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文档简介
DB61/T1472.2—2021
目 次
前言.....................................................................................................................................................................II
1范围.................................................................................................................................................................1
2规范性引用文件.............................................................................................................................................1
3术语和定义.....................................................................................................................................................1
4符号和缩略语.................................................................................................................................................2
5质量要求.........................................................................................................................................................2
6试验方法.........................................................................................................................................................4
7检验规则.........................................................................................................................................................5
8包装、运输、贮存.........................................................................................................................................5
附录A(规范性)常用培养基及其配方........................................................................................................6
附录B(规范性)常用原种和栽培种培养基及其配方...............................................................................7
附录C(规范性)栽培性状检验....................................................................................................................8
I
DB61/T1472.2—2021
前 言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》给出的规
则起草。
本文件《灵芝生产技术规范》分为五个部分:
——第1部分:产地环境
——第2部分:菌种
——第3部分:液体菌种生产技术
——第4部分:袋料栽培技术
——第5部分:段木栽培技术
本文件为DB61/T1472—2021的第2部分。
本文件由陕西省农业农村厅提出并归口。
本文件起草单位:陕西省微生物研究所、陕西省园艺技术工作站、杨凌康宇生物科技有限公司、陕
西国人菌业科技产业园有限公司、陕西崇德生物技术发展有限公司。
本文件主要起草人:雷萍、张文隽、吴亚召、马婧嘉、王周平、渠敬峰、陈磊、张伟兵、贾静、王
磊、陈惠、钱磊。
本文件由陕西省微生物研究所负责解释。
本文件首次发布。
联系信息如下:
单位:陕西省微生物研究所
地址:西安市雁塔区西影路76号
邮编:710043
电话/p>
II
DB61/T1472.2—2021
灵芝生产技术规范第2部分:菌种
1范围
本文件规定了食用灵芝菌种的术语和定义、符号和缩略语、质量要求、试验方法、检验规则及包装、
运输、贮存。
本文件适用于食用灵芝菌种生产、流通和使用。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB/T12728食用菌术语
NY/T528食用菌菌种生产技术规程
NY/T1742食用菌菌种通用技术要求
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
母种stockculture
经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物。也称一级种,试管种。
[来源:GB/T12728-2006,2.5.7]
3.2
原种pre-culturspawn
由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。也称二级种。
[来源:GB/T12728-2006,2.5.8]
3.3
栽培种spawn
由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物栽培种只能用于栽培,不可再次扩大繁殖菌种。也称
三级种。
[来源:GB/T12728-2006,2.5.9]
3.4
拮抗现象antagonism
1
DB61/T1472.2—2021
具有不同遗传基因的菌落间互相抑制产生不生长区带或形成不同形式线行边缘的现象。
[来源:GB/T12728-2006,2.3.21]
3.5
角变sector
因菌丝体局部变异或感染病毒而导致菌丝变细、生长缓慢、菌丝体表面特征成角状异常的现象。
