞离心管：50mL。6.12样品筛：0.5mm。6.13容量瓶：10mL、100mL、1000mL。6.14漩涡混匀仪：振荡频率不低于2800r/min。DB15/T2130—202137分析步骤7.1样品采集土壤样品采集按NY/T395的规定执行。7.2制备样品采集后去杂物后充分混匀，在室温条件下自然风干，粉粹，全部通过0.5mm样品筛，装入洁净容器，密封保存。7.3样品的提取、净化7.3.1提取称取试样2g（精确至0.01g）于50mL具塞离心管中，加入15mL乙腈水溶液（5.11以200r/min振荡5min（6.5）,超声提取15min（6.6以4000r/min离心10min（6.4重复提取3次，上清液合并摇匀，置于50mL茄形瓶中，45℃旋转蒸发至近干（6.7用10mL甲酸乙腈（5.12）溶解，待净化。7.3.2净化将HLB柱安装于固相萃取装置上（6.8依次用甲醇（5.2）3mL、水3mL活化。将样品液通过固相萃取柱，用水3mL、用3mL甲醇溶液（5.13）淋洗、抽真空1min，用10mL甲醇（5.2）洗脱，收集供高效液相色谱仪测定。7.3.3空白实验除不加样品外，其余均按照上述测定步骤进行。7.4测定7.4.1液相色谱仪参考条件7.4.1.1色谱柱：C18色谱柱，柱长250mm，内径4.6mm，粒径4.6μm。7.4.1.2流动相：乙腈：0.05%乙酸铵，体积比80:20，调至pH值为4.8。7.4.1.3流速：1.0mL/min。7.4.1.4检测波长：365nm。7.4.1.5柱温：40℃。7.4.1.6进样量：20μL。7.4.2液相色谱测定7.4.2.1标准系列工作曲线的绘制在仪器最佳条件下，将标准系列工作溶液（5.10）分别注入液相色谱仪中，测定相应的色谱峰，以标准系列工作液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线。标准溶液液相色谱图参见附录A。DB15/T2130—202147.4.2.2试样溶液及空白溶液的测定分别移取试样溶液和空白溶液，分别注入液相色谱仪中。以色谱峰面积进行外标法定量。试样液中硝基呋喃类的响应值均应在仪器检测的线性范围之内。试样浓度不在线性范围内时将样品稀释后进样。8结果计算土壤中硝基呋喃类残留量Xi质量分数（mg/kg）表示,按式（1）计算:式中：Xi——试样硝基呋喃类的含量，单位为毫克每千克（mg/kgCi——从工作曲线得到的被测组分溶液浓度，单位为微克每毫升(μg/mLV——提取液总体积，单位为毫升（mLf——稀释倍数；m——样品称样量，单位为克（g）。9精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。10检出限、定量限和回收率10.1本方法的检出限：呋喃西林0.16mg/kg；呋喃托因0.14mg/kg；呋喃唑酮0.16mg/kg；呋喃它酮0.12mg/kg。10.2本方法的定量限：呋喃西林0.34mg/kg；呋喃托因0.30mg/kg；呋喃唑酮0.34mg/kg；呋喃它酮0.27mg/kg。10.3呋喃西林回收率：88.59%~102.92%，相对标准偏差（RSD2.24%~4.20%；呋喃妥因回收率：74.43%~89.72%，相对标准偏差（RSD0.91%~4.29%；呋喃唑酮回收率：78.61%~91.81%，相对标准偏差（RSD0.65%~3.85%；呋喃它酮回收率：81.47%~89.86%，相对标准偏差（RSD1.70%~4.49%。DB15/T2130—20215（资料性）土壤中硝基呋喃