[来源:GB/T12728-2006,2.5.17]
3.6
锁状联合clampconnection
一种锁状桥接的菌丝结构,是异宗结合担子菌次生菌丝的双核菌丝体进行细胞分裂时产生的,常发
生在菌丝顶端,开始时在细胞上产生突起,并向下弯曲,与上部细胞连接,形如锁状。
[来源:GB/T12728-2006,2.2.5]
3.7
高温圈high-temperaturedline
食用菌菌种在培养过程中受高温和通气不足的不良影响,培养物出现的圈状发黄、发暗或菌丝变稀
弱的现象。
[来源:GB/T12728-2006,2.5.18]
3.8
种性charactersofvariety
食用菌的品种特性是鉴别食用菌菌种或品种优劣的重要标准之一。一般包括对温度、湿度、酸碱度、
光线和氧气的要求,抗逆性、丰产性、出菇迟早、出菇潮数、栽培周期、商品质量及栽培习性等农艺性
状。
[来源:GB/T12728-2006,2.5.4]
4符号和缩略语
下列缩略语适用于本文件。
4.1PDA
马铃薯葡萄糖琼脂培养基
4.2CPDA
综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基
5质量要求
5.1母种
5.1.1容器规格
应符合NY/T528-2010中4.7.1.1规定。
2
DB61/T1472.2—2021
5.1.2感官要求
母种感官要求应符合表1规定。
表1母种感官要求
项目要求
菌丝体特征白色至黄色,后期变褐色或顶端菌丝有褐色线、浓密、短绒状
培养物表面菌丝体均匀、平展、无角变、无高温圈、无子实体原基
菌丝分泌物无
菌种外观菌落边缘整齐
杂菌菌落无
拮抗现象无
斜面背面外观培养基不干缩,颜色均匀、无暗斑
气味有灵芝菌种特有的清香味,无异味
5.1.3菌丝生长速度
在PDA培养基上,在遮光、26℃±2℃温度条件下,菌丝8d~12d长满斜面培养基表面。
5.1.4菌种的细菌、霉菌污染
感官检验菌种有暗斑、异味等污染现象,检出不用。
5.1.5栽培性状
所供母种需经出芝试验确证农艺性状和商品性状等种性合格,符合NY/T1742-2009中3.1.6规定。
5.2原种和栽培种
5.2.1容器规格
应符合NY/T528-2010中4.7.1.2和4.7.1.3规定。
5.2.2感官要求
原种和栽培种感官要求应符合表2规定。
表2原种和栽培种感官要求
项目要求
菌丝体特征白色,浓密,短绒状
培养物表面菌丝体均匀,平展,无角变,无高温圈
培养基及菌丝体菌种紧贴瓶(袋)壁,无干缩
菌种外观培养物表面分泌物无
杂菌菌落无
虫(螨)体无
拮抗现象无
子实体原基无
气味有灵芝菌种特有的清香味,无异味
3
DB61/T1472.2—2021
5.2.3菌丝生长速度
在适宜培养基上,在遮光、适温(26℃±2℃)条件下,原种30d~35d菌丝长满容器,栽培种40d~
45d菌丝长满容器。
5.3菌种的生物学指标
母种、原种和栽培种的菌丝形态白色后变黄色、浓密、均匀(接种块部分除外),有锁状联合,无
杂菌,无害虫。
6试验方法
6.1感官检验
感官要求检验方法按表3逐项进行。
表3感官检验方法
项目检验方法
菌丝体特征肉眼观察
菌丝分泌物、菌落边缘、虫(螨)体肉眼观察
杂菌菌落肉眼观察,必要时用5×放大镜观察
菌种背面外观肉眼观察
拮抗现象肉眼观察
气味鼻嗅
6.2细菌、霉菌检验
6.2.1细菌检验
将检验样本按无菌操作接入附录A营养肉汤培养液中,在温度25℃~28℃振荡培养1d~2d,观察
培养液是否混浊,培养液混浊,为有细菌污染;培养液澄清,为无细菌污染。
6.2.2霉菌检验
将检验样本按无菌操作接种于PDA培养基上,在温度26℃±1℃培养3d~5d,菌落出现灵芝菌以外
的杂色者,或有异味者为霉菌污染物,必要时进行水封片镜检。
6.3菌丝生长速度
6.3.1母种
按附录A中配方任选其一配制,无菌操作接种,在温度26℃±2℃条件下培养,记录长满斜面所需
天数。
6.3.2原种和栽培种
按附录B中配方任选其一配制,无菌操作接种,在温度26℃±2℃条件下培养,记录长满容器所需
天数。
6.4农艺性状
4
DB61/T1472.2—2021
将被检母种制成原种和栽培种。按照附录B规定的配方任选其一,制作出芝菌袋45个。接种后平均
分3组进行常规管理,按附录C格式做好记录,统计检验结果。同时将该母种的出发菌株设为对照,亦做
同样处理。对比二者的检验结果,以时间计的检验项目中,被检母种的任何一项时间较对照菌株推迟5d
以上(含5d)者,为不合格;产量显著低于对照菌株者,为不合格;子实体外观形态与对照明显不同
程度或畸形者,为不合格。
6.5留样
各级菌种都应留样备查,留样的数量应每个批号菌种3支~5支,于4℃~6℃下贮存6个月。
6.6菌种的微生物学指标检验方法
6.6.1菌丝形态
肉眼观察母种、原种和栽培种菌丝形态,粗壮、丰满、均匀(接种块部分除外)并且大部分有锁状
联合为合格,否则不合格。
6.6.2杂菌
肉眼观察母种、原种和栽培种无杂菌污染为合格。
7检验规则
7.1组批与抽样
7.1.1母种按品种、培养条件、接种时间分批编号,原种、栽培种按菌种来源、制种方法和接种时间
分批编号。按批随机抽取被检样品。检验项目为本文件规定的所有质量要求。
7.1.2母种、原种、栽培种的抽样量分别为该批菌种量的5%、2%、1%。但每批抽样数量不得少
于10支(瓶、袋);超过100支(瓶、袋)的,随机取样100支。
7.2判定规则
按质量要求进行检验。检验项目全部符合质量要求者,为合格菌种;其中任何一项不符合要求,均
为不合格菌种。
8包装、运输、贮存
按照NY/T1742的要求执行。
5
DB61/T1472.2—2021
AA
附录A
(规范性)
常用培养基及其配方
A.1PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)
马铃薯200g(用浸出汁),葡萄糖20g,琼脂20g,水1000mL。
A.2CPDA培养基(综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基)
马铃薯200g(用浸出汁),葡萄糖20g,琼脂20g,磷酸二氢钾2g,硫酸镁0.5g,水1000mL。
A.3加富马铃薯葡萄糖琼脂培养基
马铃薯200g(用浸出汁),葡萄糖20g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,蛋白胨5g,琼脂20g,VB110
mg,水1000mL。
A.4马铃薯麸皮葡萄糖琼脂培养基
马铃薯200g(用浸出汁),麸皮50g(用浸出汁),葡萄糖20g,琼脂20g,水1000mL。
A.5营养肉汤培养液
蛋白胨10g,氯化钠5g,牛肉膏5g,水1000mL,pH7.4。
6
DB61/T1472.2—2021
BB
附录B
(规范性)
常用原种和栽培种培养基及其配方
B.1杂木屑棉籽壳培养基
杂木屑40%,棉籽壳40%,麸皮18%,石膏1%,蔗糖1%,料水比1﹕1.2~1﹕1.4。
B.2木屑培养基
杂木屑78%,麸皮20
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